人外周静脉血血清蛋白质双向凝胶电泳条件优化

目的优化人外周静脉血血清蛋白质的双向凝胶电泳条件。方法血清总蛋白经去除白蛋白、IgG和丙酮沉淀去盐分处理后,固相pH梯度等电聚焦(IEF)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)进行蛋白质电泳,对蛋白质的上样量、固相pH梯度(IPG)胶条的pH值范围、凝胶浓度、水化上样液体积和IEF程序及其参数等条件进行优化。结果将50～100μg蛋白质溶解于终体积为350μl水化上样液,应用pH4～7的IPG胶条和浓度12%的SDS-PAGE凝胶进行双向电泳,经优化电泳电流、时间等参数后,建立了合适的双向凝胶电泳条件,得到比较理想的蛋白质二维图谱。结论优化了血清蛋白质双向凝胶电泳条件,为进一步开展血清差异蛋白质组学研究奠定基础。     

广东省援川抗震救灾卫生防疫工作纪实

"5·12"四川汶川大地震发生后.按照广东省卫生厅的统一部署,于2008年5月14日下午派出了由广东省疾病预防控制中心(简称疾控中心)和广州市、深圳市、珠海市疾病预防控制中心组成的第一批卫生防疫队(包括37名防疫人员、7辆防疫车).     

应用流式细胞术研究大蒜粉对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的建立流式细胞术检测小鼠巨噬细胞吞噬功能的方法,探讨其在保健食品增强免疫力功能评价中的意义。方法昆明种小鼠随机分为4组,其中3组分别按0.11、0.22、0.66 g/(kg.BW)低、中、高3个剂量的大蒜粉片灌胃,阴性对照组给予纯净水,连续30 d后,分离小鼠腹腔巨噬细胞,与调理后的荧光微球孵育后,用流式细胞仪检测FITC荧光阳性巨噬细胞数来计算巨噬细胞吞噬率,观察大蒜粉对腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球功能的影响,同时用ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验及小鼠迟发型变态反应试验观察大蒜粉对小鼠细胞免疫功能的影响。结果用荧光微球技术结合流式细胞仪检测实验组和对照组的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球功能,结果显示,实验组(大蒜粉)能明显提高小鼠巨噬细胞吞噬功能,其低、中、高3个剂量组吞噬百分率分别为(24.42±4.10)%、(23.82±4.55)%、(29.55±5.81)%,吞噬指数分别为0.36±0.07、0.35±0.08、0.47±0.11,均高于阴性对照组[(17.32±4.80)%,0.24±0.07](P<0.01);各剂量组迟发型变态反应能力均升高,低剂量组淋巴细胞转化值增高,均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论流式细胞仪检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的方法具有简便、快捷、重复性好以及准确率高的特点,适合在保健食品增强免疫力功能评价中推广应用。     

氢醌/Cu2+对小鼠骨髓细胞线粒体氧化损伤的研究

目的 研究在Cu^2 存在的条件下,氢醌（HQ）对小鼠骨髓细胞线粒体的氧化损伤。方法 染毒：（1）在1μmol/LCu^2 存在的条件下,小鼠骨髓细胞用0、10、20和40μmol/LHQ染毒30min;（2）1μmol/LCu^2 存在的条件下,20μmol/LHQ染毒30、60、120min。观察骨髓细胞死亡率（CDR）、活性氧（ROD）生成、线粒体酶活力和线粒体电位（MMP）的改变。结果 在1μmol/LCu^2 存在的条件,HQ正最低剂量组（10μmol/L)和最染毒时间（30min,20μmol/L）即表现出ROS生成增加（为对照组的374％和541％）、CDR增加（为对照组的115％和117％）、线粒体酶活力下降（为对照组的54％和30％）和存在剂量、时间的依赖关系（ROS：r=0.941,r=-0.981;CDR:r=0.886,r=0.886;线粒体酶活力：r=-0.842,r=-0.902;MMP：r=-0.844,r=-0.961),ROS生成与MMP、CDR和线粒体酶活力间相关密切（r分别为－0。902,0。943,－0。977）。结论 在Cu^2 存在的情况下,HQ可导致小鼠骨髓细胞线粒体氧化损伤。细胞内ROS生成增加致线粒体氧化损伤可能是HQ诱导小鼠骨髓细胞毒性的重要途径之一。     

不同采样时间小鼠网织红细胞微核率变化的流式细胞术研究

目的：应用流式细胞术研究两次给药后不同采样时间小鼠外周血网织红细胞微核率的变化，探讨流式细胞术检测微核方法的应用性。方法：NIH小鼠两次腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide，CP)40mg／kg BW(两次给药间隔24h)，于第二次给药后6、12、18、24、30、36、48h和72h采外周血-85℃甲醇固定、PI和CD71染色进行流式细胞术检测，每个样本分析10000个网织细胞，同时进行外周血涂片，Giemsa染色显微镜检测，每个样本分析1000个网织红细胞。结果：两次CP给药后6h即可观察到网织红细胞微核率增高，分别在两次给药后24h达到高峰，此后逐渐下降。应用流式细胞术检测外周血网织红细胞微核与外周血涂片显微镜检测敏感性相同，两者并具有良好的相关性。流式细胞术检测方法具有高通量、省时、省力等优势。结论：在检测化合物遗传毒性方面，流式细胞术检测方法值得推广应用。     

广东省农村首例人禽流感H5N1病例的流行病学分析

目的 确定人感染高致病性禽流感疫情,查明感染来源,以采取相应措施控制疫情.方法 采用现场流行病学调查和实验室检测相结合的方法 对广东省海丰县1 例不明原因肺炎病例进行诊断和分析.结果 该患者女性,44岁,于2008年2月16日开始发病,病初表现为流感样症状,持续发热,1周内胸片出现两肺大片浸润阴影,病情进展迅速,抗生素治疗无效,全身多器官功能衰竭,于2月25日死亡.患者痰液标本禽流感病毒(H5N1)核酸阳性,病毒分离阳性,基因序列分析显示,分离的H5N1病毒 [A/Guangdong/1/ 2008(H5N1)]仍为禽源性特征.患者居住广东省海丰县海城镇某村,发病前后未离开过居住地,未接触过类似病人.海丰县是候鸟迁徙栖息地,2004年曾发生禽流感疫情.患者发病前1周曾接触与进食自养的病死鸡.病家附近见有水鸟(麻雀和白鹭)活动.经医学观察8 d,所有密切接触者(包括患者的丈夫共91人)均未出现类似症状.参照卫生部<人感染高致病性禽流感应急预案>,采取一系列控制措施后,疫情没有扩散.结论 该病例确诊为广东省农村首例人感染高致病性禽流感病例,感染来源可能是禽流感病毒(H5N1)从病死禽直接传给人,但未发现人传人的现象.今后应继续加强不明原因肺炎监测,加强人感染高致病性禽流感的应急贮备、培训和健康教育.     

液相色谱法快速分析奶粉及液态奶中三聚氰胺

目的建立奶粉及液态奶中三聚氰胺的液相色谱快速测定方法。方法以20％甲醇＋1％三氯乙酸为提取溶液,同时沉淀蛋白质等有机物,旋涡震荡混匀后,于30℃水溶中超声提取,在4℃下以4000r／min超速离心后取上清液经0．45μm滤膜过滤后上机测定;采用10mmol／L己烷磺酸钠＋10mmol／L柠檬酸：乙腈（92：8）为流动相,Agilent TC—C18柱（4．0nm×250mm,5μm）,235nm检测波长,根据保留时间和紫外光谱定性,峰面积定量。结果采用上述提取方式,在给定的色谱条件下,样品液中三聚氰胺与样液基质达到基线分离,精密度试验相对标准偏差〈5％。方法在0．500—100μg／mL范围内线性良好,相关系数为0．9995,在不同奶粉中加标回收率范围81．2％～112．1％。采用本方法测定奶粉和液态奶的检出限分别为2mg／kg和0．5mg／kg。结论应用液相色谱法二极管阵列检测器（LC—DAD）同时进行奶粉和液态奶中三聚氰胺的定性定量分析,样品处理简便快速,检测结果准确可靠,适用于基层检验室开展大批量样品的筛查监测。必要时可采用质谱（LC—MS／MS）进一步确认。     

广东省首例人高致病性禽流感病例病原体的分离与初步鉴定

人禽流感病是由甲型禽流感病毒（AIV）某些亚型的毒株感染人引起的急性呼吸道传染病。人高致病性禽流感病的潜伏期一般为1～3d，起病急，早期表现类似普通流感。主要症状为发热，伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和全身不适。2006年2月22号，广州市一家医院发现1名患者出现“流感样”症状．表现为发热、咳嗽和白细胞数降低等发热肺炎症状，3月3日因治疗无效死亡。     

二硫化碳慢性接触对儿茶酚胺类代谢的影响

采用综合累积暴露指数（ＩＣＥ），将工人接触ＣＳ２浓度和接触期限结合起来定量评价暴露强度，并检测尿中２－硫代噻唑烷－４－羧酸（ＴＴＣＡ）和儿茶酚胺类神经递质代谢产物的含量。结果显示：接触组尿中ＴＴＣＡ增高，存在剂量－效应关系；高接触组高香草酸（ＨＶＡ）和香草扁桃酸（ＶＭＡ）排泄减少。这两种儿茶酚胺代谢产物与ＣＳ２浓度及工龄虽未显示有显著意义的相关，但与ＩＣＥ及ＴＴＣＡ之间却呈现统计学上的相关关系，表明长期接触ＣＳ２对儿茶酚胺类神经递质代谢有一定的干扰作用。     

守宫木Sauropus androgynus毒理学安全性评价

目的 研究守宫木的急性及亚慢性、细胞、遗传及免疫毒性并对其作出安全性评价.方法 对守宫木进行小鼠急性经口、大鼠亚慢性经口、细胞、遗传及免疫毒性试验.结果 全成份鲜样匀浆、叶干粉LD50值＞21.5 g/kg,梗干粉小鼠LD50值雌性20 g/kg、雄性23.3 g/kg;大鼠亚慢性经口毒性试验中干粉无明显有害作用剂量(NOAEL)为2 000 mg/kg;较低剂量守宫木对细胞生长有抑制作用,较高剂量则出现细胞增殖现象;浓缩除菌滤液剂量相当于含鲜样6×102mg/mL时,染色体畸变急剧增加,剂量达1.2×103 mg/mL时,细胞全部死亡;守宫木提取物对BALB/C小鼠脾T、B淋巴细胞体外增殖功能以及肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFN-γ)细胞因子的分泌功能均呈抑制作用,而对腹腔巨噬细胞吞噬功能呈刺激性增强作用.结论 守宫木为低毒或无毒类物质,对大鼠无明显急性毒性、亚慢性毒性,对免疫系统有一定毒物兴奋效应.