熊果酸诱导人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡机制的研究

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法:MTT法测定UA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用;Wright-Giemasa染色和Hoechst33258荧光染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR检测细胞凋亡相关基因p53和Fas的表达。结果:UA对SMMC-7721细胞生长有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为45.72μmol/L。Wright-Giemasa染色、Hoechst荧光染色证实了UA可以通过凋亡途径诱导SMMC-7721细胞发生死亡。流式细胞仪结果进一步证实了UA可以诱导SMMC-7721细胞凋亡,而且凋亡率增加呈一定的量效和时效关系。RT-PCR结果显示UA能够上调p53和Fas基因的表达。结论:UA在体外对SMMC-7721细胞具有抗增殖和诱导凋亡的作用。其机制可能与p53和Fas基因的变化有关。     

异丙酚对培养心肌细胞缺氧乏糖损伤的影响

目的　观察异丙酚对缺氧乏糖心肌细胞血清乳酸脱氢酶 (L DH)和血清肌酸激酶 (CK)漏出量的影响 ,以探讨异丙酚对缺血心肌细胞的作用。方法　取出生 2 4 h以内的 Wistar红皮乳鼠体外培养心肌细胞分成 5组 (n=5 ) :正常对照组、缺氧乏糖组、缺氧乏糖 异丙酚 4 0μmol/ L组、缺氧乏糖 异丙酚 80μmol/ L组、缺氧乏糖 异丙酚1 6 0 μmol/ L组 ,给予缺氧乏糖 6 h干预 ,观察 L DH和 CK的漏出量。结果　异丙酚 4 0 μmol/ L 对 L DH和 CK无明显影响 ,异丙酚 80μmol/ L、1 6 0μmol/ L明显降低 L DH和 CK的漏出量。结论　异丙酚在一定浓度下可降低缺氧乏糖心肌细胞 L DH和 CK的漏出量 ,对缺血心肌细胞有一定的保护作用     

鲨鱼软骨提取物抑瘤作用及其机制研究

目的研究鲨鱼软骨提取物的抗肿瘤作用及其机制.方法采用MTT法及流式细胞仪技术测定鲨鱼软骨粉提取物对血管内皮细胞增殖及产生白细胞介素-6(1L-6)的影响,常规方法测定其对荷S-180A小鼠的抑瘤作用.结果鲨鱼软骨提取物浓度为200～400μg·ml-1时显著抑制内皮细胞的增殖(p<0.05),细胞周期检测发现其主要抑制细胞进入S期;(2)鲨鱼软骨提取物(200～400μg·     

自噬在白藜芦醇调节胶质瘤干细胞辐射敏感性中的作用

目的研究白藜芦醇联合x射线对胶质瘤干细胞辐射抗性的影响。方法采用甲基四唑蓝（MTT）法检测白藜芦醇和X射线对胶质瘤干细胞增殖的抑制作用;光镜下观察胶质瘤干细胞的形态变化;采用Hoechst荧光染色观察凋亡小体;采用单丹磺酞尸胺（MDC）染色和Westernblot分析自噬在x射线诱导胶质瘤干细胞死亡中的作用。结果MTT检测结果显示,与阴性对照组和单独X射线处理组相比,白藜芦醇联合X射线可明显抑制胶质瘤干细胞生长（均P〈0．05）;在加入自噬抑制剂3-MA后,胶质瘤干细胞抑制率下降（P〈0．05）。显微镜下观察联合处理组的细胞形态,细胞不再成球形生长;Hoeehst33258荧光染色结果显示,联合处理组细胞出现凋亡形态;MDC染色结果显示,联合处理组细胞出现大量自噬泡;Westernblot分析结果显示,联合处理组细胞的Bel一2表达减少（P〈0．01）,LC3Ⅱ／LC3I的比值增大（P〈0．01）。结论白藜芦醇可提高胶质瘤干细胞的辐射敏感性,白藜芦醇联合X射线处理可诱导胶质瘤干细胞发生凋亡和自噬;自噬对于提高胶质瘤干细胞的辐射敏感性起到重要作用。     

云芝糖肽对人外周血淋巴细胞增殖和T细胞亚群变化的调节作用

用流式细胞仪技术和ＭＴＴ法观察了云芝糖肽对由植物血凝素诱导的人外周血淋巴细胞增殖和Ｔ细胞亚群变化的调节作用。结果表明,５０－１００μｇ／ｍＬＰＳＰ对经ＰＨＡ诱导的人ＰＢＬ增殖有显著的促进作用,该浓度的ＰＳＰ也能促进细胞从Ｇ１期进入Ｓ期,并可使ＣＯ＾４＋细胞明显升高,使ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋细胞比例增加,提示ＰＳＰ具有免疫促进作用。     

女贞子提取物对小鼠抗肿瘤作用

目的和方法:采用小鼠移植性肿瘤模型,观察女贞子提取物(Extract of Nu Zhen zi,ENZz)对H_(22)肝癌、S_(180)肉瘤荷瘤小鼠的抑瘤作用,对S_(180)荷瘤小鼠的生命有延长作用。结果和结论:ENZZ对移植性肿瘤H_(22)有抑制,剂量250mg/kg,500mg/kg,1000mg/kg组,平均抑瘤率分别为41.49％,48.32％,45.45％;对S_(180)肉瘤小鼠有抑制作用,上述三个剂量的抑瘤率分别为37.50％,44.23％,46.15;ENZZ对S_(180)肉瘤腹水型小鼠生命 无延长作用。     

阿司匹林体外抑制U251细胞增殖及其机制研究

目的研究阿司匹林体外抑制U251胶质瘤细胞的作用及其机制。方法采用MTT法观察药物对人胶质瘤细胞U251的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测U251细胞周期的变化;FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测U251细胞的凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达和Caspase-3的激活。结果阿司匹林可明显抑制人胶质瘤细胞U251的增殖,细胞阻滞在G2/M期;诱导细胞发生凋亡,下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达以及诱导Caspase-3的激活。结论阿司匹林在体外对胶质瘤细胞U251有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡。     

姜黄素抗内皮细胞缺血/再灌注损伤的机制研究

目的探讨姜黄素(curcumin,Cur)抗人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺血/再灌注(I/R)损伤的作用机制。方法建立缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤模型,MTT法检测不同的缺氧和复氧时间对内皮细胞的损伤作用及Cur对HUVEC的保护作用;预先给予Cur(5μmol.L-1),用免疫荧光和Western blot法检测H/R对HUVEC微管相关蛋白LC3、溶酶体酶cathepsin B、L及促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2表达的影响。结果Cur(1.25~5μmol.L-1)可剂量依赖性的保护H/R的HUVEC;H/R能增加LC3、cathepsinB、Bax/Bcl-2的表达,并且使cathepsin L发生核转位;而用Cur预处理后,在进一步增强LC3表达的同时,明显抑制ca-thepsin B和Bax/Bcl-2的表达及cathepsin L的核转位现象。结论Cur能有效提高HUVEC在缺血/再灌注损伤中的存活率,并通过诱导其自噬活性、抑制cathepsins以及Bax/Bcl-2的表达保护内皮细胞。