痰瘀同治方含药血清对ox-LDL损伤的人脐静脉内皮细胞产生NO,caveolin-1和eNOS的影响研究

目的:观察痰瘀同治方含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:体外培养HUVECs,分别以痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清预处理细胞2 h,然后加入100 mg.L-1ox-LDL作用24 h。MTT法检测细胞活力;Griess法检测细胞上清中一氧化氮(NO)含量变化;Real-time RCR法检测小窝蛋白-1(Cav-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达;Western blott检测Cav-1和eNOS蛋白表达。结果:HUVECs经100 mg.L-1ox-LDL刺激后细胞活力显著降低(P<0.01);加入不同剂量痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清后,细胞活力显著升高,细胞上清中NO含量明显提高(P<0.05)。此外,痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清可下调Cav-1mRNA和蛋白表达和上调eNOS mRNA和蛋白表达,其中以辛伐他汀和痰瘀同治方高剂量含药血清作用尤为显著(P<0.01)。结论:痰瘀同治方能够通过提高NO含量,下调Cav-1表达和上调eNOS表达起到内皮细胞保护作用,可能是其抗AS分子机制之一。     

鱼腥草注射液新制剂抗炎解热作用及其机制研究

目的:探讨鱼腥草注射液新制剂(NYI)抗炎、解热作用及其机制,并与原制剂(OYI)的作用进行比较。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿和乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验模型来观察新制剂抗炎作用;采用酵母致大鼠发热、大肠杆菌内毒素(LPS)家兔发热模型,研究NYI的解热作用及其作用机制。结果:OYI和NYI的高、中剂量对二甲苯诱发小鼠耳肿胀和醋酸导致的小鼠腹腔毛细血管通透性亢进均有抑制作用,与模型对照组相比有显著性差异(P<0.05)。OYI和NYI的高、中剂量可降低干酵母导致大鼠体温升高(与模型对照组比较,P<0.05);OYI和NYI的高剂量可抑制LPS引起的家兔体温升高,并能够明显降低血清中TNF-α,IL-1β,IL-8,PGE2,与模型对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:NYI具有明显的抗炎、解热作用,与OYI比较,无显著性差异。鱼腥草注射液可以抑制血清中TNF-α,IL-1β,IL-8和PGE2的含量,可能是其抗炎解热作用的机制之一。     

EXPERIMENTAL WORK AND RESEARCH Effect of Xueguantong(血管通)On Plasma Endothelin and Calcitonin Genes-Related in Quail Atherosis Model

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬ　ＷＯＲＫ　ＡＮＤ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｘｕｅｇｕａｎｔｏｎｇ（血管通）Ｏｎ　Ｐｌａｓｍａ　Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ　ａｎｄ　Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ　Ｇｅｎｅｓ－Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　ｉｎ　Ｑｕａｉｌ　Ａ...     

睡眠剥夺诱导的大鼠血瘀证对血小板活化影响的研究

运用睡眠剥夺法诱导大鼠血瘀证模型,检测中医证候宏观指标体质量、舌象及血液流变学确定中医血瘀证候,运用酶联免疫法检测血小板α颗粒、致密颗粒释放及活化相关指标,为证候研究的血小板功能评价及相关药物影响提供实验基础。结果显示,模型组大鼠体质量较正常组明显降低(P0.01);舌象呈现紫暗的血瘀证特点,色彩分析舌面R,G,B较正常组明显降低(P0.01);血液流变学高切、中切、低切全血黏度均高于正常组(P0.01),血浆黏度未有明显变化;血小板α颗粒(GMP-140,β-TG,PF4)及致密颗粒(ADP,5-HT)释放明显(P0.01)。血浆TXB_2和6-keto-PGF1α都较正常组明显升高(P0.01),且两者比值也显著高于正常组(P0.01)。PAF模型组较正常组明显上升(P0.01)。结果表明睡眠剥夺诱导的大鼠血瘀证血小板功能存在明显改变,血小板活化增强,颗粒释放增多,并可能存在炎症及内皮细胞功能异常。     

n—3多烯脂肪酸对血小板聚集、血栓形成、6—keto—PGF1α／TXB2比值的影响

国产马面鱼屯鱼油的ｎ－３多烯脂肪酸（ｎ－３ＰＵＦＡｓ）于１～３ｇ／Ｌ浓度能抑制ＡＡ、ＡＤＰ诱导的兔血小板聚集性，ｉｇ０．１５ｇ／ｋｇ能抑制大鼠体外血栓形成，并增加大鼠血浆６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α含量，提高６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α／ＴＸＢ２比值。     

青香丸(浓缩丸)对家兔乳腺增生的影响及机理研究

目的：观察青香丸(浓缩丸)对家兔实验性乳腺增生的影响。方法：本实验给雌性未孕家兔注射苯甲酸雌二醇，复制乳腺增生病理模型，造模的同时灌胃给药，测定乳房直径和长度、乳腺体积和重量．血清性激素水平、SOD活性、MDA含量、脏器系数，镜下观察乳腺组织病理形态学变化。结果：青香丸(浓缩丸)明显减小家兔乳房直径、长度及乳腺体积，减轻乳腺重量，减少乳腺小叶数和腺泡数；此外，青香丸(浓缩丸)明显降低血清E2水平，明显增加SOD活性，抑翩胸腺系数减少。结论：青香丸(浓缩丸)具有调节性激素水平、增强清除自由基能力．减轻乳腺组织增生性病变等作用。     

HPLC-ECD法测定大鼠血浆中同型半胱氨酸的含量

目的:建立检测大鼠血浆中同型半胱氨酸(Hcy)含量的HPLC-ECD测定方法。方法:大鼠血浆中的Hcy经二硫苏糖醇还原,色谱系统采用ODS2反相柱,10%甲醇流动相分离,用电化学检测器测定其浓度。结果:Hcy浓度在0.1~100μmol.L-1范围内线性关系良好,相关系数为0.999 3(n=7);样品加样回收率为100.73%,RSD=2.628%;精密度RSD=2.3%,日内稳定性RSD=2.61%,日间稳定性RSD=5.62%。结论:HPLC-ECD法测定血浆中Hcy的含量,操作简便,灵敏度高,稳定性及重复性好,可用于大鼠血浆中Hcy含量的研究。     

Blocking effect of salvianolic acid a on calcium channels in isolated rat ventricular myocytes

Objective:To study the effect of salvianolic acid A（SAA） on L-type calcium current（l-CaL） in isolated ventricular myocytes of Sprague-Dawley rats.Methods:SAA powder was dissolved in normal Tyrode’s solution to reach the concentrations of 1,10,100,and 1000μmol/L.The traditional whole-cell patch-clamp recording technique was employed to evaluate the effects of SAA on 1-CaL in single ventricular myocytes which were prepared by Langendorff perfusion apparatus from Sprague-Dawley rats.Results:SAA（1,10,100, and 1000μmol/L） inhibited l-CaL peak value by 16.23%±1.3%（n=6,P<0.05）,22.9%±3.6%（n=6,P<0.05）, 53.4%±3.0%（n=8,P<0.01）,and 62.26%±2.9%（n=6,P<0.01）,respectively.SAA reversibly inhibited l-CaL in a dose-dependent manner and with a half-blocking concentration(IC₅₀) of 38.3μmol/L.SAA at 100μmol/L elevated theⅠ-Ⅴcurve obviously,and shifted the half-active voltage(V_0.5) from（-15.78±0.86） mV to（-11.24±0.77） mV（n=6,P<0.05） and the slope（K） from 5.33±0.74 to 4.35±0.74（n=6,P>0.05）.However,it did not alter the shapes ofⅠ-Ⅴcurve,steady-state inactivation curve,or recovery from inactivation curve.Conclusions: SAA inhibited l-CaL in a dose-dependent manner.It shifted the steady-state activation curve to a more positive voltage,which indicated that the drug affected the activated state of calcium channels,and suggested that the Ca²⁺ antagonistic effect of SAA be beneficial in the treatment of myocardial ischemia reperfusion injury.     

芪丹通脉片对大鼠血栓形成及血液粘度的影响

目的:研究中药复方制剂芪丹通脉片(Qidan Tongmai Tablet,QDTMT)对Wistar大鼠体外血栓形成、凝血时间及血液粘度的影响。方法:用QDTMT混悬液给予Wistar大鼠连续灌胃7天,采血测定血栓长度、湿重、干重和血浆凝血酶原时间(PT)、白陶土部分凝血酶原时间(KPTT)、凝血酶时间(TT)及血液粘度。结果:与对照组比较,QDTMTmax和QDTMTmid能明显缩短血栓长度(P<0.05~0.01)、减轻血栓湿重和干重(P<0.01),延长PT、KPTT、TT(P<0.05),降低全血中切、低切粘度(P<0.05)。结论:QDTMT具有抑制血栓形成,延长凝血时间,降低血液粘度的作用,其效应呈剂量依赖性。     

基于“劳则气耗”理论研究气虚证动物模型的建立方法

该研究根据"劳则气耗"理论,旨在通过比较"神劳"与"体劳"2种因素研究气虚证大鼠模型的建立方法与系统评价体系。分别以水环境睡眠剥夺的"神劳"与以负重力竭游泳的"体劳"为干预因素,按"拟临床研究"的原则建立气虚证动物模型,实验分为正常组、力竭游泳组、睡眠剥夺组与复合组(力竭游泳复合睡眠剥夺),力竭游泳采用负重5%进行,每日1次直至力竭;睡眠剥夺采用水环境多平台睡眠剥夺法,每日随机14~16 h,复合组则2种方法联合应用,实验周期为6周。采用开场实验观察运动总路程、平均速度、活动时间以及进入中央区域次数,游泳力竭法检测力竭游泳时间,超声心动图检测心功能(LVEF,CO,FS,LVDd),舌象采集分析舌面色彩饱和度,小动物无创脉搏血氧仪测定脉搏幅度,ELISA法检测血清中ATP,ADP含量,血凝仪检测凝血四项。结果显示,睡眠剥夺组自主活动、体质量、运动能力降低明显,神经功能损伤明显,心功能下降,舌面色彩呈现淡白,ATP含量显著降低,ADP显著升高,脉搏幅度显著降低。通过采用"四诊合参"系统评价体系比较"神劳"与"体劳"2种干预因素,以"神劳"为特征的睡眠剥夺方法更适于建立拟临床的气虚证动物模型。