食品中诺如病毒RT-PCR检测技术研究进展

诺如病毒(Norovirus,NoV)是急性胃肠炎暴发的重要病原,其特殊的生物学特性容易引起食品的污染。对食品中NoV的准确检测能为诺如病毒胃肠炎防控提供科学依据。反转录(RT)-PCR技术是目前食品NoV检测的主要方法,检测过程包括病毒富集、RNA提取、引物设计、RT-PCR反应、扩增产物鉴定共5个步骤,其中病毒富集是检测的关键及难点。影响食品中NoV的RT-PCR检测结果的因素较多,目前尚无一种标准的检验方法,因此有必要加快相关检验方法研究,建立高风险食品的病毒检测方法以指导实际工作。     

转基因食品及其快速筛选方法

转基因食品〔1～ 3〕,美国食品药品管理局 (ＦＤＡ)使用生物工程食品 (ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄｆｏｏｄ)一词、欧洲使用“新型食品”(Ｎｏｖｅｌｆｏｏｄｓ)一词 ,把转基因食品包括在内 ,转基因食品 (Ｇｅ ｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｆｏｏｄｓ,ＧＭＯｓ)主要来自转基因作物 (Ｇｅｎｅｔｉ ｃａｌｌｙｍｉｏｄｉｆｉｅｄｃｒｏｐｓ) ,也可以来自转基因微生物或动物。转基因作物是指具有一个经非生殖方法插入的特异性ＤＮＡ结构的作物。运用生物技术 (包括转基因和基因重组 )制成的转基因食品可以具有更好的性状、口味、更高的…     

精安胶囊对大鼠精子质量的影响

目的 :探讨精安胶囊对大鼠精子质量的影响 ,为临床安全使用提供依据。　方法 :80只SD雄性大鼠 ,随机分为低剂量组 ( 5 5 7 1mg/kg) ,中剂量组 ( 5 5 71mg/kg) ,高剂量组 ( 114 2 0mg/kg)和阴性对照组 ( 2 0g/L淀粉 )共 4组 ,每组 2 0只 ,连续给药 6 0d后处死 ,取一侧附睾分析精子计数、活率和形态 ,实验数据运用方差、χ2 检验、Kruskal Wal lis检验进行统计学分析。　结果 :各剂量组精安胶囊对大鼠的精子密度、活率和形态有不同程度的影响。低剂量组精子密度显著增加 (P <0 .0 1) ,高剂量组精子密度和活率降低 ,且与阴性对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。低剂量组精子形态异常率降低 ,中、高剂量组升高 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。　结论 :低剂量精安胶囊可改善精子质量 ,高剂量精安胶囊可能对精子产生一定的损伤     

建立禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR检测方法

目的建立高致病性禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR方法。方法根据禽流感病毒(avian influenzavirus,AIV)HA-H7基因和HA-H9基因分别设计特异AIV H7和H9亚型特异荧光定量PCR引物和探针,优化反应体系和反应条件,分析该试剂的敏感性、特异性、重复性等。结果经优化反应体系和反应条件后,AIV H7试剂和AIV H9试剂的敏感性达到1×104.67EID50和1×103.80EID50水平,特异性与细胞培养敏感性类似;批内和批间精密度Ct值的CV值均远小于10%,可重复性良好。结论本项目研制的AIV H7和H9亚型的敏感性、特异性、重复性均好,适合在禽流感H7和H9亚型疫情和人类疑似禽流感病例中检测使用。     

单增李斯特菌检测基因芯片的研制与评价

目的 研制快速、特异、灵敏的检测单增李斯特菌的基因芯片.方法 选择gyrB、ISR、16S rRNA、23S rRNA、hlyA、iap和prfA作为单增李斯特菌的检测靶基因,研制一种Oligo探针基因芯片,对18个不同种属来源的已知参考生物样品进行检测和鉴定,并且采用对比试验、重复性试验、灵敏度试验和特异性试验对该芯片进行验证评估.结果 通过对比发现IDT合成的70 mer Oligo芯片探针在芯片打印与芯片检测两个方面较优.比较10、40和80 μmol/L 3个Oligo探针点样浓度,结果 显示10 μmol/L的探针点样浓度已能获得很好的芯片检测结果.单增李斯特菌检测芯片具有较好的重复性;样品检测绝对量下限为0.9 ng DNA左右.结论 Oligo基因芯片可以快速准确地检测单增李斯特菌.     

增城市农村饮用水安全工程水质卫生状况调查

为掌握增城市农村生活饮用水的卫生现状,分别于2012年枯水期(3-4月)和丰水期(7-8月)对该市全部20个农村饮用水安全工程的出厂水、末梢水进行检测和评价.结果显示,采用完全处理工艺的水厂有10间(占50％);其余10间水厂属小型集中式供水,均未对水源水进行消毒处理.共采集水样160件,合格51件,合格率为31.9％.丰、枯水期及出厂水与末梢水水样合格率间比较,差异均无统计学意义.经完全处理的水样合格率为63.8％(51/80),高于未处理水样[0％(0/80)],差异有统计学意义(P＜0.01).不合格指标合格率由高至低依次为氨氮(95.0％)＞浑浊度(91.3％)＞臭和味(89.4％)＞菌落总数(88.1％)＞肉眼可见物(87.5％)＞耐热大肠菌群(76.3％)＞总大肠菌群(75.0％)＞游离余氯(35.0％).提示增城市农村饮水安全工程水质水质卫生状况不容乐观.     

王老吉凉茶遗传毒性和致畸作用实验研究

目的观察王老吉凉茶浸膏的遗传毒性和致畸作用。方法小鼠骨髓微核实验和小鼠精子畸形实验均选取NIH种小鼠以2.5、5.0、10.0 g/（kg·bw）灌胃给予王老吉凉茶浸膏[折算生药剂量16.65、33.30、66.60 g/（kg·bw）],观察各组微核发生率和精子畸形发生率。Ames实验选用鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100和TA102菌株,实验剂量为5 000、1 000、200、40、8μg/皿王老吉凉茶浸膏（折算生药剂量33.30、6.66、1.33、0.27、0.05 mg/皿）,观察各菌株的回变菌落数。大鼠致畸实验选取SD种孕鼠在孕期第7～16天以1.63、3.25、6.50 g/（kg·bw）的王老吉凉茶浸膏[折算生药剂量10.86、21.65、43.29 g/（kg·bw）]经口灌胃,观察孕鼠的母体毒性和胎鼠的生长发育、骨骼、内脏畸形情况。大鼠致畸实验设阴性对照组,小鼠骨髓微核实验、小鼠精子畸形实验和Ames实验均设阳性对照组和阴性对照组。结果阴性对照组与王老吉凉茶浸膏各剂量组间的微核率（雄小鼠组分别为1.8‰、2.0‰、2.4‰、2.2‰;雌小鼠组分别为2.0‰、2.4‰、2.0‰、2.6‰）和精子畸形率（分别为17.2‰、14.8‰、18.0‰、19.0‰）,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。Ames试验王老吉凉茶浸膏各剂量组的回变菌落数均未超过阴性对照组自发回变菌落数的2倍,Ames实验结果为阴性。王老吉凉茶浸膏各剂量组对母鼠的体重增长、活胎率、死胎率、吸收胎率与阴性对照组相比,差异均未见统计学意义（均P〉0.05）。王老吉凉茶浸膏各剂量组对胎鼠的平均体重、平均身长、平均尾长和骨骼畸形发生率与阴性对照组相比,差异亦未见统计学意义（均P〉0.05）,胎鼠外观、内脏检查均未发现畸形,致畸实验结果为阴性。结论在本实验条件和剂量范围内,未观察到王老吉凉茶遗传毒性和致畸作用。     

三氯化磷对肺巨噬细胞毒作用的研究

本文试图用整体吸入染毒法分析肺灌洗液中肺巨噬细胞的数量、死亡率和非细胞成分的变化,以评价低浓度三氯化磷(PCl_3)对肺细胞毒作用。实验证明PCl_3一次急性吸入890.59mg/m~3(高毒组),以上指标均有明显改变,井出现在病理改变之前,反映低浓度PCl_3对肺细胞有轻度毒作用,认为此方法比短期体外试验法更能反映毒物对机体的作用。     

壳聚糖延缓衰老作用的实验研究

为探讨壳聚糖在延缓衰老功能方面的作用,以Oregon K黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)和20月龄SD雄性大鼠为研究对象,观察壳聚糖对果蝇生存时间及对大鼠血清中SOD活性、MDA含量的影响.结果发现,雌雄果蝇各剂量组的最高寿命天数均明显增高(p<0.01),雌性果蝇0.015%、0.045%、0.135%剂量组平均寿命天数较对照组延长(p<0.05),且半数死亡时间分别比对照组延长2天、8天和18天.SD大鼠血清中SOD活性升高,MDA含量下降(p<0.05).壳聚糖具有延缓衰老功能,且作用机理与其能减少机体内氧自由基水平有关.     

免疫组化技术在肾上腺皮质激素生物合成酶研究的应用

免疫组化技术在肾上腺皮质激素生物合成酶研究的应用杨杏芬，钟小明，何玉莺肾上腺皮质是类固醇激素合成代谢的主要场所，其细胞微粒体内的细胞色素Ｐ４５０－１７ａ羟化酶（以下简称１７α羟化酶）是类固醇激素体内合成过程的重要酶类。它是肾上腺皮质细胞微粒体内的一种...