五味健体口服液对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的:考察五味健体口服液对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法:采用环磷酰胺制备小鼠免疫低下模型,通过检测小鼠脾淋巴细胞转化能力、碳粒廓清指数、胸腺指数、脾脏指数、血常规及血清中IgG、TNF-α、IL-2、IFN-γ含量等指标,探讨五味健体口服液对小鼠免疫功能的调节作用。结果:在小鼠免疫低下模型中,与模型组比较,五味健体口服液可显著提高免疫低下小鼠淋巴细胞增殖能力、胸腺指数、脾脏指数、碳粒廓清指数(P0.05);并能提高血清IgG、TNF-α、IL-2、IFN-γ含量及外周血中WBC、RBC、HGB、PLT含量(P0.05)。结论:五味健体口服液能显著增强免疫低下小鼠特异性和非特异性免疫功能。     

BAC5-scFv的表达、复性及活性检测

目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱纯化变性的scFv。经稀释、透析及尿素梯度凝胶层析柱3种方法进行复性。用细胞免疫组化染色和蛋白印迹法(Western blot),鉴定复性后的BAC5-scFv的免疫活性。结果Ni-NTA His Bind亲和层析柱能有效纯化变性的scFv。以尿素梯度凝胶层析柱复性的蛋白回收率最高。免疫细胞化学染色法检测及Western blot分析证实,复性后的BAC5-scFv可与CNE2细胞上的抗原特异性结合。结论以包涵体形式表达的BAC5-scFv经变性、纯化及复性后,获得良好的免疫活性,为大量制备具有活性的BAC5-scFv,并用于鼻咽癌的放射免疫显像和治疗研究奠定了基础。     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞体外增殖的影响

薏苡仁配合放射治疗晚期鼻咽癌(NPC)已取得较好的近期和远期效果[1].但单独使用薏苡仁能否抗NPC还值得深入研究.本文在既往研究的基础上,探讨薏苡仁的有效成分薏苡仁酯(CXL)对人NPC细胞增殖的影响及其可能的作用机理.     

姜黄素对人喉癌细胞株Hep-2增殖和端粒酶活性的影响

目的研究姜黄素（curcumin）对人喉癌细胞Hep-2增殖和端粒酶活性表达水平的影响。方法CCK-8法检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后24h、48h、72h的细胞增殖活性：集落形成试验检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后的细胞增殖抑制率;StretchPCR-银染法检测细胞端粒酶活性变化。RT—PCR分析端粒酶主要组分hTERT的mRNA表达情况。结果①姜黄素对Hep-2细胞的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性。五种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μol／L、80μmol／L、100μol／L）姜黄素作用12、24、48、72小时后,IC50分别为81．17μmol／L、40．90μmol／L、33．26μmol／L、31．63μmol／L;②四种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μmol／L、80μmol／L）姜黄素作用于Hep-2细胞48h,-周后各组Hep-2细胞集落形成数和细胞增殖抑制率均呈浓度依赖性．其细胞增殖抑制率与对照组相比,分别为36．25％、57．4％、98．48％、100％;③60μmol／L姜黄素作用于Hep-2细胞24、48、72小时后。与对照组相比,端粒酶活性总光密度值（IOD）分别下降23．19％、60．28％和70．15％,各时间组间有显著性差异（P〈0．01）;端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达水平IOD值分别下降2．90％、58．69％和88．35％,各时间组间有显著性差异（P〈o．01）。结论姜黄素可抑制体外培养的Hep-2细胞的增殖活性,下调hTERTmR．NA的转录水平并抑制细胞的端粒酶活性,有较好的临床应用前景。     

环氧化端羧基丁腈橡胶的制备及其对环氧树脂的增韧效果

通过甲酸和双氧水将液体端羧基丁腈橡胶(CTBN)中的双键氧化,制备液体环氧化端羧基丁腈橡胶(ECTBN),并将ECTBN用于环氧树脂增韧改性的研究。详细考察了环氧化反应的影响因素,并确定了最佳的环氧化反应条件。以哌啶为固化剂,分别制备了CTBN/环氧树脂和ECTBN/环氧树脂固化物。用扫描电镜和透射电镜观察了固化物的形态结构,发现CTBN以微米尺寸分散在基体中,而ECTBN则以纳米尺寸分散在基体中。分别对固化物的拉伸性能和冲击性能进行测试,结果表明,ECTBN对环氧树脂具有更好的改性效果。用ECTBN增韧环氧树脂,复合物的冲击强度与CTBN改性复合物相当,明显高于纯树脂;杨氏模量和拉伸强度明显高于CTBN改性复合物;环氧化程度越高,复合物的强度和模量越高。     

125I标记雄激素受体TFO抗前列腺癌细胞增殖的研究

目的探讨反基因放射治疗对雄激素受体（AR）表达和前列腺癌细胞增殖的影响。方法用Iodogen法对AR三螺旋形成寡核苷酸（TFO）进行直接^125I标记，经脂质体介导转染LNCaP前列腺癌细胞株，于转染后24和48h分别采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）方法测定癌细胞增殖活性，RT-PCR方法检测ARmRNA表达，免疫组织化学方法检测AR蛋白表达。结果^125I-TFO的标记率为63．7％，放化纯为95．6％，比活度为80．1kBq／μg。相同TFO浓度下，^125I-TFO组LNCaP细胞的AR表达水平显著低于TFO组（P〈0．01），^125I-TFO对LNCaP细胞增殖的抑制率显著高于TFO（P〈0．01）。结论反基因放射治疗对AR表达和前列腺癌细胞增殖的抑制作用明显强于单纯的反基因治疗。     

分子医学实验室标准化操作规程的编写与探讨

分子医学实验室针对新形势下出现的人手不足、技术力量断层、工作任务重等实际问题,在实验教学与管理工作中引入标准化操作规程的管理理念和做法,编写了实验技术、仪器设备、生物安全、管理程序四大类的SOP文件并付诸实施,为建立规范化的实验教学与管理质量控制体系打下基础。     

PYM-BAC_5和~(131)I-BAC_5联合导向治疗鼻咽癌的实验研究

背景与目的:现代的肿瘤治疗提倡综合治疗,肿瘤的导向综合治疗具有研究价值。本实验在研究鼻咽癌放射免疫治疗的基础上,观察平阳霉素(pingyangmycin,PYM)和131I与鼻咽癌单抗BAC5的偶联物PYM-BAC5和131I-BAC5对鼻咽癌细胞CNE2的联合抑制效果。方法:用葡聚糖T-40作中间载体偶联PYM和BAC5,用测定抑菌活性和免疫活性的方法鉴定偶联物。用氯胺T法制备131I-BAC5。设置单独用药组(游离PYM,131I-mIgG)、单独导向用药组(PYM-BAC5,131I-BAC5)以及联合导向用药组(PYM-BAC5+131I-BAC5)共5个实验组,用MTT法测定各药物组的抑制作用。结果:PYM-BAC5和游离PYM对CNE2的半数抑制浓度(IC50)分别为46.57μg/ml和316.70μg/ml;131I-BAC5和131I-mIgG对CNE2的IC50分别为4.42×105Bq/ml和>11.10×105Bq/ml;联合用药组中PYM-BAC5的IC50为7.01μg/ml,131I-BAC5的IC50为0.54×105Bq/ml。结论:(1)导向用药组的抑瘤效果明显高于非导向组;(2)联合导向用药组的抑菌效果明显高于单独导向用药组。     

铼-188和平阳霉素联合导向治疗前列腺癌的体外作用

 [目的]探讨前列腺特异膜抗原单克隆抗体7E11C5.3介导铼-188和平阳霉素（PYM）导向治疗前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用。[方法]以葡聚糖为中介体制备7E11C5.3-PYM偶联物，间接ELISA法测定免疫活性，2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）法测定抑菌活性。采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物，纸层析法测定标记率和放化纯度，直线回归外推法测定免疫活性分数。四唑盐（MTT）法测定体外细胞毒作用。[结果]7E11C5.3-PYM偶联物中7E11C5.3和PYM的克分子比为1∶54，偶联后单抗的免疫活性降低了10%～20%，偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的25%。188Re-7E11C5.3的标记率为93.16%±2.18%，放化纯度为95.62%±0.48%，免疫活性分数为74.86%±1.86%。7E11C5.3-PYM和188Re-7E11C5.3对LNCaP细胞的抑制作用分别强于游离PYM和188ReO4-；两者单独用药时，其半数抑制浓度（IC50）分别为（10.17±2.06）µg/mL和（23.38±3.73）×104 Bq/mL；两者联合用药时，其IC50值分别为（1.83±0.20）µg/mL和（6.82±0.73）×104 Bq/mL。[结论] 7E11C5.3-PYM和188Re-7E11C5.3联合用药对前列腺癌细胞的抑制作用显著强于单独用药。     

开放性实验教学与学生科研创新能力的培养

“以实验为中心安排教学”是近年来美国高校正在开展的一项极有影响力的实验教学改革计划（简称EBE计划），其教学重点不在知识的掌握而在能力的培养。为了更好地强化学生的实验操作和科研创新能力，在全面查阅EBE计划相关文献的基础上，充分结合自身的实际状况并加以改进，创建了一个以技能训练为基础、以研究性实验为核心、以综合能力培养为目标的开放性实验教学模式。在完成分子医学基本实验课程的基础上，以学生实验小组的形式开展灵活多样的研究性实验和学生科研活动。它不仅能最大限度地拓展仪器使用空间为教学服务，更重要的是能体现先进的现代化教学思想，在实验教改上具有重要的推广意义。