大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定

【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA，使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序，将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中，然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM 2000法转染HEK293细胞包装携带BDNF目的基因的重组腺病毒，少量提取重组腺病毒DNA检测证实为复制缺陷型BDNF基因重组腺病毒后大量扩增。蛋白电泳及Western blot法初步检测BDNF目的基因在HEK293细胞中的表达。【结果】成功构建了携带大鼠BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒。并证实其在HEK293细胞中可高水平表达BDNF目的基因。【结论】利用体外连接法可方便、快捷地构建携带BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并可在体外高水平表达表达其所携带的目的基因。     

产妇立前PT APTT FIB测定

目的　了解血浆凝血酶原时间测定 (PT)、活化部分凝血活酶时间测定 (APTT)、纤维蛋白原 (FIB)测定三项凝血指标对待产妇发生妊高征、DIC的早期预防和诊断的意义。方法　利用美国贝克曼库尔特ACL - 2 0 0型全自动血凝仪 ,以及配套试剂(校准吕、质控品及检测试剂 )测定 2 70例待产妇血浆中PT、APTT、FIB并与 2 5 0例外科术前病人进行对照。结果　待产妇女2 70例PT :10 6 6± 0 6 5 ,APTT :30 6 7± 3 13,FIB :5 74± 1 2 5与外科术前妇女 2 5 0例PT :11 96± 0 87,APTT :32 7± 4 4 1,FIB :4 0 5± 1 30比较 ,均有显著差异 (P >0 0 1)。结论　待产妇女血液处于高凝状态 ,PT、APTT、FIB三指标的测定对妊高征、DIC早期诊断、预防、治疗及预后均有一定的临床意义。     

神经退行性疾病状态下血-脑屏障变化机制及中药对血脑屏障的影响研究进展

血-脑屏障（BBB）结构和功能的完整性是维持中枢神经系统动态平衡的关键因素。BBB异常伴随神经退行性疾病的发展过程,不同的神经退行性疾病,其BBB异常的病理机制不同,而药物对BBB异常的改善作用也严重影响药物对神经退行性疾病的疗效。本文主要针对神经退行性疾病状态下BBB异常的分子机制及中药的调控作用及其机制两方面进行综述,为神经退行性疾病靶向血脑屏障药物的研发提供基础理论参考     

两种方法治疗结节性疥疮250例疗效比较

两种方法治疗结节性疥疮２５０例疗效比较李季，杨睿贵州省人民医院皮肤科（邮政编码５５０００２）我科近２年使用二种方法局部治疗结节性疥疮共２５０例，现报告如下。一般资料男２３０例，女２０例。年龄１５～４０岁。皮疹主要分布在阴茎、阴囊。少数分布于外阴部、阴...     

自发性食管破裂的诊断及治疗

我院自１９７８年至１９８９年共收治自发性食管破裂患者２例。该病在临床上极为少见,早期极易误诊,现就该病的诊断及治疗讨论如下。１临床资料〔病例１〕患者,男,４０岁。入院前１２ｄ因酗酒后剧烈呕吐而引起咳嗽、剧烈胸痛、发热并伴有呼吸困难。曾在当地医院就诊,...     

冠心病患者血浆ET、CGRP及血清NO检测分析

目的:探讨血浆内皮素(ET)、血浆降钙素基因相关肽(CGRP)及血清一氧化氮(NO)水平与冠心病之间的关系。方法:将安阳地区医院2013年1月至2013年8月诊治的126例胸部不适患者依据诊断结果分为冠心病组60例,对照组66例,对两组患者进行ET、NO、CGRP测定,并计算NO/ET比值。结果:冠心病组NO、NO/ET比值明显低于对照组,ET、CGRP测定值明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:冠心病的发生、发展与ET、NO、CGRP有着直接关系,血管活性因子检测对冠心病诊断、治疗有较好的指导作用。     

BPH-1通过分泌前列腺素E2促进前列腺间质细胞芳香化酶的表达

目的：研究前列腺上皮细胞旁分泌对间质细胞芳香化酶表达的影响。方法：用前列腺上皮细胞系（BPH-1, LNCap, DU145, PC3）条件培养液（CM）处理间质细胞，用RT-qPCR和Western blotting检测芳香化酶表达水平。用RT-qPCR和ELISA检测上皮细胞系环氧合酶2（COX-2）的表达及其CM前列腺素E2(PGE2)浓度。用添加COX-2特异性抑制剂NS-398的培养液培养BPH-1，检测其CM和PGE2对间质细胞芳香化酶表达影响。结果：良性前列腺增生上皮细胞系BPH-1 CM能促进间质细胞芳香化酶mRNA和蛋白的表达，而前列腺癌细胞系PC3、DU-145和LNCap对芳香化酶的表达没有影响。BPH-1 COX-2 mRNA表达水平和PGE2分泌水平远高于其它癌细胞系。添加NS-398培养BPH-1的CM，其PGE2浓度明显降低。PGE2可明显诱导间质细胞芳香化酶的表达。结论：BPH-1通过分泌PGE2促进前列腺间质细胞芳香化酶的表达。     

大黄鱼过敏原的提取、分离及免疫学特性鉴定

目的提取、分离大黄鱼特异性过敏原成分,并对其免疫学特性进行鉴定。方法采用Coca’s提取液提取大黄鱼蛋白;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析大黄鱼总蛋白的组成,以对鱼过敏患者阳性血清为一抗,Western-Blotting分析大黄鱼中的过敏原;阴离子交换层析对大黄鱼总蛋白进行初步分离,Western-Blotting分析各个组份的免疫学活性。结果大黄鱼粗浸液蛋白分子量在8～116kD之间;Western-Blotting检测到分子量为54、29、27和14kD的过敏原;通过离子交换层析分离,过敏原蛋白的相对含量有显著提高,且大多都保持原有的免疫学活性。结论研究发现了大黄鱼中多种过敏原并对其免疫学活性进行了鉴定。     

基于网络药理学与分子对接探讨川楝子治疗痛经的作用机制

目的:通过对含川楝子的处方分析,基于网络药理学与分子对接的方法探讨川楝子治疗痛经的作用机制.方法:收集上海浦东新区光明中医医院2015年11月1日 至2020年10月31日含川楝子的处方,采用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacolog...