婴幼儿配方奶粉中三聚氰胺污染的初步危险性评估

2008年9月在我国多个省份相继发现婴幼儿因食用三鹿牌婴幼儿配方奶粉引发泌尿系统结石的病例.截至2008年9月17日8时,全国医疗机构临床确诊泌尿系统结石患儿6244例,4例已因肾功能衰竭死亡.9月16日国家质量监督检验检疫总局专项检查发现,22家企业69批次婴幼儿奶粉中检出了含量不同的三聚氰胺(Melamine),其中石家庄三鹿牌婴幼儿配方奶粉中含量较高,最高含量达2563 mg/kg,其他抽检奶粉中三聚氰胺最高含量在0.09～619.00 mg/kg之间.     

重金属的肾上腺皮质毒性与机制研究 Ⅱ.氯化镉影响肾上腺皮质激素合成分泌机制的整体实验研究

目的　研究镉对豚鼠肾上腺皮质细胞形态与功能影响的毒作用特点及可能的机制。方法选用健康雄性豚鼠以４５ μｇ／ｋｇ 和９０ μｇ／ｋｇ 氯化镉腹腔注射染毒，测定血皮质醇、醛固酮及促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ，放免法） 、血清胆固醇（ 酶联法） 、血和组织镉含量（ 原子吸收法） 和一氧化氮（ 硝酸还原酶法） 。结果　两个染镉组豚鼠血及肾上腺镉含量增加，ＡＣＴＨ 降低，呈剂量效应关系，高剂量组皮质醇略呈增高，其余波动在正常范围。肾上腺组织ＮＯ 水平降低，亦呈剂量依赖方式。结论　镉直接作用于垂体的同时可能引发肾上腺皮质应激反应，且肾上腺皮质ＮＯ 合成减低，提示其在镉肾上腺皮质毒性过程可能发挥重要作用     

葡萄籽提取物、维生素E和硒的联合抗氧化作用研究

目的 探讨和分析葡萄籽提取物、维生素E和硒合理配伍后的复合制剂对人体抗氧化能力的影响。 方法 根据受试者的纳入标准筛选114名自愿参与者作为受试者,按试验前受试者血液中的丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活力和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力情况分层后随机分为试验组和对照组,试验组受试者按每日服用量服用葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂,对照组受试者按同等剂量服用安慰剂,连续服用3个月后,检测和分析2组受试者血液中MDA含量、SOD活力和GSH-Px活力的变化情况。结果 本研究试验组和对照组各50人。2组受试者的年龄及性别构成差异均无统计学意义（均P>0.05）。试验结束后受试者精神状态、睡眠质量、饮食、大小便等均未发现明显异常,胸片、心电图、腹部B超检查结果也均未发现异常改变,均未出现不良反应。试验前2组受试者MDA含量、SOD活力和GSH-Px活力的差异均无统计学意义（均P>0.05）。试验后试验组MDA含量明显低于对照组,SOD活力和GSH-Px活力明显高于对照组（均P<0.05）。试验后试验组MDA含量下降率、SOD活力升高率和GSH-Px活力升高率明显高于对照组（均P<0.01）。结论 葡萄籽提取物、维生素E、硒合理配伍后的复合制剂能够明显降低受试者的MDA含量、提高受试者的SOD活力和GSH-Px活力,葡萄籽提取物、维生素E和硒合理配伍后联合使用能够有效提升人体的抗氧化能力。     

水中诺如病毒富集及定量检测研究

目的评估MCE—PEG富集法（混合硝酸纤维素膜第一次富集和PEG沉淀第二次富集）对水中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度。为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供有效的实验室检测方法。方法把含有诺如病毒的粪便加入纯净水中,用MCE．PEG方法富集后,荧光PCR绝对定量检测富集前后水的病毒浓度．评估该方法的病毒回收率。同时梯度稀释粪便悬液,分别加入纯净水中,评估该方法的灵敏度。结果经过混合硝酸纤维素膜第一次富集后待滤水被浓缩100倍,病毒平均回收率为56．12％,灵敏度是待滤水中病毒浓度为10拷贝μl。PEG沉淀第二次富集后,浓缩倍数为1000倍,病毒平均回收率为42．47％,灵敏度是待滤水中病毒浓度为1拷贝／μl。结论MCE—PEG富集法操作简单、材料价格实惠、易于购买、病毒回收率及灵敏度较高。可望进一步优化后广泛应用于不同水中病毒富集浓缩检测,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供了有效的实验室检测方法。     

离体眼球表面灌流系统的建立及其功能评价

目的 建立离体眼球表面灌流系统(isolated eye superfusion system,IESS),评价IESS对离体眼球正常形态和功能的维持能力.方法 在文献报道基础上,应用仿生学原理,结合具体实验条件,自行设计制作离体眼球表面灌流系统.选取8只经检测未发生损伤的离体兔眼置于IESS中,在不同时间点对离体眼球进行角膜混浊度、荧光素滞留度、角膜水肿率和病理组织学改变进行检测,从而评价IESS的功能.以上实验间隔1周进行1次,共进行3次.结果 成功设计制作了具有自主知识产权的IESS.3组评价试验中,离体眼球角膜混浊度评分分别为0.00±0.00、0.01±0.03和0.00±0.01;荧光素滞留度评分分别为0.03±0.09、0.00±0.00和0.03±0.09;角膜水肿率分别为(2.06±1.63)%、(2.83±1.93)%和(2.03±1.19)%,以上指标均在允许范围内,并未见明显的角膜病理组织学损伤.IESS工作稳定性良好,3组实验间各指标差异无统计学意义(P＞ 0.05).结论 IESS可以维持离体眼球在实验期间的正常形态,且具有较高的稳定性和可靠性,可以用于试验用离体眼球的短期保存.     

刺五加、葡萄籽提取物方剂对衰老模型小鼠肝脏细胞凋亡及氧化应激的影响

目的研究刺五加、葡萄籽提取物方剂对衰老模型小鼠肝脏细胞凋亡及氧化应激的影响。方法SPF级昆明种雄性小鼠50只,随机分1组阴性对照组(10只)和4组D-半乳糖模型组(每组各10只),模型组以1ml/(kg.bw)的剂量连续腹腔注射150mg/(kg.bw)的D-半乳糖2个月后,分为模型对照组和刺五加、葡萄籽提取物方剂低、中、高3个剂量组。各剂量组灌胃分别给予0.16、0.33、1.00g/(kg.bw)的刺五加、葡萄籽提取物方剂,模型对照组灌胃给予相应体积的纯净水,同时各组腹腔注射150mg/(kg.bw)的D-半乳糖,连续60d后取肝脏。通过AnnexinV/PI联合标记染色肝细胞,以流式细胞仪在Ex=488nm条件下,CellQuest软件分析肝细胞凋亡率;同时以分光光度法检测肝脏氧化应激状态。结果在Contourplot图上,根据肝细胞标记染料AnnexinV/PI的强度可见,中、高剂量组肝细胞凋亡百分率分别为(30.94±7.59)%、(29.35±5.58)%,均低于模型对照组[(47.99±11.95)%](P<0.01)。中、高剂量组MDA含量[(1.64±1.30)、(1.57±1.72)nmol/mg]均低于模型对照组[(3.92±0.73)nmol/mg](P<0.01);中、高剂量组SOD活性[(162.92±18.04)、(175.53±24.65)NU/mg]均高于模型对照组[(135.77±29.16)NU/mg](P<0.05);而各剂量组GSH-Px活性与模型对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论刺五加、葡萄籽提取物方剂可减少衰老模型小鼠肝细胞凋亡的发生,通过降低MDA含量和升高SOD活性增加机体对氧化应激反应的能力。     

CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术检测研究

目的探索CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术自动化检测方法。方法采用-85℃甲醇固定细胞,CD71荧光抗体和PI染色,以伯氏疟原虫感染小鼠血细胞为微核模式生物调校流式细胞仪,建立微核流式细胞术检测方法,并对秋水仙素(COL)诱导的小鼠外周血含微核网织红细胞进行了检测。结果所建立的方法能明确分辨外周血含与不含微核的网织红细胞和成熟红细胞,COL处理小鼠的外周血含微核网织红细胞率呈明显的剂量依赖性升高,流式细胞术与显微镜检测的外周血含微核网织红细胞率有良好相关性(r=098)。结论微核流式细胞术检测方法能准确地检测小鼠外周血含微核网织红细胞。     

镉染毒小鼠网织红细胞微核流式细胞术研究

目的通过流式细胞术(FCM)检测外周血微核方法，研究氯化镉(CdCl2)染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率，评价流式细胞术在微核检测中的应用价值及探讨氯化镉的致突变作用。方法采用转铁蛋白受体CD71荧光抗体和碘化丙啶(PI)染色，并以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核模式生物调校流式细肛仪．检测10～60mg／kg环磷酰胺染毒和50～400μg／kg氯化镉染毒对小鼠的外周血含微核网织红细胞率的变化。结果不同剂量环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率和骨髓含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠，且二者之间相关性良好(r=0．955)；不同剂量氯化镉染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率未见明显升高。结论FCM测定外周血含微核网织红细胞率可替代传统显微镜检查骨髓含微核网织红细胞率用于遗传毒性评价；在本研究条件下未观察到氯化镉有明显的诱导小鼠外周血含微核网织红细胞形成的作用。     

CD69+/NKG2D+比值在保健食品评价中应用

目的研究小鼠外周血自然杀伤细胞(NK)细胞分化抗原CD 69+/NKG2D+检测在保健食品免疫调节作用评价中的应用.方法以左旋咪唑25mg(kg·bw)连续灌胃3 d设立左旋咪唑阳性对照;进行小鼠外周血自然杀伤细胞(NK)亚群CD69+/NKG2D+检测和脾NK细胞活性测定试验,观察0.83,1.67g/(kg·bw)剂量组蛋白粉对小鼠NK细胞免疫功能的影响.结果与阴性对照组比较,左旋咪唑对照组和0.83,1.67g/(kg·bw)剂量组蛋白粉剂量组外周血NK细胞CD69-/NKG2D+、CD69+/NKG2D+比值以及脾NK细胞活性均明显升高.结论外周血NK细胞CD69+/NKG2D+检测与传统的NK细胞免疫检测结果有较好一致性,且方法敏感性较好,在保健食品免疫调节功能评价中有较好应用价值.     

非整倍体毒剂和染色体断裂剂的FCM微核检测区分方法研究

目的研究流式细胞术（flow cytometry，FCM）微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法。方法采用CD71荧光抗体和碘丙啶（PI）双染色，通过FCM检测环磷酰胺（CP）和秋水仙素（COL）诱导的NIH小鼠外周血含微核网织红细胞的PI荧光强度，比较它们与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值，以探索通过FCM微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法。结果染色体断裂剂CP诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较低，非整倍体毒剂COL诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较高，两者间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论通过FCM检测微核PI染色强度，可初步判断诱导微核形成的因素是否具有染色体断裂剂和非整倍体毒剂毒性。