皮肤刺激动物实验替代物研究的现状与发展

对化学物是否引起机体皮肤刺激反应进行预测是化学物安全性评价或危害鉴定的重要组成部分.传统常用方法是由John Draize(1944)建立的皮肤刺激性和腐蚀性实验(Draize实验).     

健康人群谷胱甘肽硫转移酶M1基因型分布

目的 探讨广东地区瑶族和汉族健康人群谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)基因多态性的分布.方法 采用双重PCR方法检测237例瑶族和229例汉族人群GSTM1基因型.结果 瑶族和汉族人群GSTM1缺失基因型频率分别为68.35%(162/237)及64.19%(147/229),2者之间差异无统计学意义(P＞0.05);同民族不同性别之间差异亦无统计学意义(P＞0.05).结论 广东地区瑶族和汉族健康人群GSTM1基因呈多态性分布.     

镉致腺垂体细胞增殖效应的初步研究

内分泌系统的多个器官均是镉的直接毒作用靶器官。腺垂体为下丘脑—垂体—靶腺轴的重要组成部分,迄今尚未见有关镉(Cd)致腺垂体细胞损害作用的报道。本研究通过观察Cd在体内外影响腺垂体细胞增殖的特征以及在离体实验条件下,联合应用p38MAPK、ERK1/2激酶的特异性阻断剂SB203580     

D-半乳糖对小鼠肝脏影响的流式细胞术分析

目的以流式细胞术探讨D-半乳糖不同剂量、不同时间对小鼠肝脏活性氧(ROS)水平及细胞凋亡的影响。方法SPF级25~30 g KM种雄性小鼠按体重随机分组(n=6)。剂量-反应关系设阴性对照组、80、150和450 mg/kg D-半乳糖剂量组;时间-反应关系研究设阴性对照组、腹腔注射80 mg/kg半乳糖4、8和16周。实验结束后,取肝组织制备单细胞悬液,流式细胞术分析肝细胞ROS水平及细胞凋亡率。结果肝细胞ROS水平和细胞凋亡率的流式细胞术分析显示,随着D-半乳糖给予剂量的增加,各剂量组指标明显升高(P<0.01);80 mg/kg D-半乳糖连续给予8、16周后,指标亦明显增高(P<0.01)。结论在一定给予剂量及给予时间范围内,D-半乳糖可明显增加实验动物肝细胞ROS水平,诱导肝细胞凋亡,ROS水平的高低与细胞凋亡的发生具有一致性的变化趋势。     

医学实验室血液学指标测量不确定度评定方法的探讨

目的:探讨医学检测实验室血液学指标测量不确定度评定的方法。方法:采用CELL-DYN 3700型全自动血细胞分析仪测定大鼠血液中血红蛋白含量、红细胞数和白细胞数,根据数学模型CHb=AHb.k.f(g/L)、RBC=XRBC.k.f(1012/L)、WBC=XWBC.k.f(109/L)中各参数的意义和特点,建立不确定度分量构成图,从仪器检定获得示值误差、标准全血样品允许误差,样品重复测量操作过程3个方面对血液学指标进行测量不确定度的计算。结果:当样品血红蛋白含量x(HGB)=157(g/L)、红细胞数x(RBC)=7.31(×1012/L)、白细胞数x(WBC)=11.4(×109/L)时,其测量不确定度分别为:U95(HGB)=4(g/L),U95(RBC)=0.35(×1012/L),U95(WBC)=1.1(×109/L)。结论:通过建立数学模型、分析寻找各项影响因素及运用数理统计方法,可对医学检测实验室血液学指标测量不确定度进行合理的评定。     

应激活化蛋白激酶介导氯化镉致肾上腺皮质细胞凋亡作用探讨

目的 了解氯化镉（CdCl2)对豚鼠肾上腺皮质细胞应激活化蛋白激酶（stress activated protein kinase,SAPK）活性的影响及与凋亡的可能关系。方法 以0．625、1．25和2．50mg/kg CdCl2整体腹腔注射染毒雄性豚鼠,分别于染毒1h和12h处死动物,取肾上腺皮质进行SAPK活性测定（免疫沉淀－蛋白印迹杂交－化学发光法）和电镜观察细胞凋讯。结果 整体染毒1h、SAPK活性随CdCl2染毒剂量的增加呈增加的趋势;染毒12h,各组SAPK活性变化不明显。电观察染毒1h肾上腺皮质细胞未见凋亡征象;但染毒12h可见早期细胞凋亡。结论 SAPK活化在CdCl2诱导肾上腺皮质细胞凋亡过程中可能起重要作用。     

线粒体DNA氧化损伤热点的形成及其修复速率的比较

本研究旨在探讨线粒体DNA氧化损伤热点的形成是否与该点DNA修复速率慢有关 .BRL 3A细胞暴露于 5 0mmol·L- 1过氧化氢 (H2 O2 ) 30min后 ,分别于 0 ,1,4及 2 4h收获细胞 ,应用连接介导聚合酶链反应分析线粒体DNA氧化损伤热点的修复百分率并与线粒体DNA氧化损伤的总修复百分率比较 ,通过狭缝印迹法 ,比较了各时间点细胞内p5 3/线粒体DNA比率来验证其修复的可靠性 .结果表明 :在 4及2 4h ,热点的修复速率分别为 5 .2 %和 4 2 .1% .而线粒体DNA的总修复百分率分别为 76 .9%和 84 .1% ,后者与前者相比 ,其修复速率快 1～ 14倍左右 .应用狭缝印迹发现各时间点细胞内p5 3/线粒体DNA比率无明显变化 .因此 ,线粒体DNA氧化损伤热点的形成与其修复速率较慢有关 .狭缝印迹结果表明所观测的线粒体DNA的修复是可信的     

连接介导PCR分析线粒体DNA的氧化损伤频率及损伤热点

目的 论证线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａａｌ,ｍｔＤＮＡ）“常见缺失”与ＤＮＡ氧化损伤的关系。方法 采用连接介导ＰＣＲ（ｌｉｇａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａｔｅｄ ＰＣｔｒ,ＬＭＰＣＲ）,在大鼠肝细胞标（ＢＲＩ,３Ａ）暴露于５０ｍｍｏｌ／Ｌ过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）形成氧化损僵后,分析该缺失的断裂区段（８０７１～８１９０,约１２０ｂｐ）内,各核苷酸氧化损伤的频率及热点。结果 在８０７１～８１９０区段,存     

鸡胚尿囊膜苔盼蓝染色试验替代兔眼刺激试验的研究

目的评价鸡胚尿囊膜苔盼蓝染色试验（CAM—TBS）替代动物眼刺激试验（Draizetest）的可行性。方法在本实验室建立CAM—TBS试验方法，对已知刺激性分级的26种化学物质和未知刺激性分级的20种化妆品产品进行刺激性测评，化妆品检验样品同步进行Draize试验，然后将2种试验的分级结果进行比较，以分析判断2种方法分级结果的相关性和一致性。结果对所选的26种化学物质及其因不同受试浓度而形成的36个刺激性分级，CAM—TBS与Draize试验有32个分级结果一致，两者间等级相关性为Gamma=0．990（P〈0．01），分级一致性为Kappa=0．833（P〈0．01）：而对于20种化妆品产品，CAM—TBS刺激性分级结果有18个与Draize试验结果一致，两者间等级相关性为Gamma=0．957（P〈0．05），分级一致性为Kappa=0．688（P〈0．01）。结论CAM—TBS对受试物眼刺激性的分级与Draize试验具有较好的一致性，具有替代Draize试验的应用价值。