46例乳腺巨大恶性肿瘤切除术后经皮瓣修复缺损者的预后分析

目的分析经自体皮瓣修复乳腺巨大恶性肿瘤术后缺损者的预后及相关因素。 方法回顾性分析2012年4月至2018年5月中山大学孙逸仙纪念医院收治的46例乳腺巨大恶性肿瘤患者的临床资料。患者接受局部切除术后行自体皮瓣修复缺损。根据不同病理类型、是否伴有远处转移、切缘能否达到阴性以及治疗反应性进行亚组分析,采用Log-rank检验分析不同亚组的疾病无进展生存(PFS)和OS情况;采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析PFS和OS的影响因素。 结果46例患者中,乳腺间叶恶性肿瘤患者7例,其余39例为乳腺癌患者(luminal B型18例,HER-2阳性乳腺癌11例,三阴性乳腺癌10例)。单因素分析发现：(1)乳腺间叶恶性肿瘤患者中位PFS和OS分别为28.5个月(18.1～38.7个月)和28.5个月(18.1～38.9个月), luminal B型乳腺癌患者中位PFS和OS分别为17.2个月(14.1～20.3个月)和25.1个月(13.7～36.6个月),HER-2阳性乳腺癌患者中位PFS和OS分别为15.6个月(12.9～51.2个月)和35.8个月(19.8～71.8个月),三阴性乳腺癌患者中位PFS和OS分别为8.6个月(4.6～12.5个月)和18.5个月(5.8～43.5个月)。4种恶性肿瘤相比,患者中位PFS和OS的差异均有统计学意义(PFS：χ²＝16.645,P＝0.001;OS：χ²＝8.617,P＝0.035)。(2)仅有T₄局部病灶者(25例)与T₄病灶伴远处转移者(21例)相比,中位PFS和OS的差异均无统计学意义[PFS：17.2个月(7.3～27.0个月)比9.8个月(8.6～11.1个月),χ²＝ 1.369,P＝0.242;OS：28.5个月(14.1～42.9个月)比20.2个月(14.4～25.9个月), χ²＝1.779,P＝0.182]。(3)皮肤切缘阴性者(35例)中位PFS和OS分别为22.1个月(10.8～33.4个月)和22.2个月(11.3～33.2个月),明显优于皮肤切缘阳性者(11例)的5.1个月(3.0～7.2个月)和10.2个月(5.4～15.0个月)(PFS：χ²＝17.794,P<0.001;OS：χ²＝6.192,P＝0.013)。(4)系统治疗反应好的乳腺癌患者,其中位PFS和OS明显优于治疗反应差的患者[PFS：23.1个月(5.9～40.4个月)比8.7个月(7.8～9.8个月),χ²＝ 9.868,P＝0.001; OS：46.7个月(25.5～68.0个月)比14.3个月(9.9～18.9个月),χ²＝8.994,P＝0.002]。将以上因素纳入多因素Cox比例风险回归模型分析后发现,这些因素都不是影响患者PFS和OS的独立预后因素。 结论乳房巨大恶性肿瘤患者的预后与肿瘤病理类型、切缘是否阴性、全身系统治疗的反应性等多个因素相关,并非由单一因素所决定。     

旋毛虫成虫期特异性基因的筛选与序列分析

目的　获得旋毛虫成虫期特异性基因序列。方法　应用旋毛虫成虫期特异性探针对成虫cDNA文库进行杂交筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库 (GenBank)查寻比较 ,采用DNAstar软件进行基因序列分析。结果　利用消减杂交 (subtractedhybridization)获得的旋毛虫成虫期特异性探针筛选成虫cDNA文库 ,获得一个长 16 2 9bp的基因。其开放阅读框架由 146 4个核苷酸组成 ,编码 487个氨基酸。序列分析表明 ,该序列是一个尚未见报道的旋毛虫基因序列 ,在 2 0 7～ 2 70位氨基酸间存在两个锌指结构 ,在 5 2～ 6 4,10 8～ 116 ,137～ 16 3,2 2 6～ 2 6 0位氨基酸处存在预测的抗原表位。结论　获得旋毛虫成虫期特异性基因 ,其编码的蛋白具有一定的抗原表位     

旋毛虫pcDNA3.1/Ts87重组质粒的构建和表达

目的构建和表达旋毛虫重组质粒。方法PCR法在旋毛虫抗原基因Ts87两端加上合适的酶切位点和KOZAK序列,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1/Ts87重组质粒。采用Lipofectamine介导的细胞外源DNA转染法,把重组质粒导入COS7细胞。分别用肌肉注射和基因枪免疫小鼠。结果和结论成功构建pcD-NA3.1/Ts87重组质粒,并在COS7细胞和BALB/c小鼠体内表达。     

不同培养条件对旋毛虫肌幼虫产生排泄分泌抗原的影响

目的对比在常规1640培养基中和在模拟宿主生理环境的培养液的刺激下旋毛虫肌幼虫排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原产量及成分的变化,同时观察在感染初期ES抗原的不同组分在小鼠体内诱导产生主要抗体的时间,以寻找获得更高产量的肌幼虫ES抗原的制备方法。方法在虫数、培养液体积、培养时间、温度、ES抗原体积浓缩倍数等条件相同的情况下,按培养液中小鼠血清超滤液(简称血超)、还原型谷胱甘肽(简称谷胱甘肽)和胆汁粉的不同组合分组,分别培养肌幼虫并收集ES抗原,再以相同上样体积作SDS-PAGE电泳,Odyssey双色红外激光成像系统扫描凝胶并测定条带信号强度进行定量比较。用Western blotting对比观察不同组ES抗原的活性及成分变化。以旋毛虫人工感染小鼠不同时期收集的血清(感染后15、18、20、21、22、24、27、30、40、50 d)作为一抗进行Western blotting,观察ES抗原主要成分在小鼠体内产生抗体的先后顺序。结果S DS-PAGE电泳凝胶定量分析结果显示,血超+谷胱甘肽组、胆汁组和胆汁+血超组的抗原产量明显高于1640培养基组,其中胆汁+血超组的抗原产量最高。Western blotting结果显示,各组抗原均能被感染血清(感染后40 d)识别产生多个条带,其中血超+谷胱甘肽组的条带中相对分子质量约为87 000的条带荧光信号明显强于其他组;感染初期ES抗原不同组分在小鼠体内产生抗体的先后顺序为:45 000、53 000、41 000,其抗体可被检测到的最早时间分别为感染后15、21、24 d。结论培养液中添加胆汁粉可大大提高旋毛虫肌幼虫ES抗原产量,胆汁粉与血超共用后ES抗原的增产效果更佳;感染初期肌幼虫ES抗原的不同组分诱导小鼠产生抗体的时间不同。此研究将为改进ES抗原制备方法,寻找旋毛虫病早期诊断抗原提供实验依据。     

云南和海南两省不同地区恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因型的研究

目的　分析云南和海南两省恶性疟原虫的基因型及其分布。方法采用套式PCR法特异扩增MSP2基因中间多态区 ,对恶性疟原虫群体进行基因分型。结果　检测云南省 31例和海南省 2 9例恶性疟原虫患者血清 ,其中分别有 14和 18种不同的MSP2等位基因型 ,其等位基因株存在高度的多态性 ,基因片段大小及分布频率具有地区差异。海南省不同等位基因型虫株混合感染及多重感染现象比云南省严重。结论　云南和海南两省恶性疟原虫分离株MSP2基因型组成具有明显差异     

旋毛虫抗原基因Ts88原核表达及重组蛋白鉴定

目的　原核表达旋毛虫抗原基因Ts88,并对重组蛋白的抗原性进行鉴定。　方法　免疫筛选cDNA文库得到旋毛虫抗原新基因Ts88,克隆入原核表达载体pET28c(+),异丙基βD硫代半乳糖苷诱导表达。重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体滴度。蛋白质印迹法检测重组蛋白的抗原性。免疫荧光试验确定Ts88蛋白在虫体的分布。　结果　经原核表达的Ts88重组蛋白,用其免疫小鼠可得到高滴度的抗体血清。蛋白质印迹法结果表明该重组蛋白能与旋毛虫病患者血清、旋毛虫病猪血清、人工感染及人工免疫兔血清反应,不与其他蠕虫病患者血清发生交叉反应 ,并能识别旋毛虫虫体天然抗原成分。免疫荧光试验显示Ts88蛋白主要分布于虫体体壁。　结论　成功制备Ts88基因的重组蛋白,证明该蛋白具有较好的抗原性     

旋毛虫成虫可溶性虫体蛋白对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠急性结肠炎的影响

本文探讨旋毛虫成虫可溶性虫体蛋白(Soluble adult proteins,SAP)对葡聚糖硫酸钠(Dextran sulphate sodium,DSS)诱导的C57 BL/6小鼠结肠炎的影响.将36只小鼠随机均分为3组:对照组(PBS 组)、肠炎组(PBS+ DSS组)、虫体蛋白治疗组(SAP+ DSS组).小鼠连续饮用3％DSS溶液7d诱发急性肠炎,对照组给予双蒸水.诱发肠炎的同时,治疗组每天经腹腔注射25μg虫体蛋白,肠炎组注射PBS.每天观察对照组和实验组小鼠的临床表现,并进行临床疾病活动指数(DAI)评分.第7d将小鼠处死,观察结肠肉眼或大体病变及组织病理改变.同时提取小鼠脾淋巴细胞和肠系膜淋巴结细胞,用酶联斑点免疫试验检测细胞因子水平.结果显示,与肠炎组相比,虫体蛋白治疗组的小鼠肠炎症状明显缓解,结肠病理变化较轻,脾淋巴细胞和肠系膜淋巴结细胞的Th1型细胞因子IFN-γ分泌水平下降,Th2型细胞因子IL-4和调节性细胞因子IL-10分泌水平显著升高.表明旋毛虫可溶性成虫虫体蛋白对DSS诱导的C57BL/6小鼠结肠炎有缓解作用.     

基于医院病案资料的死亡病例分析(2003~2011年)

【摘要】〓目的〓通过对医院住院病人死亡病例的年龄、性别、死亡疾病等因素的统计分析,掌握各年龄段的死因构成及各系统的疾病死亡的变化趋势。方法〓利用医院病案资料中的死亡病例4068例,采用世界卫生组织ICD-10疾病分类原则对所有死亡病例进行分类编码,采用SPSS18.0软件进行数据整理、统计描述和统计分析。结果〓2003~2011年医院所有死亡病例4068人,死亡人数男女比例为1.67∶1。50~岁组和60~岁组所占的比例呈现逐渐下降的趋势,而40~岁组所占的比例有逐渐升高的趋势。肿瘤和循环系统疾病是主要死因,呼吸系统疾病成为第三大死因,传染病与寄生虫病导致的死亡明显下降。结论〓肿瘤、循环和呼吸系统疾病等是需要重点防治的疾病,同时,需要重点关注40~岁组和男性人群的身心健康以减少死亡。     

大学生蠕形螨感染情况分析

蠕形螨又称毛囊虫,为一种永久性小型寄生螨,主要寄生部位为颜面部的皮质腺和毛囊,与痤疮、酒糟鼻等皮肤损害有一定关系.虽然蠕形螨感染较普遍,多为带虫感染,且极少引起不适,故常被忽视.为了解在校大学生蠕形螨的感染情况,作者于2004年3～5月对首都医科大学268名大学生进行了调查.     

旋毛虫和伪旋毛虫的E-S产物中单链核酸内切酶的活性

旋毛虫是一种寄生在哺乳动物横纹肌中的致病性线虫,伪旋毛虫是一种与之有很近亲缘关系的种系,它既能感染哺乳动物又能感染鸟类。核酸内切酶在其他微生物,例如支原体,在调节宿主细胞的基因组表达中扮演着重要的角色或者作为一种潜在的致病因