血管通对鹌鹑动脉粥样硬化模型的血浆内皮素和降钙素基因相关肽的影响

本研究从分子水平研究血管通抗动脉粥样硬化的作用机制。实验用日本种雄性鹌鹑给予高脂饲料１２周，形成动脉粥样硬化后给予血管通３０天，取血用放射免疫法测定内皮素和降钙素基因相关肽，观察血管通过动脉粥样硬化模型血浆内皮素和降钙素基因相关肽以及总胆固西文降甘油三酯的影响。     

通脉颗粒在急性心肌缺血模型比格犬体内药动学研究

通脉颗粒(TM)是由丹参、川芎、葛根组方而成,临床上用于对缺血性心脑血管疾病的治疗。为研究TM的药效物质基础,对急性心肌缺血模型比格犬给予TM干预,分析了血清中吸收成分及其药动学特征。以盐酸酸化-乙酸乙酯萃取法提取血清样品,在LS-MS/MS的ESI-检测模式下,采用Merck RP-18e整体反相硅胶色谱柱分离,以乙腈-甲醇1∶1(0.07%FA)和水(0.01%FA)为流动相,在优化的梯度洗脱程序下实现了在8.5 min内对犬血清中8种葛根黄酮成分、5种丹参酚酸成分和2种葛根成分的同时定量分析。分析方法的验证结果表明该方法特异、准确、精密,符合生物分析要求。对急性心梗模型比格犬十二指肠注射TM后6 h内不同时间点血清样品的分析结果显示,给药后5 min药物成分即吸收入血,15种成分均能在血清中检出,分别于给药后0.18~3.83 h达峰。各成分的血药浓度差异很大,其中葛根素、丹参素体内暴露量远高于其他成分,其次为3'-甲氧基葛根素、芹糖基葛根素和3'-羟基葛根素。研究结果表明葛根异黄酮类和丹参素是TM在心肌缺血模型犬体内的主要活性成分。     

组分配伍对延胡索总生物碱中主要成分体外吸收的影响

目的:建立检测M199培养液中延胡索乙素和脱氢紫堇碱的HPLC分析方法,并探讨复方给药和延胡索提取物给药对这2种成分在体外吸收的影响差异。方法:采用大鼠肠囊外翻法探讨不同配伍对延胡索乙素和脱氢紫堇碱吸收量的影响规律,采用HPLC-UV方法测定药液浓度,并对实验结果进行统计分析。结果:色谱采用SB-C18反相柱,流动相为乙腈-50 mmol·L-1磷酸二氢纳梯度洗脱,运行27 min。延胡索乙素的线性范围0.29～46.4 mg·L-1;脱氢紫堇碱的线性范围0.09～22.7 mg·L-1,两种成分的提取回收率为95%～100%,方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。结论:本方法操作简单、专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于延胡索乙素(THP)和脱氢紫堇碱(DHC)的肠吸收的测定。肠吸收实验结果显示复方配伍对其THP的吸收没有影响,但可以显著提高DHC的吸收。     

塞络通胶囊对大鼠多发性脑梗死恢复期Glu和GABA合成以及NMDA受体亚型表达的影响

观察塞络通胶囊(塞络通)对大鼠多发性脑梗死恢复期脑组织中神经递质谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量以及NMDA受体亚型NR1、NR2A和NR2B表达的影响,阐述塞络通在脑缺血后恢复期对脑组织保护的作用机制。通过大鼠颈内动脉注射微球血管栓塞剂的方法建立多发性脑梗死大鼠模型,在脑梗死后10天采用不同剂量的塞络通(16.5及33.0 mg.kg 1)连续干预60天。采用透射电子显微镜观察脑组织超微病理结构改变,高效液相色谱法检测脑组织Glu和GABA含量,免疫组织化学方法分析脑组织NMDA受体NR1、NR2A和NR2B亚型表达的变化。结果表明,与假手术组相比,模型组恢复期脑组织不仅存在神经元、神经胶质细胞和突触超微结构异常改变,而且神经递质Glu和GABA合成显著减少,同时NMDA受体NR1、NR2A和NR2B亚型表达明显升高;塞络通能够改善脑组织超微结构,明显促进神经元Glu和GABA合成,同时下调NMDA受体NR1、NR2A和NR2B亚型表达。以上结果提示,塞络通在大鼠多发性脑梗死恢复期通过促进Glu和GABA神经递质合成以及抑制NMDA受体表达而产生一定程度的神经保护作用。     

痰瘀同治方含药血清对ox-LDL损伤的人脐静脉内皮细胞产生NO,caveolin-1和eNOS的影响研究

目的:观察痰瘀同治方含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:体外培养HUVECs,分别以痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清预处理细胞2 h,然后加入100 mg.L-1ox-LDL作用24 h。MTT法检测细胞活力;Griess法检测细胞上清中一氧化氮(NO)含量变化;Real-time RCR法检测小窝蛋白-1(Cav-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达;Western blott检测Cav-1和eNOS蛋白表达。结果:HUVECs经100 mg.L-1ox-LDL刺激后细胞活力显著降低(P<0.01);加入不同剂量痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清后,细胞活力显著升高,细胞上清中NO含量明显提高(P<0.05)。此外,痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清可下调Cav-1mRNA和蛋白表达和上调eNOS mRNA和蛋白表达,其中以辛伐他汀和痰瘀同治方高剂量含药血清作用尤为显著(P<0.01)。结论:痰瘀同治方能够通过提高NO含量,下调Cav-1表达和上调eNOS表达起到内皮细胞保护作用,可能是其抗AS分子机制之一。     

EXPERIMENTAL WORK AND RESEARCH Effect of Xueguantong(血管通)On Plasma Endothelin and Calcitonin Genes-Related in Quail Atherosis Model

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬ　ＷＯＲＫ　ＡＮＤ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｘｕｅｇｕａｎｔｏｎｇ（血管通）Ｏｎ　Ｐｌａｓｍａ　Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ　ａｎｄ　Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ　Ｇｅｎｅｓ－Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　ｉｎ　Ｑｕａｉｌ　Ａ...     

Blocking effect of salvianolic acid a on calcium channels in isolated rat ventricular myocytes

Objective:To study the effect of salvianolic acid A（SAA） on L-type calcium current（l-CaL） in isolated ventricular myocytes of Sprague-Dawley rats.Methods:SAA powder was dissolved in normal Tyrode’s solution to reach the concentrations of 1,10,100,and 1000μmol/L.The traditional whole-cell patch-clamp recording technique was employed to evaluate the effects of SAA on 1-CaL in single ventricular myocytes which were prepared by Langendorff perfusion apparatus from Sprague-Dawley rats.Results:SAA（1,10,100, and 1000μmol/L） inhibited l-CaL peak value by 16.23%±1.3%（n=6,P<0.05）,22.9%±3.6%（n=6,P<0.05）, 53.4%±3.0%（n=8,P<0.01）,and 62.26%±2.9%（n=6,P<0.01）,respectively.SAA reversibly inhibited l-CaL in a dose-dependent manner and with a half-blocking concentration(IC₅₀) of 38.3μmol/L.SAA at 100μmol/L elevated theⅠ-Ⅴcurve obviously,and shifted the half-active voltage(V_0.5) from（-15.78±0.86） mV to（-11.24±0.77） mV（n=6,P<0.05） and the slope（K） from 5.33±0.74 to 4.35±0.74（n=6,P>0.05）.However,it did not alter the shapes ofⅠ-Ⅴcurve,steady-state inactivation curve,or recovery from inactivation curve.Conclusions: SAA inhibited l-CaL in a dose-dependent manner.It shifted the steady-state activation curve to a more positive voltage,which indicated that the drug affected the activated state of calcium channels,and suggested that the Ca²⁺ antagonistic effect of SAA be beneficial in the treatment of myocardial ischemia reperfusion injury.     

急性腔隙性脑梗死肝阳上亢证相关生物学客观指标的临床分析

目的分析并总结急性腔隙性脑梗死肝阳上亢证患者的证候临床客观指标变化,为辨证论治提供客观依据。方法2010年5月—2012年7月于中国中医科学院西苑医院脑病科符合诊断标准的患者50例为急性腔隙性脑梗死肝阳上亢证组（GYSK组）,另选健康志愿者作为健康对照组40名。采用全自动血液分析和比色法检测血常规［包括WBC、RBC、Hb、中性粒细胞百分比（NEUT%）、淋巴细胞百分比（LY%）］、肝、肾功能［ALT、AST、总胆红素（TBIL）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、Cr、尿素氮（BUN）］;比色法检测血糖［包括空腹血糖（Glu）和糖化血红蛋白（HbA1c）］、血脂［包括总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）］、凝血功能［包括抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）活性、凝血酶原时间（PT）、活动度（PTA）和凝血酶原国际化标准比率（INR）、凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）, 纤维蛋白原浓度（FBG）及其反应时间］、肾素、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）及血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平;电化学发光法检测甲状腺功能［包括游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）与促甲状腺激素（TSH）］;ELISA法检测肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）-α;放免法检测 IL-1和IL-6。结果与健康对照组比较,GYSK组患者RBC、LY%、ALT、TP、ALB、HDL-C、AT-Ⅲ活性、PTA及FT4含量明显下降,而TBIL、BUN、Glu、HbA1c、TSH、hs-CRP、肾素、AngⅡ、TNF-α、IL-1及IL-6水平明显上升（P〈0.05或P〈0.01）。结论急性腔隙性脑梗死肝阳上亢证病理过程与甲状腺功能,肾素－血管紧张素－醛固酮系统,内、外源性凝血系统以及炎症反应     

多因素整合建立气滞血瘀证动物模型研究

目的:应用多因素复合刺激的方法建立气滞血瘀证动物模型。方法:选用SD大鼠,采用不可预知的慢性应激刺激(声、光、电刺激)方法以及半高脂高糖饮食刺激进行干预,复制气滞血瘀证动物模型。结果:通过病因病机变化以及血液流变学指标、血脂变化与血管活性分子改变等客观指标方面的分析,发现模型大鼠基本上符合血瘀证候的变化特点。结论:采用不可预知的慢性应激刺激(声、光、电刺激)以及半高脂高糖饮食刺激方法可以成功的建立气滞血瘀证大鼠动物模型,该模型的成功有望为将来血瘀证的进一步研究与活血化瘀方药的筛选提供实验基础。     

红景天注射液对大鼠心肌缺血再灌注所致心肌梗塞的影响

目的：观察红景天注射液对心肌缺血再灌注损伤所致心肌梗塞范围及血清相关生化指标的影响。方法：建立心肌缺血再灌注损伤模型，观察红景天注射液对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌损伤程度，心肌梗塞面积，梗塞区重量；检测大鼠血清磷酸肌酸激酶（CK）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量。结果：红景天注射液能明显减轻心肌损伤程度，缩小心肌梗塞面积，减轻梗塞区重量；并能显著降低血清CK及MDA的含量，增加血清SOD活性。结论：红景天注射液对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。