不同年龄大鼠坐骨神经损伤后睫状神经营养因子对脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达的影响

背景天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3是一种促进细胞凋亡的半胱氨酸蛋白酶,睫状神经营养因子具有多种生物活性,能保护损伤后多种神经元特别是运动神经元,减少神经细胞损伤的发生.目的观察睫状神经营养因子对天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3在坐骨神经损伤后不同年龄大鼠脊髓组织中的表达以及在不同年龄阶段的变化规律和调控特点.设计随机对照动物实验.单位解放军第三军医大学野战外科研究所大坪医院超声科、第五研究室.材料实验于2000-04/2001-12在解放军第三军医大学野战外科研究所完成.Wistar大鼠,体质量30～100 g的幼年大鼠(鼠龄20 d)、200～350 g的成年大鼠(鼠龄4个月)、400～800 g的老年大鼠(鼠龄18～24个月)各270只,雌雄不限,共810只.方法[1]实验动物分组各年龄组大鼠随机分为正常组(n=18)、睫状神经营养因子组(n=126)和生理盐水组(n=126),睫状神经营养因子组和生理盐水组分为术后1 d、3 d、1周、2周、4周、8周、12周组.[2]动物模型制作睫状神经营养因子组和生理盐水组切除2mm右侧坐骨神经,用硅胶管连接近、远侧神经残端制作神经再生小室,睫状神经营养因子组再生小室内注入25 mg/L重组睫状神经营养因子15 μL,生理盐水组再生小室内注入生理盐水15μL.[3]待测标本的制作及检测分别取各组动物6只,取脊髓L3-5节段,进行天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3免疫组织化学检测、天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性检测和Western blotting检测.主要观察指标[1]免疫组织化学检测的各组大鼠脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的表达.[2]Western blotting检测脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的分布与表达强度变化.[3]天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性变化.结果810只大鼠进入结果分析.[1]免疫组织化学检测各组大鼠脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的表达损伤后各年龄组生理盐水组伤侧神经元天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3染色表达增强,伤后2周、4周明显增多、增强,8周、12周较少神经元表达阳性;睫状神经营养因子组损伤后各年龄组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达增强,伤后2周、4周最为明显.[2]Western blotting检测脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的分布与表达强度变化各年龄正常组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达差异无显著性意义(P＞0.05).与同龄正常组及对侧未伤侧比较,各年龄组生理盐水组及睫状神经营养因子组损伤后1周、2周、4周天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达增强,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01);睫状神经营养因子组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3幼年于损伤后1周、2周、4周,成年于2周、4周,老年于4周表达较生理盐水组减弱,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01).各组对侧未伤侧与正常组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).[3]天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性变化幼年、成年、老年生理盐水组伤侧脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性升高,各时相点幼年大鼠天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性高于老年组及成年组(P＜0.05～0.01),幼年、成年、老年组睫状神经营养因子组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性低于生理盐水组(P＜0.05～0.01).损伤后生理盐水组及睫状神经营养因子组对侧未伤侧天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性,除幼年伤后12周较正常组低外(P＜0.05),其余各组与正常组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论坐骨神经损伤后不同鼠龄大鼠脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3蛋白表达及活性增高,外源性睫状神经营养因子可减少脊髓神经元中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3蛋白表达及活性,起保护脊髓神经细胞的作用,其作用在幼年组、成年组及老年组依次减弱.     

鼻咽癌颈转移淋巴结的多普勒血流信号特征

目的研究鼻咽癌颈转移淋巴结的彩色多普勒血流信号特征.材料与方法鼻咽癌伴颈淋巴结转移患者52例共134枚颈转移淋巴结,在接受治疗前行彩色多普勒血流检查,分析其血流信号特征和血供强度与淋巴结大小、部位的关系.结果鼻咽癌颈转移淋巴结的动脉血管多分布在淋巴结的周边,血流阻抗(RI)高;淋巴结血流强度的分布因淋巴结部位、大小的变化而不同,大淋巴结较小淋巴结血供丰富;中、下颈淋巴结较上颈淋巴结血供丰富.结论鼻咽癌颈转移淋巴结以周边型高阻血流信号为主.血供强度与淋巴结大小、部位有关.     

微泡激励的超声空化对兔前列腺的损伤作用

目的 探讨微泡激励的超声空化效应对正常兔前列腺组织的损伤作用.方法 30只新西兰雄性兔随机分为超声微泡组、单纯超声组和微泡假照组进行实验.超声微泡组经静脉推注微泡0.1 ml/kg,超声辐照10 min;单纯超声组超声辐照10 min;微泡假照组仅静脉推注微泡0.1 ml/kg.各组循环注射伊文思蓝(EB)溶液示踪.随后视觉观察和定量分析前列腺EB漏出量,并行光镜检查.结果 超声微泡组的前列腺EB漏出量明显大于微泡假照组、单纯超声组(P＜0.01);光镜观察超声微泡组前列腺微血管破裂,组织间隙大量出血,血肿形成.结论 微泡激励的超声空化对兔前列腺有明显的机械损伤作用.     

非高血压左心室肥厚患者血清胰岛素水平的变化

目的 探讨非高血压左心室肥厚(LVH)与血清胰岛素水平变化的关系。方法 测定42例非高血压LVH患者的血清胰岛素、血糖和空腹血脂水平;用超声测定并计算心脏左室质量(LVM)和左室质量指数(LVMI),并按心脏超声测定分为非高血压LVH和左室正常组。结果 LVH组的空腹血甘油三酯和胰岛素分别高于左室正常组,而胰岛素抵抗指数(HOMA法)高于左室正常组。直线相关分析显示非高血压LVH组HOMA指数与LVM、LVMI正相关(r=0.38、P<0.01及r= 0.29、P<0.01)。结论 非高血压LVH患者的高胰岛素血症与LVH有密切相关,高胰岛素血症可能参与非高血压LVH的发生和发展。     

基于网络药理学研究益气温阳护卫汤治疗哮喘的分子机制

目的：运用网络药理学研究益气温阳护卫汤治疗哮喘的分子机制。方法：通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）检索益气温阳护卫汤中十味中药的主要化学成分,通过TCMSP、DrugBank、Swiss平台查找及预测中药化合物对应靶点,在OMIM、Malacards、CTD、Disgent数据库中搜索哮喘相关靶点,取二者交集导入Swiss平台,获得蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选核心作用靶点并构建益气温阳护卫汤-潜在靶点-哮喘作用网络。对核心靶点进行基因本体论（GO）分子功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。采用DiscoverStiudio软件对活性成分与靶点进行分子对接。结果：筛选得益气温阳护卫汤中主要活性成分221个,该活性成分有效靶点为770个,哮喘疾病靶点259个,取交集得核心靶点66个。GO富集分析显示靶点基因主要涉及炎症反应、凋亡过程的负调控、调控血管生成、酶结合、细胞因子活性、血红素结合、激酶活性等;KEGG信号通路主要包括癌症通路、缺氧诱导因子-1信号通路、肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor,TNF）信号通路、钙信号通路、核因子-κB...     

超声引导下细针抽吸细胞学检查联合BRAF V600E基因检测诊断甲状腺影像报告和数据系统(TI-RADS)4类结节

目的 观察超声引导下细针抽吸细胞学检查（FNAC）联合BRAF V600E基因检测对甲状腺影像报告和数据系统（TI-RADS）4类结节的诊断价值。方法 回顾性分析152例TI-RADS 4类结节的超声、FNAC、术后病理及BRAF V600E基因检测等资料。FNAC以Bethesda报告系统分类≥Ⅴ类为标准诊断甲状腺癌。检测BRAF突变,以阳性预测甲状腺癌。以病理结果为金标准,分别计算FNAC、BRAF V600E基因检测及FNAC联合BRAF V600E基因检测诊断甲状腺癌的敏感度、特异度和准确率。结果 BRAF V600E基因检测及超声引导下FNAC联合BRAF V600E基因检测诊断甲状腺癌的敏感度、特异度、准确率均明显高于单纯FNAC （P均<0.05）。FNAC对26个结节（26/152,17.11%）难以明确其良恶性,联合BRAF V600E基因检测后均获明确诊断,诊断敏感度、特异度及准确率分别为95.45%、100.00%及96.15%。结论 超声引导下FNAC联合BRAF V600E基因检测预测TI-RADS 4类结节良恶性优于FNAC,尤其对于FNAC难以明确性质的结节有较高临床价值。     

肝硬变患者血小板活化状态与内皮细胞损伤测定的临床意义

目的探讨血小板活化状态与内皮细胞损伤在肝硬变病理生理及临床中的意义.方法对58例肝炎后肝硬变患者与30例正常对照者,采用双抗体夹心放射免疫法测定血浆血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-),放射免疫法测定内皮素-1(ET-1)含量.结果肝硬变患者血浆GMP-140,ET-1水平比对照组有明显的增高(P＜0.01),并且随着肝硬变Child分级程度的加重,升高越来越明显.结论肝硬变患者血浆GMP-140,ET-1的升高可反映体内血小板活化及血管内皮细胞损伤的程度,在导致微循环障碍中起重要作用.     

早期肝内小占位病变的二维超声形态特征及临床意义

目的探讨肝内小占位病灶的灰阶形态特点以寻求实用且可行的早期诊断小肝癌的条件。方法经超声检查发现的肝内小的占位性病变（最大径线〈3cm）患者60例,经手术病理证实或肝组织病理活检证实其中原发性小肝癌34例,海绵状血管瘤14例,肝内局灶性脂肪缺失6例,瘤样结节增生3例,炎性假瘤3例。并对其形态特征给予了对比分析。结果本研究中88％（30／34）的小肝癌以弱回声为主,其余12％（4／34）为稍强及强回声。癌性结节多为规则的正圆形或类圆形,大部分可见完整包膜或晕环,多可测得周边或中心性血流。在非癌性结节中强回声多见,少数为低回声,多为不规则型,少数为类圆形,无完整包膜或声晕,很少测及血流信号。结论依据病灶的二维形态特征可提高小肝癌的早期阳性发现率。     

剖宫产手术中硬膜外麻醉与腰硬联合麻醉的效果比较

目的：分析剖宫产手术中硬膜外麻醉与腰硬联合麻醉的麻醉效果。方法回顾性分析我院2104年1月—2104年8月收治的86例行剖宫产产妇的临床资料,将其随机分为观察组与对照组,每组各43例,其中对照组采用硬膜外麻醉,观察组采用腰硬联合麻醉,比较两组的术中情况、麻醉效果及术后情况。结果观察组的麻醉诱导时间、手术时间、辅助用药比例等均优于对照组,差异具统计学意义(P<0.05);观察组的麻醉效果显著优于对照组,差异具统计学意义(P<0.05);两组患者术后情况各指标对比差异不具统计学意义(P>0.05)。结论剖宫手术中采用腰硬联合麻醉具有起效快、镇痛作用强等优势,麻醉效果显著优于硬膜外麻醉,故值得临床推广。     

碳青霉烯类药物联合舒巴坦或头孢哌酮对铜绿假单胞菌的药敏影响

目的 探讨碳青霉烯类药物联合应用舒巴坦或头孢哌酮等抗生素对铜绿假单胞菌(PA)的药敏影响。方法 临床收集PA菌株,K-B法行单药药敏及联合药敏测定;MIC法测定比阿培南、亚胺培南联合磷霉素、阿米卡星、舒巴坦、头孢哌酮、头孢哌酮舒巴坦、环丙沙星对铜绿假单胞菌的影响并计算联合用药分级抑菌浓度(FIC)指数。结果 K-B法单药药敏将120株PA分为敏感菌56株,多耐药菌株 36株,泛耐药菌株 13株,广耐药菌株15株;K-B联合药敏提示,与比阿培南联合最有效的药物依次为磷霉素、舒巴坦、阿米卡星、头孢哌酮;与亚胺培南联合最有效的药物为磷霉素、舒巴坦、阿米卡星;但亚胺培南联合头孢哌酮舒巴坦、头孢哌酮出现拮抗;联合MIC法检测结果与K-B法结果相似,与亚胺培南、比阿培南联合最有效的依次均为磷霉素、阿米卡星、舒巴坦;但亚胺培南联合头孢哌酮或头孢哌酮舒巴坦出现拮抗。结论 体外联合药敏发现,碳青霉烯类药物联合磷霉素、舒巴坦或阿米卡星对PA感染协同率最高,但亚胺培南联合头孢哌酮有拮抗作用。