质粒介导的血管抑制和免疫强化协同诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的 探讨真核表达质粒介导的血管抑制和免疫强化治疗诱导小鼠种植性肝癌肿瘤细胞凋亡的效果和机制.方法 制备、纯化小鼠内皮抑制素真核表达质粒(pSecES)和小鼠白细胞介素12(IL-12)质粒(pmlL-12).小鼠股部肌肉内接种H22细胞建立肝癌种植瘤模型,分成4组,接种部位分别多次注射pSecES、pmIL-12、pSecES+pmlL-12和pcDNA3.1质粒裸DNA,观察种植瘤的形成和重量;肿瘤组织切片CD31免疫组织化学染色检测肿瘤微血管密度,HE染色观察肿瘤浸润淋巴细胞,并用TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡.结果 与pcDNA3.1对照组相比,注射pSecES,pmIL-12组小鼠肝癌种植瘤生长缓慢,血管减少,后者并可见瘤内大量淋巴细胞浸润.两组肿瘤细胞凋亡增加,pSecES、pmIL-12和pcDNA3.1组凋亡细胞数分别为(11.3±4.1)、(14.6±3.2),(1.4±1.3)个/高倍视野,pSecES+pmIL-12组凋亡细胞数为(19.9±5.5)个/高倍视野,明显高于单一治疗组.结论 真核表达质粒介导的血管抑制和免疫强化治疗可通过抑制肿瘤血管形成,促进瘤内淋巴细胞浸润,协同诱导肿瘤细胞凋亡,较好的抑制了小鼠种植性肝癌的生长.     

APOBEC3G体外抗乙型肝炎病毒的研究

目的探讨载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G（apolipoprotein B mRNA editing enzyme catalytic polypeptide like3G,APOBEC3G）（也称为CEM15）体外抗乙型肝炎病毒（HBV）的作用及其机制。方法脂质体转染pcDNA3.1 Human APOBEC3G-Myc-6Xhis、pcDAN3.1/His-C进入HepG2.2.15细胞,转染后,RT-PCR证实转染基因的表达,Western Blot证实蛋白的表达。通过ELISA方法检测细胞上清液中乙型肝炎表面抗原（HBsAg）及乙型肝炎e抗原（HBeAg）,RT-PCR分析APOBEC3G对HBV mRNA转录的影响。结果APOBEC3G基因与蛋白在HepG2.2.15细胞都有表达,与空质粒转染组相比,pcDNA3.1 Human APOBEC3G-Myc-6Xhis转染组HBsAg含量下降70.38%,HBeAg含量下降62.88%,未转质粒细胞为空白对照组。结论APOBEC3G在体外可以抑制HBV复制,可以作为一种新型的抗病毒制剂治疗乙肝病毒感染。     

阿霉素－转铁蛋白受体单抗偶连物对人肝细胞癌导向治疗的实验研究

作者以ＤｅｘｔｒａｎＴ＿（１０）为偶连剂，将阿霉素与抗转铁蛋白受体单克隆抗体共价交连，组成偶连物，再将其用于荷人肝细胞癌裸鼠的治疗。每只裸鼠皮下接种１×１０￣７个ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌细胞，接种瘤细胞后第２、５、８天给药，逐日观察肿瘤大小，计算肿瘤几何平均直径（ＧＭＤ），并记录潜伏期。第３５日处死所有动物，剥取肿瘤称湿重，取脾脏测定淋巴细胞自然杀伤（ＮＫ）活性。结果表明，导向治疗组潜伏期（３３．０天）较单纯阿霉素组（２５．０天）明显延长，处死日导向治疗组ＧＭＤ（３．８０ｍｍ±１．９ｍｍ）还小于单纯阿霉素组（６．６９ｍｍ±２．３ｍｍ），其差异具有显著性意义（ｐ＜０．０５）。此外，导向治疗组ＮＫ活性（２８．２％±８．２％）亦显著高于单纯阿霉素组（１５．１％±３．６％）其差异具有显著性意义（Ｐ＜０．０５），此结果提示，阿霉素—转铁蛋白受体单抗偶连物可用于人肝癌的导向治疗。     

中医清法制剂“热毒清”抗内毒素的实验研究

热毒清 (抗炎6号) 体外能使鲎试验转阴,电镜下可见能使大肠杆菌O_(111)B_4内毒素网状结构崩解。体内实验用家兔内毒素所致DlC模型,检测血小板、纤维蛋白原、凝血酶原时间和3F试验;光镜检查肾小球微血栓形成率和肾小球所含纤维素密度等,用药组和模型组比较差异均非常显著(P<0.01)。结合电镜观察和肝细胞溶酶体标志酶ACF测定,提示热毒清抗内毒素的作用机理可能与①直接降解内毒素,②增强MPS吞噬功能,③稳定溶酶体膜有关。 ·     

X蛋白在乙型肝炎病毒生命周期中作用的研究

X基因是一种仅存在于嗜肝乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)的基因,至今未在其它逆转录病毒和生物细胞中发现它。由于它的基因结构的特殊性及高度的保守性,提示其在HBV的生物学上具有重要的生物学意义,越来越多的证据表明,它是引起肝癌的直接病因,还广泛参与宿主细胞的基因表达、反式激活和细胞信号转导过程。 一、基因在HBV感染宿主细胞过程中具有不可或缺的作用 Chen等以土拨鼠HBV(WHV)质粒感染上拨鼠为模型,将质粒的X基因起始密码子ATG突变为TTG,去除X基蛋白表达,即对X基因表达的C末端突变,形成终止密码,使X蛋白C末端分别截除52、31、16或3个氨基酸,与野生型感染质粒进行对照,结果发现,除在C末端截除3个氨基酸的突变质粒外,其它各种突变均不能有效感染土拨鼠。Zoulim等应用不同的感染性质粒,独立进行了相似的实验,他们将WHV的     

阿霉素与转铁蛋白受体单抗偶联方法探讨：以葡聚糖DextranT10 …

以７５％，５０％，３０％和２５％氧化程度的葡聚糖为偶联剂，制备阿霉素与转铁蛋白受体单抗的偶联物Ｃ７５，Ｃ５０，Ｃ３０和Ｃ２５，并对其各方面参数作了比较，结果表明，其偶联度分别为１６２，１０３，７２与５２Ｍｏｌｅｓ／每个抗体分子，即葡聚糖的氧化程度越高，其偶联度越高，然而，在１３１１－ＳｐＡ为二抗的细胞结构分析结果表明，Ｃ７５，Ｃ５０均丧失大部分的抗体活性，３Ｈ－ＴｄＲ掺入细胞制实验也表明，Ｃ７５与     

Inhibitory Effect of Recombinant Endostatin on Angiogenesis and Tumor Growth of Hepatoma

LivercancerisoneofthemostcommontumorsinChina ,themortalityofwhichranksthesecondplaceofallmalignanttumors[1] Thetreatmentoftencomestofailurebecauseofthehighresistancetochemotherapyorradiationandthesevereside effectsinduced Atpresenttheonlycurativeoptionsarepar tialhepatectomyortotalhepatectomywithlivertransplantation Butthechanceforsurgeryisverylimited Someothertreatmentssuchasintratumoralinjectionofethanoloraceticacid ,transarterialcatheterembolization ,andthermaldestructionormi crowavecoagu…     

乙型肝炎病毒家族聚集性感染者基因型分布及基础核心启动子和C区变异的研究

目的 探讨家族聚集性乙肝感染者HBV基因型和基础核心启动子（BCP）、前C/C区变异的特征,及其临床意义。方法 选择家族聚集性慢性乙型肝炎（CHB）98例（来自38个家族）作研究组和非家族聚集性CHB 110例作对照组;应用型特异性引物巢式PCR法检测HBV感染者的HBV基因型,PCR测定BCP、前C/C区核苷酸序列,并且检测患者血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）、乙型肝炎两对半和HBV-DNA载量等临床指标。结果 家族性乙肝母亲和（或）父亲与子女感染组以C基因型为主（52.9%）,家族水平成员感染组和对照组以B基因型为主（分别为73.3%、67.3%）,仅检测到少数B/C和B/D混合型（共8.7%）,并且乙肝家族中母亲和（或）父亲与子女感染组C基因型所占百分比高于家族水平成员感染组及非乙肝家族（P＜0.05）。家族内HBV聚集感染的基因型基本相同,不一致者为混合型。HBV C基因型的家族CHB患者比非乙肝家族具有更高的HBV-DNA载量,更高的BCP区A1762T/G1764A双突变率（P＜0.05）。结论 家族聚集性CHB患者HBV基因型可能与传播途径有关,C基因型更易发生垂直传播。家族聚集性HBV C基因型感染的患者更易发生BCP区A1762T/G1764A双突变,HBV C基因型感染并且BCP区A1762T/G1764A双突变可能是家族聚集感染者病情进展的危险因素。     

遗传印记基因PEG 10转基因小鼠的建立及其皮下移植瘤生长和转移的变化

目的 建立PEG10转基因小鼠模型,研究PEG10对小鼠皮下移植瘤的生长和转移的影响. 方法 PCR阳性转基因鼠经RT-PCR、Western blot鉴定后,皮下注射H22细胞,连续测量肿瘤体积.12 d后取肿瘤和肝脏组织进行HE染色,肝脏组织进行SP染色,检测PEG10蛋白的表达.计量资料采用独立样本的f检验.结果 阳性首建鼠的肝脏中枪测到目的 基因和蛋白的表达.转皋因小鼠皮卜瘤的体积(4.08、4.23 cm3)及质量(6.89、6.48 g)均显著高于野生昔小鼠(1.61 cm3及1.63 g,P<0.05),均向周围组织侵袭并出现肝转移,肝脏中检测到PEG10蛋白;野生型小鼠的肿瘤组织有包膜,未出现肝转移. 结论构建的PEG10转基因小鼠模型可促进皮卜移植瘤的生长、侵袭和转移.