克隆的人神经母细胞瘤细胞株鲀毒素抵抗型钠通道的功能分析

目的 作者已经克隆了人神经母细胞瘤（NB-1）细胞株鲀毒素抵抗型（TTX-R）钠通道α亚单位及其选择性剪切体，分别命名为hNbR1和hNbR1-2，本实验观察这两个钠通道同型异构体的电生理特性。方法 使用全细胞膜片钳技术在转染了hNbR1和hNbR1-2的人胚肾细胞（HEK-293）上记录这两个钠通道的钠电流。结果 这两个变构体在稳态激活和失活方面略微不同，hNbR1和hNbR1-2的半数激活电压分别为－(37.8±1.3)和－(43.5±1.7)mV，半数失活电压分别为－(74.4±1.1)和－(81.5±1.1)mV，hNbR1-2的稳态激活和稳态失活曲线较hNbR1分别负向移位5.7 mV和 7.1 mV。TTX阻断hNbR1和hNbR1-2的IC₅₀分别为(7.9±2.3)和(8.3±2.5)μmol·L^-1，二者对TTX的敏感性无显著性差异。结论 两个钠通道变构体hNbR1和hNbR1-2均可在HEK-293细胞上表达并产生钠电流，二者在稳态激活和失活方面略微不同，对TTX的敏感性无显著性差异。     

壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流的影响

应用全细胞膜片钳制技术观察壳聚糖(QT)对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流(ICa)的影响。结果：QT能明显增加心室肌细胞的Ca^2 内流,使ICa增大。此作用有明显的电压依赖性,在峰电流电压下作用最明显,而对其反转电位无明显影响。QT对ICa的作用具有可复性。结论：QT以电压依赖和浓度依赖的方式增加心肌细胞的Ca^2 内流,可能是其治疗充血性心力衰竭的机制之一。     

钙通道阻滞剂对大鼠肝细胞钙释放激活的钙电流的影响(英文)

目的:研究钙通道拮抗剂对大鼠肝细胞钙释放激活的钙电流(I_(CRAC))的影响,方法:应用全细胞膜片箝技术。结果:I_(CRAC)的电流峰值是(-0.41±0.09)nA(n=15),反转电位约为0 mV,维拉帕米(Ver),地尔硫(艹卓)(Dil)和硝苯地平(Nif)显著降低I_(CRAC),不影响它的反转电位,Ver 5 μmol·L~(-1)的抑制率是40％±12％(n=3),Ver 50 μmol·L~(-1)使,CRAC的幅值从(-0.49±0.12)nA降到(-0.20±0.09)nA(n=5,P<0.01),抑制率为57％±15％,Dil和Nif 50 μmol·L~(-1)分别从(-0.43±0.10)nA(n=5),(-0.32±0.08)nA(n=5)降到(-0.29±0.07)nA(P<0.01),(-0.27±0.08)nA(P<0.01),抑制率分别为31％±11％,19％±7％,I_(CRAC)的幅值大小依赖细胞外钙浓度。I_(CRAC)在含台氏液1.8 mmol·L~(-1)中电流幅值为(-0.21±0.08)nA(n=3,P<0.01),结论:这三种钙通道拮抗剂有效抑制,I_(CRAC)并且通过抑制I~(CRAC)减少肝细胞钙超载。     

缓激肽对胶质瘤血瘤屏障体外模型中钙激活钾电流的作用

目的建立胶质瘤血瘤屏障体外模型,研究缓激肽(BK)对胶质瘤血瘤屏障钙激活钾电流(Ikca)的作用,探讨BK开通血瘤屏障的机制。方法条件培养和共培养,膜片钳全细胞记录。结果条件培养的脑微血管内皮细胞(BMECs)形态无明显变化,胶质瘤C6细胞之间相互接触紧密。共培养的BMECs和C6细胞各自聚集,之间形成界面,1μmol.L-1缓激肽使BMECs和C6细胞界面内钙激活钾电流下降。结论1μmol.L-1的缓激肽抑制部分血瘤屏障体外模型BMECs和C6细胞的钙激活钾电流。     

异丙酚对人心房肌细胞ATP敏感性钾电流的影响

目的 探讨不同浓度的异丙酚对人离体心房肌细胞 ATP 敏感性钾电流(I_KATP)的影响及电生理改变。方法取房缺或室缺修补术病人的右心耳组织，置于100%氧饱和无钙心肌细胞冷保护液中，并在30min 内送至实验室。将标本剪成1mm~3小块，用二步酶解法分离出单一心房肌细胞。用膜片钳全细胞记录方法，观察不同浓度异丙酚(0.003、0.03和0.3mmol·L~(-1))对心房肌单一细胞I_KATP的影响。结果 在电极内液含 ATP(0.3mmol·L~(-1))条件下，记录到一束外向 K~＋电流。该电流可被K_ATP 通道特异阻滞药格列苯脲(10μmol·L~(-1))抑制，表明此电流为 I_KATP。异丙酚使 I_KATP 外流增加，且浓度与电流激活率呈线性回归(r~2=0.9999，P<0.05)。结论 异丙酚通过浓度依赖方式激活心房肌细胞 I_(KATP)，对人心房肌具有抑制作用。     

心肌细胞膜T型钙通道的研究进展

心肌细胞膜表面存在L和T型钙通道,T型钙通道在心脏起搏及调控细胞生长和繁殖方面的作用日益受到人们的重视.T型钙通道拮抗剂在心血管疾病治疗中具有重要作用,研制新型特异性T通道拮抗剂是心血管疾病治疗中的一个重要方向.     

四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞跨膜内向Ca~(2 )电流的抑制作用(英文)

目的:研究四氢巴马汀(THP)对豚鼠心室肌细胞膜Ca~(2 )通道的作用。方法:分离豚鼠心室肌细胞,利用膜片箝技术观察、记录心室肌细胞膜跨膜内向钙电流(I_(Ca))。结果:THP灌流5min后明显抑制豚鼠心室肌细胞内向I_(Ca),其作用呈现剂量-效应关系,并具有频率依赖性。0.1,1,10μmol·L~(-1)的THP使I_(ca)从1.15±0.22,0.91±0.18,1.60±0.42nA(control,n=5)分别降低到0.90±0.21(P<0.01),0.56±0.21(P<0.01),0.83±0.21(P<0.05)nA,抑制率分别为22％,38％和48％,THP的作用易于洗脱。峰值电压为0mV,此时THP作用最明显,THP对较高频率刺激产生的电流抑制作用较强,2Hz时的抑制率高于0.1Hz时的抑制率(P<0.01)。结论:THP具有Ca~(2 )通道阻滞作用。     

SOTALOL对新生犬心肌浦肯野纤维电生理特性的影响

Sotalol是具有明显Ⅲ类作用的β—受体阻断药。我们用标准玻璃微电极技术,观察Sotalol对新生犬心肌浦肯野纤维电生理特性的影响。与成年犬对比,Sotalol对新生犬心肌浦肯野纤维具有显著的Ⅲ类抗心律失常作用的特性。     

家兔肺动脉平滑肌细胞的延迟整流钾电流及白花前胡有效成分Pd-Ia对此电流的作用

建立用胰蛋白酶和胶原酶分离制备家兔肺动脉单离平滑肌细胞的方法并以膜片钳制技术观察了此细胞延迟整流钾电流的基本特性及中药白花前胡有效成分Ｐｄ－Ｉａ的作用。结果表明：①将细胞钳制在－４０ｍＶ，当指令电位大于－４０ｍＶ时，可以记录到具时间及电压依赖性的延迟整流钾电流；②Ｐｄ－Ｉａ１０－６ｍｏｌ／Ｌ在指令电位为＋８０ｍＶ时，可以使延迟整流钾电流由给药前的（１．８±０．５）ｎＡ增加至（２．３±０．６）ｎＡ，提示Ｐｄ－Ｉａ可能具有钾通道开放作用。     

克隆的人神经母细胞瘤细胞株鲀毒素抵抗型钠通道的功能分析

目的作者已经克隆了人神经母细胞瘤(NB-1)细胞株毒素抵抗型(TTX-R)钠通道α亚单位及其选择性剪切体,分别命名为hNbR1和hNbR1-2,本实验观察这两个钠通道同型异构体的电生理特性。方法使用全细胞膜片钳技术在转染了hNbR1和hNbR1-2的人胚肾细胞(HEK-293)上记录这两个钠通道的钠电流。结果这两个变构体在稳态激活和失活方面略微不同,hNbR1和hNbR1-2的半数激活电压分别为-(37.8±1.3)和-(43.5±1.7)mV,半数失活电压分别为-(74.4±1.1)和-(81.5±1.1)mV,hNbR1-2的稳态激活和稳态失活曲线较hNbR1分别负向移位5.7mV和7.1mV。TTX阻断hNbR1和hNbR1-2的IC50分别为(7.9±2.3)和(8.3±2.5)μmol·L-1,二者对TTX的敏感性无显著性差异。结论两个钠通道变构体hNbR1和hNbR1-2均可在HEK-293细胞上表达并产生钠电流,二者在稳态激活和失活方面略微不同,对TTX的敏感性无显著性差异。