离体眼球表面灌流系统的建立及其功能评价

目的 建立离体眼球表面灌流系统(isolated eye superfusion system,IESS),评价IESS对离体眼球正常形态和功能的维持能力.方法 在文献报道基础上,应用仿生学原理,结合具体实验条件,自行设计制作离体眼球表面灌流系统.选取8只经检测未发生损伤的离体兔眼置于IESS中,在不同时间点对离体眼球进行角膜混浊度、荧光素滞留度、角膜水肿率和病理组织学改变进行检测,从而评价IESS的功能.以上实验间隔1周进行1次,共进行3次.结果 成功设计制作了具有自主知识产权的IESS.3组评价试验中,离体眼球角膜混浊度评分分别为0.00±0.00、0.01±0.03和0.00±0.01;荧光素滞留度评分分别为0.03±0.09、0.00±0.00和0.03±0.09;角膜水肿率分别为(2.06±1.63)%、(2.83±1.93)%和(2.03±1.19)%,以上指标均在允许范围内,并未见明显的角膜病理组织学损伤.IESS工作稳定性良好,3组实验间各指标差异无统计学意义(P＞ 0.05).结论 IESS可以维持离体眼球在实验期间的正常形态,且具有较高的稳定性和可靠性,可以用于试验用离体眼球的短期保存.     

小鼠胃插管模型制备方法探讨

胃插管动物模型能较准确地经胃给予动物药物或营养成分，在毒理学、药理学和营养学等动物实验研究中有重要地位。为方便胃插管手术，一般用狗、兔和大鼠等较大型的动物制备，但由于小鼠是最常用的实验动物，并且小鼠的抗体也远比其他实验动物丰富，新近发展起来的转基因和基因敲除动物也多为小鼠，所以为方便开展进一步深入细致的研究工作，     

高浓度锌对雄性大鼠生殖系统的影响

目的:探讨高浓度锌对雄性大鼠生殖系统的影响。方法:分别以12、120、240mg/kg三个剂量的硫酸锌,给大鼠灌胃染毒60天,观察大鼠生殖系统的变化。结果:各剂量组锌对雄性大鼠的生殖系统产生不同程度的影响,低、中、高各剂量组大鼠精子数目和活动度分别为(93.35±23.62)×10~9/L、(61.92±10.01)％;(75.20±20.26)×10~9/L、(56.62±11.46)％和(46.45±18.84)×10~9/L、(42.85±10.49)％,与阴性对照组(72.60±22.72)×10~9/L、(58.85±8.85)％比较,低剂量组精子活动数目和活动度显著提高,高剂量组显著降低,且有统计学意义(P<0.05)。高剂量组大鼠睾丸有较明显的病理学损伤。结论:高浓度锌对雄性大鼠生殖有损伤作用。     

原发性高血压患者发中化学元素的含量分析

目的探讨原发性高血压与发中化学元素的关系。方法选取广州地区80例高血压病人进行成组病例对照研究,采用原子吸收分光光度法分析80例高血压病例和160例健康对照发中化学元素K、Ca、Mg、Zn、Fe的含量。结果高血压病例组的Ca、Mg、Zn元素含量及Ca/Mg比值显著低于正常对照组(P<0.05),高血压病例组的Fe元素含量显著高于正常对照组(P<0.05)。结论Ca、Mg、Zn、Fe、Ca/Mg与原发性高血压的发生有一定的关系。     

适用于代谢组学研究的人体尿液保存与气相色谱-质谱联用分析方法

目的 建立适用于代谢组学研究的人体尿液保存方法及其代谢物气相色谱-质谱(GC-MS)联用分析方法.方法 向尿样中分别加入1％ HNO3、1％ HCl、2％抗坏血酸作为保存剂,并设空白对照,置于-80℃保存0、5、39 d后连续3次反复冻融,每次取样100μl,加入20 g/L尿素酶50μl,于37℃酶解2h,加入去氧保护剂甲氧基胺盐处理后,再加入衍生剂(MSTFA)于37℃反应过夜,取上清液进行GC-MS测定,并以马尿酸为指标测定方法学参数.结果 以原尿在-80℃保存,在39 d内测得所选8个不同保留时间色谱峰面积的RSD均小于10％.以马尿酸为指标,在0.005～1.75 g/L的线性范围内,所得线性方程为y=0.127 4x+0.473 8,r=0.999 2;该方法的检出限为1.26 mg/L,加标回收率为75％～125％,RSD为1.1％～8.5％.对22名膳食镉暴露人群与12名对照人群尿样进行检测发现,两组人群尿液中代谢产物的种类和含量均有较大变化.结论 该方法具有尿样稳定性良好,尿液分析方法学参数优良的优点,适用于膳食重金属暴露人群尿样中内源性代谢物的检测.     

离体眼球体内环境模拟装置的研制

本文所述的离体眼球体内环境模拟装置利用仿生学原理,在体外模拟眼球的体内环境,以维持离体眼球的正常形态及其对刺激物的反应能力。评价实验证明该装置可以稳定的维持角膜的形态,满足离体眼球实验的需要。     

江门市某区淡水鱼肝吸虫感染与环境卫生情况调查

目的 了解江门市某区淡水鱼养殖场的淡水鱼肝吸虫感染和环境卫生情况,为制定防控策略提供参考.方法 在江门市某区选取5个镇的6个行政村开展调查,制定统一的调查表,主要调查内容包括养殖场基本情况、人和动物粪便污染情况等;采取部分养殖场的淡水鱼进行肝吸虫囊蚴检验.使用EpiData3.0建立数据库.用Epiinfo3.5.1进行统计分析.结果 共调查了67间淡水鱼养殖场,16间塘基建有厕所,占被调查养殖场总数的23.88%(16/67);48间塘基建有家禽或家畜栏,占被调查总数的71.64%(48/67).抽样检测了10间养殖场的淡水鱼,共有6间养殖场淡水鱼中检出肝吸虫囊蚴,占受检总数的60%(6/10),各村均有受肝吸虫感染的养殖场.共采集了156条淡水鱼,囊蚴总阳性率为15.38%(24/156).鲩鱼的感染率最高(5/10),其次为鳙鱼(11/47).结论 江门市某区人和动物粪便污染淡水鱼养殖场水质的情况较为普遍,淡水鱼感染肝吸虫囊蚴的情况仍然严重,应当采取有效措施改善环境卫生,降低淡水鱼肝吸虫感染率,以制止肝吸虫病的流行.     

三七的急性毒性及致突变性试验研究

目的: 探讨三七的急性毒性和致突变性,为评价其安全性提供毒理学依据。方法: 采用小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和Ames试验,参考《食品安全性毒理学评价程序》进行。小鼠急性经口毒性试验采用最大耐受剂量法,折合剂量为15 g/kg。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验均设10.00、5.00、2.50 g/kg剂量组,另设溶剂和阳性对照组。Ames试验设2、8、40、200、1 000、5 000 μg/皿剂量组,另设自发回变组、溶剂及阳性对照组。结果: 急性毒性试验显示小鼠对三七经口灌胃的最大耐受剂量>15 g/kg。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验中,各剂量组的微核率和精子畸形率与溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Ames试验中,在加与不加S9时各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系,结果为阴性。结论: 在本实验条件下,三七对小鼠的经口急性毒性属于无毒级,对小鼠体细胞、雄性生殖细胞和鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株均未见潜在的致突变性。     

中国南方粤语方言地区汉族人群GSTM1、GSTT1基因多态性

背景与目的:了解谷胱甘肽-S-转移酶M1、T1(GSTM1、GSTT1)基因多态性在中国南方粤语方言地区健康人群中的分布规律,初步探讨其与人群某些疾病家族史之间的关系。材料与方法:根据研究目的在广东省新兴县和广东省广州市两个地区选择符合条件的健康人群606人作为研究对象。应用聚合酶链式反应-2%琼脂糖凝胶电泳的方法检测调查对象GSTM1、GSTT1基因型。结果:在调查人群中,GSTM1基因纯合缺失基因型GSTM1(-/-)的出现频率为56.8%(n=597);GSTT1基因纯合缺失基因型GSTT1(-/-)的出现频率为42.1%(n=579);两基因联合缺失的频率为22.8%(n=570)。结论:GSTM1与GSTT1基因之间在人群中分布相互独立,无连锁现象,GSTM1基因在两个不同地区来源人群中的分布有显著差异。GSTT1在人群中不同基因型的分布与研究人群中冠心病疾病家族史的发生之间显著关联,有冠心病家族史人群GSTT1缺失基因型的表达显著增加。     

人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建

【目的】克隆人类DNA聚合酶 (pol β)基因全长cDNA ,构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤维细胞HLF总RNA进行RT PCR扩增 ,用pGEM T载体经T/A克隆、DNA测序确定后 ,用双酶切将 pol β全长cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体 pEGFP C1,转染大肠杆菌DH5α ,筛选阳性克隆 ,双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT PCR获得 1 0 3kb的产物 ,经DNA测序 ,确定所扩增片段为人类 pol β基因全长cDNA ,进而成功筛选出真核表达载体 pEGFP C1 β。【结论】成功构建人 pol β基因全长cDNA真核表达载体 ,为进一步建立该基因的高表达细胞株提供基础