灵芝菌丝体多糖对HL-60细胞凋亡的影响

目的：研究灵芝菌丝体粗总多糖(MGLP1)、总多糖(MGLP2)对HL-60细胞凋亡的影响。方法：MGLP1,MGLP2与HL-60细胞共培养,MTT法检测MGLP1,MGLP2对HL-60细胞增殖的抑制作用;琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞检测法定性定量检测细胞凋亡。MGLP1,MGLP2作用于小鼠脾细胞,再将共培养上清液(MGLP1-S-CM, MGLP2-S-CM)作用于HL-60细胞,同法定性定量检测它们对HL-60细胞凋亡的诱导作用。结果：MGLP1, MGLP2在体外对HL-60细胞的增殖无明显的抑制作用,且不能明显的诱导HL-60细胞凋亡。但MGLP1, MGLP2作用于脾细胞的共培养上清液却可以明显的诱导HL-60细胞凋亡。结论：MGLP1, MGLP2无直接促进HL-60细胞凋亡作用,但可通过脾细胞间接诱导HL-60细胞凋亡。     

类固醇激素受体及其功能

类固醇激素包括雌激素、雄激素和肾上腺皮质激素等是具有类固醇(甾体)基本结构的一类药物,均系亲脂疏水性化合物。与肽类激素不同,它们不是作用于细胞膜上的受体,而是直接进入细胞内,与细胞核受体结合而起作用。 一、类固醇激素受体与其受体后作用机制的基本概念 最初的假说是根据用放射性同位素标记的类固醇激素与靶细胞的胞浆和胞核提取物结合     

羧甲基茯苓多糖的抗肿瘤作用

据文献报道,羧甲基茯苓多糖对动物实验性肿瘤有抗肿瘤活性,但管内试验发现,此药对S-180肉瘤细胞和艾氏腹水癌细胞均无直接细胞毒作用。为进一步探讨羧甲基茯     

口服鸡源性Ⅱ型胶原蛋白诱导实验性CIA小鼠免疫耐受

评价口服鸡源性Ⅱ型胶原蛋白 (chickentypeⅡcollagen ,CCⅡ )对胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)小鼠的抗炎及免疫作用的影响。方法 :以CCⅡ蛋白与福氏完全佐剂免疫昆明种小鼠 ,并于第 2 1天强化免疫 1次。CCⅡ于致敏前第 5天即开始灌胃给药 ,共 2 0d。每周两次评价多发性关节炎评分。以ELISA法测定CIA小鼠血清抗CⅡ抗体。以流式细胞测定法测定小鼠脾T淋巴细胞亚型。以ELISA法测定佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞IL 1分泌水平。结果 :口服CCⅡ 5 μg·kg-1和 5 0 μg·kg-1可明显降低多发性关节炎评分值 ,而25 0 μg·kg-1剂量组则无作用 ;CCⅡ 5 μg·kg-1剂量组可抑制CIA小鼠升高了的血清抗CⅡ抗体水平 ;口服CCⅡ可使CIA小鼠升高的L3T4+/Lyt 2 +值有所降低。口服CCⅡ可使佐剂性关节炎大鼠升高了的IL 1水平有所降低。结论 :口服CCⅡ可抑制CIA小鼠多发性关节炎的发生 ,此作用可能有体液免疫和细胞免疫两种机制参与。以上作用的发生为剂量依赖性的 ,即小剂量作用最强。     

阿克他利免疫调节作用的初步研究

目的:观察阿克他利对免疫增强及免疫抑制小鼠的迟发型超敏反应(delayedtypehypersensitivity,DTH)的影响以及对以上两种小鼠T细胞亚型的影响,以期观察阿克他利的免疫调节作用及其免疫调节作用机制。方法:不同浓度环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)造成免疫增强及免疫低下小鼠模型,采用2,4二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene,DNFB)免疫及攻击测定小鼠DTH反应;测定模型小鼠脾T淋巴细胞亚型的改变。结果:阿克他利对由大剂量Cy(致敏前3d,Cy250mg·kg-1,皮下注射)造成的DTH增强有明显的抑制作用,对由Cy(致敏当天,80mg·kg-1,皮下注射)造成的小鼠DTH低下有恢复作用。进一步观察,发现阿克他利可有效调节过高或过低的T细胞亚型水平,对Cy造成的免疫增强小鼠,使Th与Ts数量均有下降,但Th下降比例大于Ts,使Th/Ts值随剂量增加而降低;对Cy造成的免疫抑制小鼠,阿克他利可使Th、Ts有所回升,而Ts回升更明显,亦使Th/Ts值下降。结论:阿克他利具有显著的免疫调节作用。     

人肝癌Bel7402/5-FU耐药株多药耐药与凋亡关系的研究

目的　从凋亡的角度探讨人肝癌细胞Bel74 0 2 / 5 FU多药耐药的分子机制。方法　采用SRB法检测Bel74 0 2 / 5 FU耐药株的多药耐药性 ,用AnnexinV FITC/PI双标流式细胞术检测Bel74 0 2细胞及其耐药株的凋亡程度 ,PI单染检测细胞周期变化 ,RT PCR方法检测凋亡相关因子bcl 2、bcl xl、bcl xs、bax、fas、p5 3和cpp32的表达情况。 结果　Bel74 0 2 / 5 FU耐药株具有多药耐药性 ;相同剂量 30 μmol·L-1及 15 0 μmol·L-15 FU处理 ,Bel74 0 2细胞凋亡明显增加 ,G0 /G1期增加 ,S期、G2 /GM减少 ,耐药株不出现凋亡增加及细胞周期改变 ;耐药株凋亡相关因子bcl xl、bcl xs和bax表达上调 ,p5 3和cpp32表达下调。 结论　人肝癌Bel74 0 2 / 5 FU耐药株的多药耐药性可能和凋亡减少有关 ,抗凋亡因子bcl xl表达上调 ,促凋亡因子 p5 3和cpp32表达下调可能参与Bel74 0 2 / 5 FU耐药株的多药耐药。     

草栽与段木栽培的灵芝活性成分的分离与鉴定 Ⅰ.多糖肽成分的提取、纯化及性质

目的　研究草栽和段木栽培灵芝的多糖性质和含量 ;考察以草代木栽培灵芝的可行性的研究。方法　提取、分离、逆相透析方法研究二者子实体多糖。应用气相色谱、凝胶渗透色谱法测定多糖的组成、摩尔比和相对分子质量。 IR,1 H- NMR和 1 3C- NMR等光谱确定多糖肽化合物结构。结果　草栽灵芝多糖肽 ( GL PG )和段木多糖肽( GL PW)的重均相对分子质量 ( Mw)分别为 5 .13× 10 5和 5 .85× 10 5;黏均相对分子质量 ( Mη)分别为 6 .2 1× 10 5和6 .96× 10 5,二者具有相同的相对分子质量分布及光谱数据。从光谱分析中看出各单糖间的苷键构型相似 ,均以β-苷键为主 ;糖肽部分均含有相同的 16种氨基酸 ,糖的组份为鼠李糖、木糖、果糖、半乳糖、葡萄糖等 ,GL PW还含有微量甘露糖。结论　草栽灵芝与段木灵芝多糖肽的主要理化特性相似 ,其提取率比段木灵芝约高 2 .8倍 ,为草栽灵芝的综合开发与药用提供了科学依据。     

高效凝胶渗透色谱法测定双灵固本散中多糖肽的分子量及其分布

目的建立双灵固本散分子量及其分布测定的质控方法。方法采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC),多糖专用凝胶柱TSKG 3000SWXL,以已知分子量右旋糖酐(D extran)为对照品,0.2m o.lL-1硫酸钠溶液为流动相;柱温35℃;流速0.5m.lm in-1;示差折光检测器。结果利用GPC专用软件处理测得双灵固本散中多糖肽的重均分子量(Mw)在12000~18000和数均分子量(M n)在6500~7500以及分子量分布(Mw/M n)小于3。用双灵固本散高效凝胶渗透图谱与灵芝子实体中分离出具有活性成分的多糖肽(GL-PPT)图谱作对照,结果表明,双灵固本散含有具有药理活性物质——灵芝多糖肽基本相同的分子量及其分布。结论本文实验建立的方法简便、快速,可作为灵芝糖肽的特征鉴别图谱和产品的质量控制。     

灵芝的抗肿瘤作用机制

70 年以来国内外一系列研究证明灵芝[ Ganodermalucidum(Leyss.ex Fr.)Karst.] 对动物移植性肿瘤具有抑制作用,可使瘤重减轻,生存时间延长。并认为灵芝多糖可能是灵芝抗肿瘤作用的重要有效成份[1]。然而,灵芝的抗肿瘤作用是如何产生的？灵芝是直接杀死肿瘤细胞,还是像一些学者推测的那样：灵芝是通过机体内部的抗肿瘤机制间接杀死肿瘤细胞,这些均是目前学术界关注的焦点。为此,我们采用体内外抗肿瘤实验方法和细胞分子生物学技术以及血清药理学方法探讨了灵芝的抗肿瘤作用及其机制。1 灵芝的体内抗肿瘤作用给Blab/c 小鼠皮下接种肉…     

灵芝益甘粉对D-氨基半乳糖诱导小鼠肝损伤的保护作用研究

目的:观察灵芝益甘粉保肝作用,并探讨其作用机制。方法:实验分为:正常对照组、模型对照组、阳性对照组、灵芝益甘粉高、中、低剂量组。造模24h后处死动物并取材,测定:①肝、脾、胸腺与体重之比;②血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性;③肝组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量;④小鼠肝组织病理变化。结果:灵芝益甘粉低、中、高剂量给药组对模型小鼠升高的ALT和AST活性降低。与模型组比较,灵芝益甘粉可以明显降低小鼠肝匀浆MDA的水平,升高GSH-PX活性。模型组小鼠肝细胞气球样变性、坏死程度高于对照组,灵芝益甘粉能明显改善肝细胞坏死病变程度。结论:灵芝益甘粉对D-氨基半乳糖诱导的肝损伤具有一定的保护作用,其保护作用可能与其抑制脂质过氧化损伤有关。