分子医学实验室仪器设备管理的实践与探索

仪器设备管理是实验室工作的重要内容.分子医学实验室自组建以来,建立健全了仪器设备管理制度,在开放与培训、仪器共享与信息化管理方面进行了探索与实践,提高了仪器设备的使用效益,使实验管理与实验教学工作走上了良性循环、可持续发展的道路.     

抗鼻咽癌单克隆抗体BAC5单链抗体原核表达载体的构建和表达

[目的]构建抗鼻咽癌单克隆抗体BAC5单链抗体的原核表达载体并观察其表达,为开展抗鼻咽癌单链抗体的进一步研究奠定基础.[方法]应用RT-PCR技术,扩增出鼻咽癌单克隆抗体BAC5的轻链、重链可变区基因,通过一段编码肽的序列进行连接,构建BAC5单链抗体表达载体pET22b-scFv,导人BL21(DE3)表达菌,并进行诱导表达.SDS-PAGE凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达.[结果]克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET22b-scFv表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主.[结论]成功构建了能表达BAC5单链抗体的原核表达载体.     

188Re-7E11C5.3抑制前列腺癌细胞增殖

目的：探讨铼-188（188Re）标记前列腺特异膜抗原单克隆抗体7E11C5.3（188Re-7E11C5.3）对前列腺癌细胞系LNCaP的体外抑制作用。方法：采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物，纸层析法测定标记率和放化纯度，直线回归外推法测定免疫活性分数。四唑盐（MTT）法测定其体外细胞毒作用。结果：188Re-7E11C5.3的标记率为（93.16±2.18）%，放化纯度为（95.62±0.48）%，免疫活性分数为（74.86±1.86）%。188Re-7E11C5.3对LNCaP细胞的生长抑制作用明显强于188Re标记的正常鼠IgG（mIgG）和游离188ReO^-₄，其半数有效抑制浓度（IC₅₀）分别为（23.38±3.73）×10⁷ Bq/L，（59.21±8.02）×10⁷ Bq/L和（68.89±10.91）×10⁷ Bq/L。结论：188Re-7E11C5.3能有效抑制体外培养LNCaP细胞的增殖，可用于前列腺癌的放射免疫治疗。     

分子医学实验教学资源库的开发与应用

分子医学实验教学资源库的建设是保证和提高实验教学质量,有效利用时间和空间,提高教学效率的重要环节,而其网络特性和多媒体性质则赋予了实验教学更多的灵活性、主动性和形象性。文章介绍了分子医学实验教学资源库的开发过程和主要内容及其在实验教学中的作用。     

125I-IL-2在自身免疫胰岛炎NOD小鼠中核素显像应用的探讨

目的探讨IL-2作为自身免疫胰岛炎核素显像药物的可行性。方法将38只雌性未发病NOD小鼠和26只Balb／c小鼠随机分为5个时间组，尾静脉注射酶法标记的^125I-IL-2，相应时间处死后测定血液和腹腔各脏器放射性。另3只NOD小鼠在注射^125I-IL-2 30min后行SPECT—CT仪扫描显像。结果注射后10至120min，NOD小鼠胰腺^125I-IL-2聚集性明显高于Balb／c小鼠，且胰腺放射性与胰岛炎程度呈线性正相关（R^2=0．614～0．776，P〈0．05）；但胰腺／周围组织放射性比值普遍较低；去除脾脏、肝脏和双肾，NOD小鼠胰腺方可显像。结论^125I-IL-2在自身免疫胰岛炎的NOD小鼠胰腺有相对高聚集性，但有较高放射性背景，影响局部显像效果。     

薏苡仁酯对顺铂抑制人鼻咽癌细胞增殖的加强作用①

目的探讨薏苡仁酯(coixenolide, CXL)对顺铂(DDP)抑制人鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖的影响。方法采用微量细胞克隆形成法检测CNE-2Z对药物的敏感性。结果DDP呈剂量依赖性抑制CNE-2Z的增殖,ID     

开放型实验室教学管理的探讨

作为基础医学实验教学中心分子医学实验教学平台,我们承担了本校医科类本科生和研究生的分子医学基础实验课程．为了更好地强化学生的实验操作能力和科研创新能力。我们借鉴了美国高校的实验教学改革计划——EBE计划的教学理念。并充分结合自身的实际状况加以改进。创建了一个以技能训练为基础、以研究性实验为核心、以综合能力培养为目标的开放性实验教学模式。     

反基因及反义寡核苷酸对人前列腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 探讨三螺旋形成寡核苷酸(TFO)和反义寡核苷酸(ASO)对人前列腺癌裸鼠移植瘤雄激素受体(AR)表达和肿瘤细胞生长的抑制作用.方法 32只荷LNCaP-CA-2前列腺癌移植瘤裸鼠随机分成4组:TFO治疗组、ASO治疗组、序列对照寡核苷酸(SCO)非特异性对照组和阴性对照组.采用瘤内注射给药,寡核苷酸用量25 mg/kg,隔天给药1次,共14次.观察裸鼠体重和肿瘤体积变化.测量移植瘤重量计算抑瘤率,放射免疫分析法检测裸鼠血清前列腺特异抗原(PSA)水平,RT-PCR方法检测肿瘤组织AR Mrna表达,免疫组化和放射配基结合分析方法检测AR蛋白表达.结果 TFO和ASO均能有效抑制移植瘤生长,抑瘤率分别为67.55%和41.06%,与对照组相比差异有统计学意义(均P<0.01).TFO组的瘤重和肿瘤组织AR表达水平显著低于ASO组(均P<0.05),TFO组动物血清PSA水平[(6.6±1.0)ng/ml]也显著低于ASO组[(19.8±3.7)ng/ml,P<0.05].结论 TFO对前列腺癌裸鼠移植瘤AR表达和肿瘤生长的抑制作用强于ASO,具有较好的抗前列腺癌应用前景.     

新生隐球菌墨汁染色检查实验的改进

目的 为消除生物安全隐患,让学生能安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验.方法 分别用10%甲醛或56℃水浴5 min对腹腔液、脑脊液中的新生隐球菌进行灭活处理,使其不再具有活性和致病性,镜下观察其形态的改变.结果 用10%甲醛处理过的新生隐球菌,其荚膜形态已不能观察,而经56℃水浴灭活的新生隐球菌,其荚膜形态没有发生变化.结论 新生隐球菌腹腔液或脑脊液采用56℃水浴5 min即可灭活而不影响其荚膜形态,为学生安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验提供了条件.     

药物牙膏对牙龈炎的治疗作用

目的 探讨几种药物牙膏对患者牙龈炎的治疗作用.方法 140名有牙龈炎的学生随机分成四组,分别使用牙膏A、B、C和高露洁,检查受试者使用牙膏前和治疗后2~4周内4颗指数牙6个指标(QH菌斑指数、出血指数、探诊深度、附着水平、牙松动度和阿米巴感染度)的变化.结果 四种牙膏均可使QH菌斑指数、出血指数和阿米巴感染度下降(P＜...