急性白血病细胞的遗传学改变及其临床意义

目的 探讨小儿急性白血病（ＡＬ）细胞的遗传学改变及其临床意义。方法 采用细胞遗传学技术对８７例小儿ＡＬ进行染色体检查和临床治疗观察。结果 ８７例ＡＬ细胞核型异常检出率为６２％（５４／８７）,结果异常与白血病类型有特殊的对应关系,核型正常组缓解率高于核型异常组（Ｐ〈０．０５）,核型正常,超二倍体及ｔ（１５;１７）易位者疗效较好,而伴ｔ（９;２２）、ｔ（４;１１）及ｔ（８;２１）易位者疗效较差;缓解期     

骨髓活检对小儿急性白血病疗效判定的临床意义

研究骨髓活检在小儿急性白血病治疗观察的临床应用。采用骨髓活检改良制片法对５０例急性白血病患锋诱导治疗２疗程后第六天施行骨髓涂片和活检,分别作定量观测,并进行对比分析。骨髓活检异常原始细胞计量与骨髓涂片原幼细胞百分率相关,但有不同。继续治疗观察,ＭＡＢＡ少量１３例全部缓解,中量组缓解２１／２３,多量组缓解１１／１４且有５例半年内复发,三且差别显著Ｐ〈０．０５）。提示骨髓活检ＭＡＢＡ检测,对小儿急性白     

cAMP反应元件结合蛋白在造血和白血病中的作用

cAMP反应元件结合蛋白(CREB)是一种核内的转录因子,在细胞外多种因子的作用下被激活后调节着多种靶基因的转录,能促进多种细胞的存活和增殖。CREB能促进造血细胞的正常增殖和分化,包括髓系、巨核系、淋巴细胞系细胞的增殖和分化,在白血病细胞的存活和增殖中亦具有重要作用。CREB在白血病细胞中呈过表达,能促进细胞进入S期,其高表达还与高危险度有关,对白血病的发生和预后判断具有一定的意义。     

儿童急性髓细胞性白血病细胞遗传学和分子遗传学的初步研究

目的 了解儿童急性髓细胞性白血病(AML)染色体及相关融合基因的变化.方法 155例AML患儿采用直接法及24 h培养法制备染色体,套式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测t(8;21)易位的AML1-ETO融合基因,t(15;17)易位的PML-RARα融合基因.LSI-FISH检测MLL融合基因.结果 155例AML中,异常核型101例(65.2%),各亚型的异常率为:M577.3%,M365.9%,M263.9%,M462.5%,M660.0%,M142.9%.最常见的数目异常为假二倍体59例(58.4%),最常见的结构异常为t(8;21)31例(32.7%),t(15;17)27例(26.7%),11号染色体异常10例(9.9%),并与M2、M3、M5相关.RT-PCR检测M2、M3相关的融合基因AML1-ETO及PML-RARα均发现了隐匿易位及变异异位,FISH检测11例AML患儿中的MLL基因3例阳性.结论 儿童AML进行染色体分析及融合基因的检测,有助于AML诊断及亚型之间的鉴别诊断.     

多重RT-PCR检测儿童急性淋巴细胞白血病融合基因的临床意义

目的 探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）染色体畸变所形成的融合基因与MICM分型及临床诊断、治疗、预后的关系。方法 采用多重巢式RT-PCR方法联合染色体核型、免疫表型、临床患儿资料对53例儿童ALL进行研究。结果 53例儿童ALL中18例（33．96％）具有11种克隆性基因重排,包括SIL／TAL1D、E2A／PBX1、TEL／AML1、MLLex7／AF9、MLLex8／AF9、MLLex8／AF10、MLLex8／AFX、MLLexg／AF6、MLLex9／ELL、MLLex7／AF4及TLS／ERG。9例患儿有HOX11原癌基因活化。TEL／AML1表达者预后良好;B-ALL合并HOX11活化近期疗效好;T-ALL合并HOX11预后不良;有MLL基因重排的预后极差。结论 采用多重RT-PCR方法可快速同时检儿童急性白血病29染色体畸变所形成的融合基因,完善白血病的MICM分型及指导临床个体化治疗。     

选择性去除表达CD25+、CD69+的同种异体反应T细胞的实验研究

目的 探讨体外选择性去除表达CD25+、CD69+的同种异体反应T细胞协调移植物抗宿主病和移植物抗肿瘤的可能性.方法 流式细胞仪检测初次单向混合淋巴细胞反应CD25+、CD69+表达情况,磁性细胞分离系统在细胞表达高峰去除CD25+、CD69+同种异体反应T细胞.MTT法在各时间点检测不同抗原组再次混合淋巴细胞反应的细胞增殖情况.结果 再次单向混合淋巴细胞反应显示明显降低了对相同刺激原的反应性(48.82±13.71)%,保留大部分对无关刺激原的反应性(65.47±9.84)%和肿瘤刺激原的反应性(64.83±3.65)%.结论 体外选择性去除表达CD25+、CD69+的同种异体反应T细胞可以协调移植物抗宿主病和移植物抗肿瘤.     

多参数流式细胞术动态监测儿童B系急性淋巴细胞白血病微量残留病的临床意义

摘要本研究旨在探讨儿童B系急性淋巴细胞白血病（B-ALL）化疗过程中监测不同时间点微量残留病（MRD）水平的临床意义。回顾性分析我院2008年8月至2011年9月以流式细胞术监测3个时间点（即诱导化疗第15天、第33天和治疗第12周）的206例B-ALL患儿骨髓的MRD。结果表明：①206例B-ALL患儿中196例诱导化疗后迭完全缓解（CR）（CR率95．1％）,其1年与3年无事件生存（EFS）率分别为（92．7±1．8）％和（78．7±3．7）％,其中标危、中危、高危组的3年EFS率分别为（85．6±4．9）％、（82．1±5．8）％和（58．1±9．2）％,3组比较有明显统计学差异（P〈0．001）;②各时间点上MRD分析显示：MRD水平越高,患儿的3年EFS率越低,其中第15天MRD≥10^-2组、第33天和第12周MRD≥10^-3组的患儿预后明显不佳;多因素分析显示,第12周MRD≥10^-3为独立的不良预后因素;第12周MRD〈10^-3的3年EFS率为（86．3±4．1）％,MRD≥10^-3的3年EFS率为（55．8±9．1）％,差异有统计学意义（P〈0．05）;③在化疗第33天MRD阴性（MRD〈10^-4）的98例患儿中有8例复发（复发率为8．2％）,在这98例惠儿中有39例在第12周时转为阳性（MRD≥10^-4）,其中5例复发;在第12周时MRD仍为阴性的59例中有3例复发;在第33天MRD阳性的108例患儿中有19例复发（复发率为17．6％）,复发率在MRD阳性和阴性两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：B-ALL患儿治疗过程中以流式细胞术动态监测MRD可有效地评估治疗反应、判断预后、预测复发及指导化疗方案的调整,其中第15天、第33天及第12周的MRD分别以10^-2、10^-3、10^-3为区分危险度最佳界值,第12周MRD≥10^-3为独立的不良预后因素。     

巯基嘌呤甲基转移酶基因突变与儿童急性淋巴细胞白血病治疗不良反应的关系

目的 探讨巯基嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性和其遗传多态性在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)个体化治疗中的临床意义.方法 运用高效液相色谱法(HPLC)对100例初诊ALL患儿、180名健康儿童进行TPMT活性检测.采用在线Primer3软件设计引物,对30例具有临床事件的患儿进行TPMT基因DNA测序.分析TPMT活性、遗传多态性与临床不良反应的相关性.TPMT活性以在单位时间(1 h)内单位质量的血红蛋白(Hb,g)催化生成的2-氨基-6-甲基巯基嘌呤(6-MTG)的量(nmol)表示.结果 100例初诊ALL患儿TPMT活性为(31.72±10.31)nmol·g-1Hb·h-1,180名健康儿童TPMT活性为(30.70±9.67)nmol·g-1Hb· h-1,两者TPMT活性差异无统计学意义(P=0.450).19例发生严重骨髓抑制的患儿TPMT活性为(20.96±7.24) nmol·g-1Hb·h-1,6例ALL复发者初诊时TPMT活性为(40.46±8.18) nmol·g-1 Hb·h-1,两者分别与30例具有临床事件的ALL患儿初诊时活性[(24.07±11.43)nmol·g-1Hb·h-1]相比差异具有统计学意义(P值均＜0.05).5例化疗后发生严重肝脏毒性者初诊时TPMT活性为(23.60±7.48) nmol·g-1Hb·h-1,与30例ALL患儿初诊时活性相比差异无统计学意义(P =0.930).对30例具有临床事件的ALL患儿TPMT基因DNA测序,3例发生TPMT*3C杂合突变,其活性为(11.99± 1.32)nmol·g-1Hb·h-1,27例呈野生纯合型,其活性为(24.95±11.32)nmol·g-1Hb·h-1,杂合子突变患儿TPMT活性明显低于野生纯合子型患儿,差异有统计学意义(P＜ 0.05).启动子-100附近区域发现5种数目变异的串联重复(VNTR)基因型(*V3/* V3、*V3/* V4、*V4/* V4、*V5/* V5、*V4/* V6),其平均活性分别为19.35、25.06、22.61、32.16、11.85 nmol·g-1Hb·h-1,各组间活性差异无统计学意义(P =0.186).结论 TPMT基因多态性与其活性有一定的相关性,TPMT活性高低对于儿童ALL预后的判断和指导个体化用药有重要的临床意义.     

儿童非霍杰金淋巴瘤37例临床分析

目的：分析儿童非霍杰金淋巴瘤临床特点。方法：对37例儿童非霍杰金淋巴瘤的临床、细胞形态学及其对治疗、预后进行分析。结果：病理类型中,淋巴母细胞型最多见（71．9％）。按免疫组化分类T淋巴母细胞瘤居多。NHL易发生骨髓浸润和中枢神经系统侵犯。治疗方法上多采用联合化疗,部分病人化疗结合放疗或手术。结论：儿童恶性淋巴瘤早期临床表现具多样性且不典型,容易误诊,必须予以足够重视。肿瘤组织的病理分型诊断非常重要,确诊病例须根据不同分型分级进行序贯治疗。     

CYP3A基因与肿瘤易感性及其治疗研究进展

细胞色素P4503A家族（CYP3A）是体内重要的Ⅰ相代谢酶,参与多种内源性底物和外源性物质的生物转化,同时在药物代谢中起着重要作用。近年来随着分子生物学等研究手段的成熟和深入,一些研究成果显示CYP3A基因与多种肿瘤的易感性相关。CYP3A基因多态性导致不同个体间CYP3A活性的差别,从而对肿瘤的治疗及预后产生影响。