布鲁氏菌病6种血清学检测方法的临床应用比较

目的了解荧光偏振试验(FPA)、虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、补体结合试验(CFT)、间接ELISA试验(i ELISA)、竞争ELISA试验(c ELISA)等6种血清学方法检测布鲁氏菌病的临床适用性。方法应用FPA、RBT、SAT、CFT、i ELISA、c ELISA对采集的321份牛血清样本进行布鲁氏菌病抗体检测。以c ELISA检测结果作为参考标准分别统计FPA、RBT、SAT、CFT、i ELISA的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果 321份样本中有26份为阳性,295份为阴性。FPA、RBT、SAT、CFT、i ELISA的敏感性分别为96.15%(25/26)、65.38%(17/26)、65.38%(17/26)、38.46%(10/26)、80.77%(21/26);特异性分别为100.00%(295/295)、100.00%(295/295)、99.66%(294/295)、100.00%(295/295)、100.00%(295/295)。FPA、RBT、SAT、i ELISA、c ELISA 5种方法间经两两比较,其检测阳性率无显著差异(P0.05),而CFT检测灵敏度明显低于i ELISA、FPA、c ELISA(P0.05)。结论 FPA具有较高的敏感性和特异性,FPA可用于布鲁氏菌病抗体临床检测。     

案例式问题导向学习法应用于超声诊断实践课程中的问题及改进方案

目的探讨问题导向学习法（PBL）结合案例法教学设计（CBT）应用于超声诊断实践课程中出现的问题以及改进方案。方法将超声诊断专业实践见习组中39名学生平均分为3组进行案例式PBL教学,教学后收集学生、授课教师及教学督导的反馈意见。结果本次教学设计存在问题：①超声图像分析时间安排较少;②内容安排未特定针对超声诊断专业;③讨论内容未突出超声专业的侧重点;④选用的超声声像图数量少,缺乏正常对照图及疾病鉴别诊断图;⑤选题难度大,学生诊断正确率仅为5．13％（2／39）;⑥部分学生对课堂随意抽问感到不安。改进对策：①阅读及分析超声图像的时间增加至讨论学时的40％;②将超声图像分析放在分组讨论的前两项;③带教老师应引导学生将讨论重点放在阅读超声声像图、识别异常表现上;④增加正常的以及相关鉴别诊断的声像图;⑤选择浅显易懂、易于掌握的典型病例;⑥课前给予学生更多准备时间并进行相应指导,课中尽可能减少抽问。结论改进后的案例式PBL教学方案将更适合超声诊断专业的实践教学。     

斑点追踪技术在主动脉瓣狭窄中的临床应用价值

近年来,主动脉瓣疾病(aortic valve disease,AVD)的患病率逐年升高,其中主动脉瓣狭窄(aortic stenosis,AS)是最常见的瓣膜性心脏病,北美和欧洲的一项调查显示75岁以上老年人AS患病率高达12.4%,而AS也是心衰以及心源性猝死最常见的原因之一[1]。AS患者心肌受损与长期左心室射血压力超负荷有关,心肌供血的相对不足以及心肌的纤维化导致心功能下降,最终发生心力衰竭甚至猝死[2]。     

新型载氧超声微泡的制备及其基本特性研究

目的制备一种新型的载氧脂质微泡并考察其基本特性。方法采用机械振荡法制备高效载氧的脂质微泡,考察微泡形态、浓度、平均粒径和zeta电位情况,并观察其随时间变化及经60Co射线灭菌后情况。将微泡加入缺氧溶液,比较超声辐照前后(5 kHz、3.5 W)溶液中溶解氧浓度(dissolved oxygen,DO)的变化,并评价微泡增强兔肝超声显影的效果。结果自制载氧脂质微泡平均粒径约为(959.7±161.2)nm,粒径分布均匀,浓度约为(4.01±0.69)×109/mL,zeta电位为-(12.9±2.4)mV;在观察时间内(7 d)及60Co射线灭菌前后,微泡形态,粒径大小、浓度及zeta电位无明显变化(P>0.05);经超声辐照后,缺氧溶液溶解氧浓度明显升高;载氧脂质微泡可明显增强兔肝实质超声显影。结论自制载氧脂质微泡性能稳定,具有较好的携氧、释氧能力,并可作为一种新型的理想超声造影剂。     

载氧脂质微泡体外释氧效果

目的评价载氧脂质微泡在缺氧溶液及离体静脉血中的释氧能力,观察超声辐照对微泡释氧量的影响。方法制备载氧脂质微泡,放置不同时间后(0.5、3.0、24.0h),检测微泡在极度缺氧溶液(0.4mg/L)中释氧量的改变;观察超声辐照条件下中度缺氧溶液溶解氧浓度(DO)值的变化;将载氧脂质微泡与离体静脉血混合后,检测静脉血p(O2)值的变化。结果载氧脂质微泡放置不同时间(0.5、3.0、24.0h)后释氧能力无明显改变(P>0.05);超声辐照能显著增加微泡的释氧量(P<0.05);载氧脂质微泡可有效增加离体静脉血p(O2)(P<0.05)。结论载氧脂质微泡能稳定载氧达24.0h;超声辐照下,微泡的释氧量明显增加;载氧脂质微泡能显著增加离体血p(O2),有望成为一种血浆代用品。     

IR780-VPN靶向纳米粒的制备及其对肾母细胞瘤的抑制作用

目的制备同时携带IR780碘化物和硫酸长春新碱（VCR）的聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）靶向纳米粒（IR780-VPN）,并观察其在体外对肾母细胞瘤（SK-NEP1）的靶向作用及抗肾母细胞瘤增殖效率。 方法制备IR780-VPN,检测其基本理化特性,培养SK-NEP1细胞作为体外肿瘤细胞模型,研究IR780-VPN的体外靶向性,观察以下6组的体外抗SK-NEP1细胞增殖效率：A组,PBS（对照组）;B组,游离VCR;C组,空白纳米粒（PN）;D组,载VCR纳米粒（VPN）;E组,载IR780纳米粒（IR780-PN）;F组,IR780-VPN。 结果制备出的IR780-VPN平均粒径为（290.82±3.22）nm,粒径的分散指数（PDI）为0.024,平均Zeta电位为（1.16±0.87）mV。用细胞膜绿色荧光探针染色后于倒置荧光显微镜下观察,IR780-VPN大小均匀、形态规则,无聚集、粘连;透射电镜下观察IR780-VPN为球形或类球形,表面光滑,粒径分布均匀。其平均包封率为72.80%,平均载药量为2.80%,平均连靶率为91.30%。体外寻靶实验中可见SK-NEP1细胞表面有大量的IR780-VPN聚集。体外抗SK-NEP1细胞增殖实验证实,在相同药物质量浓度条件下,IR780-VPN组较VCR、VPN组的体外抗肿瘤细胞增殖效率高（P均<0.001）,且游离VCR、VPN、IR780-VPN对SK-NEP1细胞增殖的抑制率具有浓度依赖性,药物质量浓度越大,对细胞的抑制作用越强（F=13254.105、54354.510、1370.059,P均<0.001）;而随着药物质量浓度增加,PN、IR780-PN组的细胞增殖抑制率差异均无统计学意义（P均>0.05）,PBS（对照组）对SK-NEP1细胞增殖的抑制率为（2.83±0.32）%。 结论本实验成功制备了性质稳定的靶向IR780-VPN,对肾母细胞瘤细胞有良好的的靶向性,并提高了体外抗肾母细胞瘤增殖效率,为体内的肿瘤分子靶向研究提供了实验基础。     

医药企业道德战略分析

目的 :从战略层面探讨医药企业的道德行为。方法 :以一个博弈模型为例进行分析 ,引出医药企业的道德困惑 ,并对该博弈模型进行战略性反思。结果与结论 :给出医药企业的道德战略对策     

四腔心切面及三血管气管切面在中孕早期胎儿心脏快速筛查中的应用

目的 探讨四腔心切面及三血管气管切面在中孕早期胎儿心脏快速筛查中的应用价值。方法 回顾性分析重庆市人口和计划生育科学技术研究院附属医院2010年1月至2014年12月25 463例14～18周胎儿心脏超声检查结果。结果 共检出胎儿心脏异常51例：单心室和/或单心房15例,永存动脉干6例,大动脉转位5例,右位主动脉弓9例,右室双出口8例,主动脉弓离断1例,法洛四联症4例,永存左上腔静脉3例;误诊1例主动脉明显狭窄为永存动脉干,漏诊2例轻型法洛四联症及8例室间隔缺损。结论 四腔心切面及三血管气管切面在中孕早期胎儿心脏筛查中可以为心脏重大畸形提供重要线索。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β—内酰胺酶基因分型的初步研究

[目的]超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是一种新的β-内酰胺酶(BIA)，主要产生于大肠埃希菌和克雷伯菌属，能水解三代头孢菌素和单环酰酶类，并被BIA抑制剂所抑制，ESBLs的产生和播散给临床感染的治疗带来极大挑战，质粒介导的。ESBLs已发现110多种，根据亚型编码基因同源性不同分为TEM、SHV和非TEM非SHV三类，其中以TEM和SHV型最多见，多由经典TEM-1、TEM-2和SHV-1发生点突变而来，编码基因中数个位点，各地区流行的ESBLs亚型各不相同，我们对江西南昌地区2001．9—2002．5临床分离的34株表型为产。ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌分别用TEM、SHV和CTX—M型。ESBLs特定引物进行PCR扩增电泳分析。[方法]细菌质粒DNA提取与PCR扩增：采用碱裂解法提取质粒DNA行PCR扩增引物，按有关文献进行，设大肠埃希菌ATCC25922标准产酶大肠埃希菌(TEM-10、TEM-12、TEM-29和SHV-1、SHV-7、CTX—M—3)为对照，DNA电泳分析：按有关文献进行，采用1％琼脂糖凝胶电泳，电泳1～2h后，在紫外投射下观察。[结果]34株产ESBLs的菌株经质粒DNA提取，行电泳分析显示菌株均存在阳性条带，再用三种特定引物分别行质粒DNA耐药基因PCR扩增，结果TEM型引物内扩增阳性为26株，CTX—M型引物扩增阳性4株，而SHV型引物则无1例出现阳性，另4株使用三种引物行PCR扩增得未到阳性结果。文献报道，大肠埃希菌产ESBLs的亚型以TEM型为主，肺炎克雷伯菌则以。TEM、SHV型兼有，我们认为未发现SHV型可能与本次分离到的实验菌株以大肠埃希菌为主有关。有4株用三种引物扩增耐药基因未能获得阳性结果，可能还存在其他亚型的ESBLs耐药基因，也不捧除这4株是表型确证法检测中出现的假阳性株。[结论]本研究未能对扩增耐药基因作进一步基因测序研究，因此，不能确定耐药基因亚型的具体型号和深入分析。     

超声造影剂对犬缺血再灌注心肌的靶向显像及其机制研究

目的用自制的靶向超声造影剂实现无创性地评价犬心肌缺血再灌注,同时研究其靶向性作用机制。方法将自行研制的表面活性剂超声造影剂“表活显”(surfactantfluorocarbon-filledmicrobubbles,SFCMB)与磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)结合,制备成靶向超声造影剂(SFCMB-PS),在实时心肌超声造影(MCE)条件下,用SFCMB-PS对犬心肌缺血再灌注模型进行延迟心肌显像。流式细胞术测定白细胞激活前和激活后与SFCMB-PS的结合情况以及在补体和β2整合素中的Mac-1缺乏时激活的白细胞与SFCMB-PS的结合情况。结果延迟心肌显像表明缺血再灌注区的造影剂回声较正常区的回声明显增强。流式细胞术证明了PS结合在造影剂微泡的表面,未激活的白细胞与微泡的结合率为(5.27±0.75)%,激活的白细胞与微泡的结合率为(39.67±6.83)%,结合率明显提高(P<0.01);补体和β2整合素中的Mac-1缺乏时,两者的结合明显受到抑制,结合率降到(12.27±1.66)%(P<0.01)和(10.90±2.40)%(P<0.01)。结论SFCMB-PS可以无创性地评价缺血再灌注损伤心肌的部位及其严重程度。SFCMB-PS是通过β2整合素中的Mac-1和补体介导途径与激活的白细胞结合并进入细胞内的。