海藻玉壶汤中海藻与甘草不同比例配伍对甲状腺肿大模型大鼠药效及其机制探讨

目的通过观察海藻与甘草不同比例配伍的海藻玉壶汤对丙硫氧嘧啶造成的甲状腺肿大大鼠模型生物效应的影响,筛选出海藻与甘草配比起效的适宜条件,并对其作用机制进行初步探讨。方法将海藻与甘草按照2因素7水平的均匀设计实验原则设置不同配伍比例的海藻玉壶汤,Wistar大鼠120只,随机分为10组,采用ig丙硫氧嘧啶14 d复制动物模型,造模后各组ig给药28 d,实验结束后测定大鼠甲状腺质量,测定血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)等甲状腺激素水平,RT-PCR法测定大鼠甲状腺中甲状腺过氧化物酶(TPO)和甲状腺球蛋白(Tg)的m RNA表达。结果海藻玉壶汤中海藻与甘草不同配比在不同程度上均有调节甲状腺激素水平、改善丙硫氧嘧啶所致的甲状腺肿大作用。与模型组比较,配比5组(0.135∶8.32)较模型组TPO m RNA的表达显著升高。海藻玉壶汤配比1组(14.522∶6.24)、5组、6组(29.040∶4.16)的Tg m RNA水平较对照组显著升高。结论海藻玉壶汤中海藻与甘草不同配比在不同程度上均能抑制丙硫氧嘧啶所导致的甲状腺肿大,以配比1组、3组(19.363∶0.54)、6组表现最为明显,其作用机制可能涉及刺激TPO与Tg基因转录的增强。配比1组与配比5组具有促进这种代偿增强的作用,在某种程度上对甲状腺激素水平的恢复起到积极的作用。     

辅助性保护化学性肝损伤保健食品配方的特点分析

检索国家食品药品监督管理总局网站公布的对化学性肝损伤有辅助保护功能保健食品信息资料,运用Microsoft Excel 2016软件及中医传承辅助平台统计分析其配方特点,为对化学性肝损伤有辅助保护功能保健食品的组方以及产品的开发提供依据。共收集到325种对化学性肝损伤有辅助保护功能的保健食品,其中282种(86.8%)保健食品配方中含有中药类原料;具有单一保健功能的保健食品及2种功能的保健食品个数分别是192、133。剂型方面,胶囊剂(156)约占总数的一半。使用频次(f)≥18的中药原料有21味,累计使用768次(73%)。通过无监督的熵层次聚类得到9个新处方。中药原料在对化学性肝损伤有辅助保护功能的保健食品中应用较为普遍,剂型的选择以服用方便、便于携带为主。最常用的5种功效成分分别是总黄酮、粗多糖、葛根素、总皂苷、牛磺酸。保健食品在中药原料的选择上与中医药理论治疗化学性肝病的原则基本相符,即解毒、扶正、活血祛瘀、清热、除湿等。应用较多的是解酒药、补益药、活血化瘀药、清热药、利水渗湿药。通过软件挖掘的9个新处方还必须结合中医药理论与实践综合分析等进一步研判。     

醇提和水提葛花枳椇子及其配伍对酒精性肝损伤大鼠肝脏抗氧化功能的影响

目的:观察葛花、枳椇子不同比例配伍对酒精性肝损伤大鼠肝脏抗氧化功能的影响,同时探讨葛花枳椇子及其配伍组采用不同的提取方法即水提和醇提是否会对药物的疗效产生影响,哪一种提取方法效果更好。方法:采用白酒灌胃的方法复制酒精性肝损伤的模型,将Wistar大鼠,按体质量随机分为空白组,模型组,东宝肝泰对照组,葛花组,枳椇子组,葛花枳椇子配伍1:1,1:2和2:1组。连续灌胃8周,于8周末取材,麻醉后腹主动脉取血,摘取肝脏,制备肝匀浆,检测肝中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽(GSH)的含量。结果:造模成功,各个给药组对于肝脏的抗氧化功能均有一定的改善作用,同时可以看出水提的效果整体上优于醇提。结论:葛花与枳椇子不同比例配伍对酒精性肝损伤大鼠肝脏具有一定的保护作用,传统水提的效果优于醇提。     

不同品种甘草化学成分、药理作用的研究进展及质量标志物（Q-Marker）预测分析

甘草为多年生草本植物,为我国传统常用中药材。《中国药典》2020年版中收载甘草为乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis、光果甘草G.glabra、胀果甘草G.inflata 3个品种。不同品种甘草在某些化学成分上不仅存在含量上的差异,也存在种属特异性,药理活性也不尽相同。对不同品种甘草化学成分、药理作用的研究进展进行综述,并对其质量标志物（quality marker,Q-Marker）进行预测分析,建议将黄酮类化合物甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素和三萜类化合物甘草酸、甘草次酸作为3种甘草的Q-Marker。另外考虑到不同品种之间成分的特有性和各自的优势生物活性,建议可以将光甘草定作为光果甘草的Q-Marker,将查耳酮A作为胀果甘草的Q-Marker,以期为明确不同品种甘草Q-Marker及不同品种甘草药材质量标准建立及合理开发利用提供理论依据。     

海藻-甘草反药组合在海藻玉壶汤抗丙硫氧嘧啶致甲状腺肿大中的作用研究

目的:探讨海藻-甘草剂量为《中华人民共和国药典》 2015年版规定高限剂量2倍的条件下,海藻-甘草反药组合在海藻玉壶汤抗丙硫氧嘧啶(PTU)致大鼠甲状腺肿大中的作用。方法:Wistar雄性大鼠84只,按体质量随机分为对照组、模型组、阳性药组(优甲乐)、海藻玉壶汤全方组(简称"全方组")、海藻玉壶汤去海藻组(简称"去海藻组")、海藻玉壶汤去甘草组(简称"去甘草组")、海藻玉壶汤去海藻及甘草组(简称"去藻草组"),每组12只。造模期间,除对照组外,其余各组大鼠灌胃给予PTU (10 mg·kg~(–1)),每日1次,共14 d。模型制备成功后,对照组与模型组大鼠灌胃给予去离子水,阳性药组大鼠给予优甲乐(20μg·kg~(–1)),其余各给药组给予相应中药煎液(给药剂量为全方组12.06 g·kg~(–1)、去海藻组9.9 g·kg~(–1)、去甘草组10.26 g·kg~(–1)、去藻草组8.1 g·kg~(–1)),每日给药1次,持续28 d。治疗期间,每隔1 d,除对照组外,其余各组大鼠均灌胃给予PTU以维持模型稳定,剂量依前。给药结束后计算各组大鼠的甲状腺系数;光镜下观察甲状腺组织形态;放射免疫法检测血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平。结果:与对照组比较,各组大鼠甲状腺系数显著升高(P0.01);与模型组比较,各中药煎液给药组大鼠甲状腺系数显著降低(P0.01)。光镜下观察大鼠甲状腺组织形态,结果显示,与对照组比较,模型组与阳性药组变化最为显著,甲状腺组织小叶排列紊乱,结构不清,细胞核数目增多(P0.05),上皮细胞增生肥大,细胞直径增加(P0.05),滤泡腔大小不一,形状各异,面积显著减小(P0.05),其余各给药组大鼠甲状腺组织的病变均有一定减轻,其中全方组大鼠甲状腺组织形态与对照组最为接近。与对照组比较,模型组大鼠血清中T3、T4水平显著降低(P0.05),TSH水平显著升高(P0.05)。与模型组比较,阳性药组、全方组大鼠血清T3、T4水平显著升高(P0.05),TSH水平有降低趋势,但差异无统计学意义。结论:海藻玉壶汤全方及去掉1味或2味反药组合能回调甲状腺肿大大鼠甲状腺系数,改善甲状腺组织病理形态及恢复血清中激素水平,且全方组优于全方去掉1味或2味反药组,由此说明,海藻-甘草反药组合是海藻玉壶汤中关键的药对,对于甲状腺肿大的治疗缺一不可。     

不同品种甘草与海藻配伍不同剂量的海藻玉壶汤对甲状腺肿大大鼠肝肾功能影响研究

目的 探究海藻玉壶汤中甘草不同品种与海藻配伍不同剂量条件下对甲状腺肿大大鼠肝肾功能的影响,为研究十八反配伍禁忌实质奠定科学依据。方法 180只Wistar雄性大鼠,随机分为12组,每组15只,分别为空白组,模型组,阳性药组（优甲乐组）,海藻玉壶汤胀果甘草高、中、低剂量组（胀高组、胀中组、胀低组）,海藻玉壶汤乌拉尔甘草高、中、低剂量组（乌高组、乌中组、乌低组）,海藻玉壶汤光果甘草高、中、低剂量组（光高组、光中组、光低组）。采用丙硫氧嘧啶灌胃复制大鼠甲状腺肿大模型,优甲乐为阳性对照,检测大鼠肝、肾功能血清相关指标及组织切片病理学改变。结果 与空白组比较,模型组大鼠血清TP、ALB、GLB、A/G、ALT、AST、ALP、UREA、Cr水平均无显著性差异（P>0.05）;光镜下大鼠肝脏组织结构正常,肾脏组织可见微小病变。与空白组比较,乌高组、乌中组大鼠血清TP水平显著升高（P<0.05）,胀低组血清ALP水平显著升高（P<0.05）,光镜下各中药组大鼠肝脏组织结构正常。与空白组比较,胀低组、乌高组、乌中组、光中组、光低组大鼠血清UREA、Cr水平显著升高（P<0.05...     

海藻玉壶汤加减海藻甘草反药组合对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺功能及mTOR蛋白表达的影响

目的通过研究海藻甘草反药组合在海藻玉壶汤中的加减应用对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺功能及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响,为海藻甘草反药组合配伍应用提供实验依据。方法选取雄性Wistar大鼠84只,随机分为空白组、模型组、优甲乐组(20.00μg/kg)、海藻玉壶汤组(10.08g/kg)、海藻玉壶汤减海藻组(9.00g/kg)、海藻玉壶汤减甘草组(9.18g/kg)和海藻玉壶汤减海藻甘草组(8.10g/kg),除空白组其余各组给予丙硫氧嘧啶复制甲状腺肿大病理模型,以优甲乐作为阳性对照药,其余各组给予相应药液。采用放射免疫法检测各组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平,免疫组化法检测甲状腺组织Ki67蛋白表达情况,Western blotting检测甲状腺组织磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、mTOR蛋白表达情况。结果与模型组比较,优甲乐组大鼠血清T3、T4、FT3、FT4水平升高,TSH水平降低(P<0.01);海藻玉壶汤组及各拆方组大鼠血清T3、T4、FT3、...     

海藻玉壶汤中海藻不同品种与甘草加减应用对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的探讨含高剂量反药组合的海藻玉壶汤中海藻不同品种与甘草加减应用对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响。方法选取Wistar大鼠144只,雌雄各半,随机分为空白组、模型组、阳性药优甲乐组(优甲乐组)、含羊栖菜的海藻玉壶汤全方组(羊栖菜全方组)、含海蒿子的海藻玉壶汤全方组(海蒿子全方组)、含羊栖菜的海藻玉壶汤去甘草组(羊栖菜去甘草组)、含海蒿子的海藻玉壶汤去甘草组(海蒿子去甘草组)、海灌玉壶汤去海藻组(全方去海藻组)、海藻玉壶汤去海藻甘草组(全方去海藻甘草组),共计9组。造模期间,除空白组外,其余各组大鼠灌服丙基硫氧嘧啶(PTU)10 mg/kg,每日1次,共给造模药14 d。造模后给予治疗药物,周期为28 d,其中,空白组与模型组给予等量蒸馏水灌胃,阳性药组灌服优甲乐,给药剂量为20μg/kg,每日1次,其余各给药组给予相应药液灌胃,大鼠每日给药1次,给药剂量为海蒿子/羊栖菜去甘草组12.6 g/kg,全方去海藻组13.5 g/kg,海蒿子/羊栖菜全方组18.0 g/kg,全方去海藻甘草组8.1 g/kg。在给药期间,为了稳定模型,除空白组外,每隔1 d,其余各组灌服PTU,剂量同前。给药结束后计算各组大鼠甲状腺系数,观察甲状腺组织病理形态,用RT-PCR法检测甲状腺组织中Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果与空白组比较,各组大鼠甲状腺系数明显升高(P<0.01);与模型组比较除优甲乐组外其余各给药组甲状腺系数明显降低(P<0.01)。甲状腺组织病理形态观察显示模型组与优甲乐组较空白组变化明显,甲状腺组织小叶排列紊乱,滤泡大小不一,滤泡上皮细胞弥漫性增生和肥大,其余各给药组有纠正作用,其中全方(海蒿子/羊栖菜)组组织病理形态最接近空白组。与空白组比较,模型组Bax mRNA表达降低(P<0.05);与模型组比较海藻玉壶汤全方及加减应用各组Bax mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。各组Bcl-2 mRNA表达无差异。与空白组比较,模型组Bax/Bcl-2降低(P<0.05),与模型组比较,海藻玉壶汤全方及加减应用各组数值均升高(P<0.05,P<0.01)。结论含高剂量反药组合的海藻玉壶汤中不同品种海藻与甘草加减应用,对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺系数及甲状腺组织形态有纠正作用;其作用机制可能与其升高Bax/Bcl-2从而促进甲状腺细胞凋亡相关。     

枳葛解酒保肝方对酒精性肝损伤大鼠SOD、MDA、GSH的影响

目的研究枳葛解酒保肝方对酒精性肝损伤大鼠肝脏的保护机制。方法选择雄性Wistar大鼠180只,随机分为空白组、模型组、阳性药组(0.36 g/kg)和枳葛解酒保肝方高、中、低剂量(18、9、1.8 g/kg)组。以浓度为50%的无水乙醇(以蒸馏水稀释)灌胃6周,建立大鼠酒精性肝损伤模型,以复方蛋氨酸胆碱片为阳性药,各给药组分别给予相应药物干预。检测血清及肝组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量,血清超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果模型组大鼠血液中SOD的活性明显低于空白组,肝组织和血液中MDA、GSH含量明显高于空白组(P0.01)。与模型组相比,枳葛解酒保肝方中剂量组能明显提高大鼠血清GSH含量(P0.05)、提高SOD活力(P0.01)和降低肝组织中MDA含量(P0.01);枳葛解酒保肝方高剂量组能明显降低大鼠肝组织MDA含量(P0.01)及提高GSH含量(P0.01);枳葛解酒保肝方低剂量组能降低大鼠血清MDA含量(P0.01)。结论枳葛解酒保肝方具有一定的增强SOD、GSH等内源性抗氧化酶的抗氧化能力,抑制自由基介导的脂质过氧化反应对肝脏损伤的作用。     

基于网络药理学的“葛花-枳椇子”药对治疗酒精性肝病作用机制研究＊

目的 采用网络药理学方法分析“葛花-枳椇子”药对治疗酒精性肝病的药物成分、作用靶点、主要通路及生物过程，探讨其药效物质基础和配伍机制。方法 依托中药系统药理学分析平台（TCMSP）、中医药整合药理学研究平台v2.0（TCMIP）及Drugbank数据库检索葛花、枳椇子相关的化学成分和作用靶点，在UniProt 蛋白数据库检索对应的人类蛋白基因，通过NCBI获取与酒精性肝病相关的疾病基因靶点信息，运用STRING平台构建PPI网络，并在Cytoscape中利用BINGO插件对靶点基因进行GO生物过程富集分析，利用DAVID生物学信息数据库对靶点进行KEGG信号通路分析，并绘制分子机制图。结果 本研究共获得21种化合物成分，这些成分靶点与酒精性肝病共有6个基因靶点、14条主要信号通路。参与的基因有ALDH2、IL6、TNF、HMOX1、HSPA5和MTTP；“葛花-枳椇子”药对治疗酒精性肝病主要参与Toll样受体信号（TLR）通路和NOD样受体信号（NLR）通路。结论 本研究初步验证了“葛花-枳椇子”药对治疗酒精性肝病的基本药理作用及相关机制，为进一步研究其作用机制奠定了基础。