克隆的人神经母细胞瘤细胞株(鱼屯)毒素抵抗型钠通道的功能分析

目的作者已经克隆了人神经母细胞瘤(NB-1)细胞株(鱼屯)毒素抵抗型(TTX-R)钠通道α亚单位及其选择性剪切体,分别命名为hNbR1和hNbR1-2,本实验观察这两个钠通道同型异构体的电生理特性.方法使用全细胞膜片钳技术在转染了hNbR1和hNbR1-2的人胚肾细胞(HEK-293)上记录这两个钠通道的钠电流.结果这两个变构体在稳态激活和失活方面略微不同,hNbR1和hNbR1-2的半数激活电压分别为-(37.8±1.3)和-(43.5±1.7)mV,半数失活电压分别为-(74.4±1.1)和-(81.5±1.1)mV,hNbR1-2的稳态激活和稳态失活曲线较hNbR1分别负向移位5.7 mV和 7.1 mV.TTX阻断hNbR1和hNbR1-2的IC50分别为(7.9±2.3)和(8.3±2.5)μmol*L-1,二者对TTX的敏感性无显著性差异.结论两个钠通道变构体hNbR1和hNbR1-2均可在HEK-293细胞上表达并产生钠电流,二者在稳态激活和失活方面略微不同,对TTX的敏感性无显著性差异.     

中药白花前胡及其有效成分甲素的心血管药理和临床应用研究

用心脏血流动力学方法，超声微测距及全细胞膜片钳制等多种技术，首次较全面系统地证明了中药白花前胡（ＢＱ）及其有效成分甲素（Ｐｄ－Ｉａ）的抗心律失常及化心肌缺血作用。其中ｔｖＰｄ－Ｉａ１～３ｍｇ／ｋｇ增加麻醉犬冠脉流量，减少主动脉血压、＋ＬＶｄＰ／ｄｔｍａｘ、率压积及全身血管阻力，其作用与钙拮抗剂地尔硫卓类似。ｉｖ输入Ｐｄ－Ｉａ０．１５ｍｇ／ｋｇ／ｍｉｎ３０ｍｉｎ，在不影响心率、血压及心肌收缩功能等情况下；迅速改善经１５ｍｉｎ闭塞左前降枝伴３ｈ再灌注的麻醉犬心肌收缩功能不良，再灌后５ｍｉｎ即使心肌节段收缩率恢复到用药前的４１±５１％（Ｐ＜０．０５，ｎ＝８）。Ｐｄ－Ｉａ剂量依赖性地减少钙电流峰值，是一钙内流阻断剂。经１５例住院患者２４小时动态心电图初步观察，ＢＱ口服液对冠心病并发和原因不明性室性心律失常有满意疗效。     

促甲状腺素释放素增敏失血性休克大鼠心脏肾上腺素受体及其机理

采用失血性休克大鼠离体心脏观察了促甲状腺素释放素（ＴＲＨ）对肾上腺素受体激动剂正性肌力作用的影响及对肾上腺素受体数量和亲和力的影响，并用全细胞记录式膜片钳技术研究了ＴＲＨ对豚鼠单一心肌细胞慢钙内流及其对肾上腺素受体激动剂促钙内流作用的影响。结果表明，ＴＲＨ可上调失血性休克大鼠β肾上腺素和多巴胺受体数量，并增加β肾上腺素受体的亲和力。ＴＲＨ可延长心肌细胞膜钙通道开放时间，增加异丙肾上腺素和多巴胶的促钙内流作用，ＴＲＨ的这一作用可能是其增敏心脏肾上腺素受体，增强其激动剂正性肌力作用的重要原因。     

江浙蝮蛇抗栓酶对麻醉猫冠脉流量的影响

采取冠状窦插管等技术,用方波电磁流量计和多导记录仪同步监测,初步观察了江浙蝮蛇抗栓酶对乌拉坦麻醉猫冠脉流量的影响。结果表明,在一定剂量下,该药能增加冠状窦的平均血流量,随作用时间延长及剂量加大,还可引起血压及脉压降低。对心率无明显影响。     

N-甲基小檗胺对人心房肌细胞瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流的作用(英文)

目的　动物实验表明N 甲基小檗胺 (NMB)通过抑制豚鼠心室肌细胞ATP敏感性钾电流和钙电流来发挥抗心律失常和抗心肌缺血作用 ,故进一步研究NMB对人心肌细胞电流的作用。方法　膜片钳制技术全细胞记录模式研究NMB对人心房肌细胞瞬时外向钾电流 (Ito)和延迟整流钾电流 (IK)的作用。结果　指令电位为 +60mV时 ,NMB 0 .1 ,1 ,1 0 μmol·L-1 分别使Ito幅值下降 (1 6± 4) % ,(2 5±4) %和 (49± 3) % ,使IK 幅值下降 (42± 6) % ,(47±7) %和(65± 3) %。结论　NMB对人心房肌细胞Ito和IK 均有抑制作用。     

牛磺酸对低钙环境下豚鼠心室肌细胞ICa的影响

目的　观察在低钙环境下,牛磺酸对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流(I_Ca)的影响。方法　应用全细胞膜片钳制技术。结果　低钙状态下,豚鼠心室肌细胞I_Ca减小,此时牛磺酸可促进Ca²⁺内流,使Ica增加(P<0.01) ,此作用具有电压依赖性,对反转电位无明显影响。此作用随细胞外Ca²⁺浓度的降低而有所增强,并且是可逆的。结论　牛磺酸能增加低钙状态下的心室肌细胞Ca2 +内流。     

降钙素基因相关肽对早期糖尿病大鼠血管ATP敏感性钾通道的影响

目的　研究早期糖尿病大鼠血管平滑肌ATP敏感性钾通道 (KATP)的变化 ,进一步探讨糖尿病血管功能的改变机制。方法　大鼠单次注射链佐霉素6 0mg·kg- 1制作糖尿病模型 ;1周或 2周后 ,两步酶消化法进行肠系膜动脉平滑肌细胞 (MASMC)的消化分离 ;全细胞膜片钳制技术记录MASMC的ATP敏感性钾电流 (IKATP)。结果　在保持电位 - 40mV ,指令电位 +5 0mV时 ,对照组 ,糖尿病 1周和 2周组MASMC的IKATP 分别为 (79± 6 ) ,(70± 7)和(4 8± 9)pA·pF- 1,糖尿病 2周组的IKATP明显低于对照组。给予降钙素基因相关肽 0 .0 1～ 10 0nmol·L- 1,3个组的IKATP 均浓度依赖性增加 ,对照组 :Y =118.3+2 .9X ,r =0 .887;糖尿病 1周组 :Y =12 3+4.4X ,r =0 .981;糖尿病 2周组 :Y =10 0 .2 +4.6X ,r =0 .975 ;糖尿病组IKATP对降钙素基因相关肽量效反应斜率高于对照组。结论　早期糖尿病血管平滑肌的基础IKATP减小 ,IKATP对降钙素基因相关肽的量效反应斜率增加。     

羧甲基壳聚糖对大鼠单一心室肌细胞ATP敏感钾电流的作用

目的 研究羧甲基壳聚糖对大鼠单一心宣肌细胞ATP敏感钾电流(IkAIP)的作用.方法 急性分离大鼠心室肌细胞,利用膜片钳削技术全细胞记录法,保持电位-40mV,指令电位-100～ 50mV,步阶脉冲10mV,波宽200ms,刺激间隔6s的方波钳制方案进行刺激.结果 羧甲基壳聚糖抑制心室肌细胞IKATP,且具有剂量依赖关系.指令电位在 50mV时,3种浓度羧甲基壳聚糖(0.1%,0.2%,0.3%)可使IKATP分别降低至给药前的66.1%±9.9%,50.3%±13.3%和39.8%±9.5%(n=7).其它指令电位下的IKATP改变也符合此趋势.结论 羧甲基壳聚糖剂量依赖性地抑制大鼠单一心室肌细胞IKATP,这可能是其抗心律失常的机制之一.     

钾通道在维拉帕米抑制上皮钠通道中的作用

目的探讨钾通道在维拉帕米引起的肺水肿中的作用。方法应用尤斯灌流室技术检测钾通道阻滞剂对维拉帕米抑制上皮钠通道的作用。Clofilium,clotrimazole以及glibenclamide(分别为KvLQT1,KCa和KATP通道的阻滞剂)加入H441单层细胞基底侧后,记录短路电流。同时,在穿孔细胞层中观察了维拉帕米对Na+/K+泵的作用。结果在穿孔H441细胞层中观察到维拉帕米对上皮钠通道和Na+/K+泵均有抑制作用。Clofilium,clotri mazole以及glibenclamide分别抑制短路电流至54.4±4.6%,32.1±5.2%,和20.5±1.1%(n=5)。用上述三种钾通道阻滞剂预处理后,维拉帕米对短路电流的作用由对照组的45.9±4.8%分别降低至23.7±4.3%,34.2±2.6%和36.0±2.8%(n=4)。Clofilium显示了对短路电流的最大抑制,与其它两种抑制剂相比具有统计学差异。应用clofilium后加入维拉帕米与对照组相比,其抑制率具有明显统计学差异(P<0.05)。结论这些结果表明KCa,KATP,尤其是KvLQT1通道在肺上皮细胞维拉帕米引起的非心源性肺水肿的Na+和Cl-转运的病理生理过程中发挥重要作用。     

N-甲基小檗胺对大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾电流的作用

目的研究N-甲基小檗胺对大鼠肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙激活钾电流(IK·Ca)的作用,以阐明其降血压的离子机制。方法膜片钳技术全细胞记录模式记录IK·Ca。结果指令电位为+60mV时,N-甲基小檗胺0·1,1,10μmol·L-1使IK·Ca幅值分别由给药前的(33·6±2·0)pA·pF-1增至给药后的(35·7±1·9),(42·9±2·7)和(59·4±1·4)pA·pF-1(n=6,P<0·01)。结论N-甲基小檗胺可以增加大鼠肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙激活钾电流,这可能是其降压机制之一。