中药石韦中黄酮类成分微乳薄层色谱分析研究

目的：探究微乳薄层色谱及其图像分析在中药石韦中的鉴别应用。方法：以传统有机相和SDS-正丁醇-正庚烷-水微乳液作为展开剂,通过普通硅胶G板,高效硅胶薄膜和聚酰胺薄层层析,分离鉴别了中药石韦中黄酮类化学成分,考察了提取溶剂、微乳液类型、改性剂等因素对分离效果的影响。结果：中药石韦的最佳提取溶剂为60％乙醇,最佳展开溶剂为含水量75％的微乳溶液,加0．8mL甲酸和0．2mL丙酮作为改性剂。结论：该法分离效果显著,实验时间短,灵敏度高,各类组分可同时分析鉴定,点样量小,斑点清晰,圆而集中,且不使用刺激性强的有机溶剂,为石韦的鉴别提供了一种简便、准确方法。     

人胆管癌裸鼠移植瘤模型的建立

目的：建立人胆管癌裸鼠移植瘤1号和2号模型。方法：将人胆管癌组织接种于裸鼠皮下和肝脏，逐代观察移植瘤的生长情况，绘制其生长曲线，进行形态学和生物学特性鉴定。结果：建立了人胆管高分化粘液腺癌裸鼠移植瘤1号和中分化乳头状腺癌裸鼠移植瘤2号模型。皮下移植瘤生长率为40％；1、2号模型移植成功率分别为97．7％和100％，潜伏期分别为26d和217d。移植瘤在形态和生物学上仍保持人胆管癌的特点。结论：裸鼠移植瘤1、2号模型是一种接近人体的胆管癌模型，可为胆管癌研究提供实验平台。     

中性磷酸酯酶2在癌症发生发展中作用的研究现状

鞘磷脂-神经酰胺代谢与细胞氧化应激、细胞增殖和细胞坏死等多种细胞过程相关,参与衰老、肥胖和糖尿病等生理病理过程.中性磷酸脂酶2(neutral sphingomyelinase-2,nSMase2)是鞘磷脂-神经酰胺代谢途径中的关键酶,能够水解鞘磷脂产生神经酰胺和磷酸胆碱,参与细胞凋亡、细胞增殖、炎症和骨骼发育等生物学...     

藤黄酸促进bax和p53表达诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

目的：观察藤黄酸(gambogic acids，GA)对肝癌细胞凋亡的诱导作用并探讨其分子作用机制。方法与结果：采用MTT比色法检测藤黄酸对人肝癌和人正常肝细胞增殖作用的影响，结果表明，藤黄酸对人肝细胞性肝癌SMMC-7721细胞株和QGY-7701细胞株有明显增殖抑制作用，并呈剂量依赖性，而对正常人肝组织L-02细胞株作用相对较弱；光镜及电镜形态学观察结果显示，给予GA后，肝癌细胞发生明显的细胞凋亡形态学变化，如细胞体积变小，细胞核固缩，出现凋亡小体等；采用RT-PCR和Western blotting方法检测bax mRNA以及bax和p53蛋白表达变化，结果表明GA可诱导bax mRNA及bax和D53蛋白表达上调；琼脂糖凝胶电泳显示，给予GA后，SMMC-7721裸小鼠移植瘤组织呈现典型的DNA ladder电泳梯状条带。结论：藤黄酸可显著抑制人肝癌细胞的增殖，其分子作用机制可能通过促进bax和p53表达上调，从而诱导人肝细胞性肝癌细胞凋亡。     

二乙基邻菲咯啉二氯合锡与DNA作用的研究

用紫外光谱、荧光光谱、循环伏安和电泳等手段,对二乙基邻菲咯啉二氯合锡[Et₂SnCl₂(phen)]与DNA的作用机制进行了研究。结果表明,Et₂SnCl₂(phen)主要作用于DNA磷酸基因,使DNA构象发生改变。此外还存在通过Et₂SnCl₂(phen)的邻菲咯啉插入DNA双股螺旋的作用方式。Et₂SnCl₂(phen)浓度较大时可使DNA单链断裂。首次提出了Et₂SnCl₂(phen)对DNA可能的分子作用机制模型。     

骨桥蛋白启动子区报告基因的构建

目的 克隆和构建带人骨桥蛋白(OPN)启动子区基因的载体pGL3-OPN.方法 一步法提取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)总DNA,PCR扩增 OPN全长基因,克隆入T载体,测序,双酶切连入真核表达载体pGL3-vector,酶切鉴定.将构建好的pGL3-OPN瞬时转染到人乳腺癌细胞MDA-MB-435中,利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测,通过计算两种质粒荧光素酶活性的比值来筛选药物.结果 扩增出人OPN基因全长,测序结果和GenBank记载一致,成功克隆入真核表达载体.p47可一定程度激活OPN启动子活性.结论 成功构建带有人OPN基因的真核表达载体pGL3-OPN.     

麦冬皂苷药理作用研究进展

麦冬作为一种滋阴药,在传统中药中占有重要地位。随着对麦冬研究的不断深入,其主要有效成分皂苷类的药理活性也不断被发现。综述近年来麦冬皂苷在抗心脑血管疾病、抗衰老、改善学习记忆障碍、抗肿瘤、抗辐射、抗炎、免疫调节、镇咳、改善肝肺病理性损伤等方面的药理作用研究进展,以期为今后对麦冬及其皂苷类活性成分的深入研究和开发利用提供参考。     

沉默CC型趋化因子受体5对人乳腺癌细胞黏附及迁移的影响

构建CC型趋化因子受体5(CCR5)基因shRNA的真核表达载体,探讨沉默CCR5对乳腺癌细胞黏附与迁移能力的影响。在多种人乳腺癌细胞中检测CCR5的基因表达,选择CCR5表达较高的MDA-MB-231细胞做为基因沉默的研究对象;设计并合成2对靶向人CCR5基因的RNA沉默序列,连入基因沉默载体pSilencer 2.1-U6中,构建沉默质粒shCCR5-1 和shCCR5-2,定量PCR和蛋白印迹法检测CCR5基因沉默的效率;以细胞黏附实验和Transwell趋化小室实验分别检测沉默CCR5对MDA-MB-231细胞黏附和迁移能力的影响。结果表明,沉默CCR5可以抑制MDA-MB-231细胞的黏附能力,同时显著降低MDA-MB-231细胞的迁移和趋化。     

肿瘤相关脂肪微环境与肿瘤的恶性发展

肿瘤周围脂肪组织可通过激素、脂肪因子及脂肪酸等生物活性分子与肿瘤细胞产生复杂“对话”,并在肿瘤增殖、侵袭及转移等恶性事件中扮演重要角色。伴随肿瘤发展演化,肿瘤周围脂肪组织在原有结构及功能基础上,发生了丰富而复杂的变化。本文新提出“肿瘤相关脂肪微环境”的概念,并对肿瘤相关脂肪微环境的构成、特点及成因进行分析,进一步探讨其在不同肿瘤恶性进程中的可能作用,以期为靶向肿瘤相关脂肪微环境抗肿瘤药物的开发及临床应用提供理论支持。     

新型表位基因疫苗的构建及对小鼠黑色素瘤的影响

目的：构建以MAGE-1（161—169）为表位的癌症基因疫苗并检测其抗小鼠黑色素瘤效果。方法：构建基因疫苗pcDNA—HSP70-MAGE—l（161-169）,并免疫C57BL／6小鼠。最后一次免疫后第2周,接种小鼠黑色素瘤细胞。于肿瘤细胞接种后14d,处死全部动物,称量肿瘤的重量。采用ELISA法对小鼠血清中抗MAGE-1-IgG类抗体及小鼠原代脾淋巴细胞IFN-7释放水平进行检测。结果：pcDNA-HSP70-MAGE-1（161—169）表位基因疫苗能够成功地诱发机体产生抗MAGE-1的特异性抗体,并能在体内起到抗小鼠黑色素瘤作用,抑瘤率为40．7％。同时还能提高约3．05倍的小鼠原代脾淋巴细胞IFN-7释放量。结论：pcDNA-HSP70-MAGE-1（161-169）有望成为有效的抗小鼠黑色素瘤基因疫苗。