miR-449a/b负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖

摘要：目的 探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法 采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中,qRT-PCR验证转染成功后,通过CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡的变化,细胞划痕实验检测胃癌细胞的迁移能力,Western blot方法检测miR-449a/b上调后其靶基因蛋白的表达水平;并通过转染E2F1过表达质粒和空质粒对照入胃癌细胞BGC-823,Western blot确定转染效率后,分别用qRT-PCR和数字PCR检测miR-449a/b的表达水平。结果 相比于正常胃粘膜细胞株GES-1,miR-449a/b在胃癌细胞株BGC-823中表达均下调（P<0.01）;过表达miR-449a/b可抑制胃癌细胞BGC-823增殖和迁移,并促进其凋亡（P<0.05）;过表达的E2F1可上调miR-449a/b的表达（P<0.001）,而上调miR-449a/b的表达,其直接靶基因CDK4、CDK6表达下调,并可通过CDKs-pRb-E2F1信号通路,间接下调E2F1蛋白的表达（P<0.01）。结论 miR-449a/b的低表达和E2F1的高表达均参与了胃癌的发生、发展,并且miR-449a/b能负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖。     

基于RhoA/ROCK-1通路研究针刺干预SHR脑保护作用机制

[目的] 明确自发性高血压大鼠（SHR）脑损害与RhoA、ROCK-1的相关性,探讨针刺干预SHR脑保护的Rho通路机制。[方法] 将SHR随机分为模型对照组、太冲穴组,WKY大鼠设为正常对照组。太冲穴组针刺干预4周,其余两组在干预期内给予相同程度、相同时长的抓取。观测各组大鼠收缩压、舒张压、平均动脉压的改变;苏木精-伊红（HE）染色观察脑组织形态学改变;蛋白免疫印迹（Western blot）法测定各组大鼠脑组织中RhoA、ROCK-1的表达水平。[结果] 在干预周期内,正常对照组收缩压、舒张压、平均压均处于正常血压范围内。与正常对照组比较,模型对照组收缩压、舒张压、平均压均较高,且有随着周龄增加而增高的趋势。与模型对照组相比,太冲穴组可有效降低收缩压,有降低舒张压、平均压的趋势。模型对照组较正常对照组脑组织细胞排列紊乱,细胞坏死及间质水肿程度加重,RhoA、ROCK-1表达升高;太冲穴组与模型对照组比较,脑细胞排列规则,细胞坏死及间质水肿消失,RhoA、ROCK-1表达下降。[结论] 针刺太冲穴能有效降低SHR血压,改善脑损害,其机制可能与抑制RhoA/ROCK-1信号通路表达相关。     

泛耐药鲍曼不动杆菌对消毒剂抗药性分析

目的探讨泛耐药鲍曼不动杆菌（PDR—AB）对普通消毒剂的抗药性。方法应用K-B法进行抗菌药物敏感性试验,筛选出鲍曼不动杆菌泛耐药菌株5株,采用纸片法和肉汤培养进行消毒剂敏感试验。结果泛耐药鲍曼不动杆菌对0．5％聚维酮碘（PVP．I）、0．1％醋酸氯己定溶液（洗必泰）、即配0．2％三氯异氰尿酸、2％强化戊二醛（浸泡）敏感性好,而对75％乙醇、0．1％-氧化氯、0．1％PVP-I和配制30min后0．2％三氯异氰尿酸等不敏感。结论0．5％PVP-I、0．1％醋酸氯己定溶液、即配0．2％三氯异氰尿酸、2％强化戊二醛（浸泡）对PDR-AB具有良好的杀灭效果,推荐采用;而低浓度含碘、含氯消毒剂以及75％乙醇效果差,不宜采用。     

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目的评价髁状突骨折手术治疗的临床效果。方法选择2009---2013年在大连市中心医院口腔颌面外科收治的髁状突骨折患者56例（64侧）,根据骨折位置不同分别采用耳屏前入路（19侧）、经颌后切口穿腮腺入路（23侧）和颌后颌下入路（22侧）进行手术治疗,观察其临床效果和术后并发症发生情况。结果3种手术入路治疗髁状突骨折总体临床效果满意,但部分病例合并面神经损伤、张口受限、咬合错乱、髁状突吸收、皮下积液等并发症。结论髁头骨折可采用耳屏前入路;髁颈部骨折可采用经颌后切口穿腮腺入路;髁颈下骨折可采用颌后颌下入路。髁头骨折一般采用1—2枚侧向拉力螺钉固定;髁颈和髁颈下骨折可采用1～2枚微型钛板坚固内固定,但有1枚钛板必须沿张力带放置。     

基于RhoA/ROCK-1通路研究针刺干预SHR脑保护作用机制

[目的]明确自发性高血压大鼠(SHR)脑损害与RhoA、ROCK-1的相关性,探讨针刺干预SHR脑保护的Rho通路机制。[方法]将SHR随机分为模型对照组、太冲穴组,WKY大鼠设为正常对照组。太冲穴组针刺干预4周,其余两组在干预期内给予相同程度、相同时长的抓取。观测各组大鼠收缩压、舒张压、平均动脉压的改变;苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织形态学改变;蛋白免疫印迹(Western blot)法测定各组大鼠脑组织中RhoA、ROCK-1的表达水平。[结果]在干预周期内,正常对照组收缩压、舒张压、平均压均处于正常血压范围内。与正常对照组比较,模型对照组收缩压、舒张压、平均压均较高,且有随着周龄增加而增高的趋势。与模型对照组相比,太冲穴组可有效降低收缩压,有降低舒张压、平均压的趋势。模型对照组较正常对照组脑组织细胞排列紊乱,细胞坏死及间质水肿程度加重,RhoA、ROCK-1表达升高;太冲穴组与模型对照组比较,脑细胞排列规则,细胞坏死及间质水肿消失,RhoA、ROCK-1表达下降。[结论]针刺太冲穴能有效降低SHR血压,改善脑损害,其机制可能与抑制RhoA/ROCK-1信号通路表达相关。     

血NLR、β2-MG和Cys-C对初诊多发性骨髓瘤患者合并肾损伤的预测价值

目的探讨血中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio, NLR)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin, β2-MG)及胱抑素C(cystatin C, Cys-C)对初诊多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)患者合并肾损伤(renal impairment, RI)的预测价值。方法回顾性分析2013年1月至2020年12月烟台市烟台山医院收治的初诊为MM的患者97例, 按照血肌酐水平将MM患者分为RI组(22例)(血肌酐>176.80 mmol/L)及非RI组(75例)(血肌酐≤176.80 mmol/L)。对比分析RI组和非RI组临床分型及实验室指标。采用Logistic回归法分析MM发生RI的危险因素, 应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)评估各危险因素对MM患者发生RI的预测价值。结果 97例初诊MM患者发生RI者占22.70%, RI组轻链型比例最高, 比例最低者为免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)G-κ...     

烟台地区汉族人群HLA-Ⅱ类基因区五个基因位点多态性分析

目的探讨烟台地区汉族人群人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)-DPA1、-DPB1、-DQA1、-DQB1、-DRB1五个位点基因分布多态性及基因型。方法收集2020年6月至2020年12月烟台市中心血站检测合格的汉族无偿献血者外周血样本135例, 利用下一代测序(next-generation sequencing, NGS)技术对入组人群进行HLA-DPA1、-DPB1、-DQA1、-DQB1、-DRB1五个位点基因检测和基因型分析, 统计分析HLA-DPA1、-DPB1、-DQA1、-DQB1、-DRB1基因频率特点, 并与其它地区人群基因分布进行比较。结果在HLA-DRB1、DQA1、DQB1、DPA1、DPB1五个位点检出分布频率最高的等位基因分别是DRB1*09:01、DQA1*01:02、DQB1*03:01、DPA1*02:02、DPB1*05:01; 五个位点等位基因中, 发现98种HLA-DRB1基因型, 频率高于1.48%的有7种;66种HLA-DQB1基因型, 频率高于1.48%的有14种;68种HLA-DQA1基因型, 频...     

经穴效应特异性研究进展

经穴特异性理论是针灸传统经典理论,它既是经络理论研究的切入点,也是指导临床合理用穴以提高疗效的关键所在。经穴是经脉上特定的点,是脏腑经络气血转输出入的特殊部位,经穴与非经穴效应不同,本经穴与他经穴疗效迥异,同一经脉中的特定穴与非特定穴效应有别,加强对经穴效应特异性的研究对促进针灸学的现代化、国际化具有重要的科学意义。     

3株弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系的鉴定与临床病理相关分析

目的鉴定OCI-Ly1、OCI-Ly8、OCI-Ly103株弥漫大B细胞（diffuselargeB-celllymphoma,DLBCL）,并进行分子亚类分型及临床病理相关分析。方法采用细胞块切片HE染色观察细胞形态,运用CD3、CD20、CD10、Bcl-6、MUM-1抗体进行免疫标记确定其分子亚类;MTT法测定细胞的增殖活力。结果 OCI-Ly1和OCI-Ly8细胞形态以中心母细胞为主,OCI-Ly10以免疫母细胞为主。3株细胞CD20和CD10均弥漫阳性,CD3阴性。OCI-Ly1个别细胞Bcl-6阳性,MUM-1阴性;OCI-Ly8细胞Bcl-6、MUM-1均阴性;OCI-Ly10个别细胞Bcl-6阳性,MUM-1散在或簇状阳性,CD10和MUM-1的表达具有互补现象,在36例DLBCL临床病理标本中发现有7例（19%）CD10和MUM-1表达互补。OCI-Ly10增殖能力显著高于OCI-Ly1、OCI-Ly8（P〈0.001）。结论 OCI-Ly1和OCI-Ly8属于GCB型,OCI-Ly10属于NC型（non-classfied）;OCI-Ly10细胞系及组织标本CD10和MUM-1的表达互补现象有待进一步研究。     

miR-21在前列腺癌中的表达及抑制其表达对前列腺癌细胞增殖凋亡的影响

目的探讨抑制前列腺癌细胞中miR-21基因表达对癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 RTPCR检测前列腺癌及癌旁组织中miR-21基因的mRNA表达;空白对照组(Control)、阴性对照组(NC)和miR-21 inhibitor组转染人前列腺癌PC-3细胞,48 h后RT-PCR检测各组细胞中miR-21基因的mRNA表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测ki67、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达。结果前列腺癌组织中miR-21的mRNA表达显著高于癌旁组织(P0.01);转染miR-21 inhibitor后miR-21的表达显著降低;NC组细胞存活率、细胞凋亡率及ki67、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达与对照组,差异无统计学意义(P0.05),miR-21 inhibitor组细胞存活率及ki67、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达显著低于对照组,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著高于对照组(P0.01)。结论抑制前列腺癌细胞中miR-21基因的表达可降低癌细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。