幽门螺杆菌感染与胃癌及癌前病变的环氧合酶-2表达的研究

目的：通过研究HP感染与胃癌及癌前病变中环氧合酶－2（cox-2)表达的关系,以探讨HP可能的致癌机制。方法：经胃镜和病理诊断明确的病例共120例,包括慢性浅表性胃炎（CSG）,肠上皮化生,不典型增生,胃癌各30例,以ABC免疫组化法检测上述标本的cox-2,以改良Giemsa法检测HP,结果：胃癌组肠型胃癌HP阳性率为83．3％（20／24）,弥漫型6型中HP阳性1例,胃癌HP阳性率为与CSG比较差异非常显著（P＜0．01）,肠型胃癌HP阳性率与胃癌阳性率比较有明显差异（P＜0．05）,各组HP阳性的cox-2与其HP阴性者作相应比较均有显著或非常显著性差异（P＜0．05或P＜0．01）,结论：HP感染可使胃粘膜中cox-2过度表达,导致细胞凋亡受抑制,从而可引起胃癌的发生。     

环氧合酶-2反义RNA在不同时间点对人食管癌细胞系生长的影响

背景:环氧合酶（COX）-2在人食管癌细胞系EC9706中高度表达,COX-2反义RNA能抑剂EC9706细胞的生长增殖。目的:探讨COX-2反义RNA在不同时间点对EC9706细胞生长的影响。方法:培养293细胞,扩增、纯化编码COX-2反义RNA的重组腺病毒Ad-AShcox-2,转染EC9706细胞,在不同时间点进行活细胞计数和3H-胸腺嘧啶核苷（TdR）掺入量测定。结果:扩增、纯化获得编码COX-2反义RNA的重组腺病毒Ad-AShcox-2,滴度为1.2×10~（12）PFU/ml。Ad-AShcox-2转染EC9706细胞后,在24h、48h、72h和96h时对细胞生长的抑制率分别为8.60％、24.33％、50.21％和75.26％。Ad-AShcox-2组EC9706细胞的3H-TdR掺入量从24h起开始减少,72～96h时达最低,与对照组相比有显著差异（P<0.001）。结论:COX-2反义RNA重组腺病毒感染人食管癌细胞后,从24h起开始对癌细胞产生抑制作用,72～96h时寸抑制作用最为明显。     

p27kip1基因转染联合化疗对胃癌细胞生长的影响

背景：p27kipl是一种抑癌基因，早期研究显示p27kipl基因转染能明显抑制胃癌、食管癌细胞生长．表明该基因疗法可能是治疗胃癌、食管癌的新途径，深入阐明p27kipl的抑癌机制，可为p27kipl基因治疗胃癌、食管癌提供可靠的理论基础。目的：研究p27kipl基因转染联合化疗对胃癌细胞生长的影响。方法：将p27kipl重组腺病毒（Ad-p27kipl）转染胃癌细胞SGC-7901，免疫细胞化学法检测p27kipl的表达。加入5-氟尿嘧啶（5-FU）和顺铂（DDP）后．甲基噻唑基四唑（MrIT）法测定细胞生长抑制率,^3H-胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR）掺入试验测定DNA的合成。结果：Ad-p27kipl转染胃癌细胞后，p27kipl表达明显增强。加入5-FU和DDP后，细胞生长抑制率显著增高．^3H-TdR掺人量显著降低（P〈0．01）。结论：p27kipl基因转染联合化疗能明显抑制胃癌细胞的生长。     

鄂西北地区不同性别食管鳞癌患者食管菌群差异

目的:比较湖北十堰地区不同性别食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者食管菌群的构成及差异.方法:选取2018年7月至2019年7月在十堰市太和医院就诊,诊断为ESCC患者72例,其中女性11例,男性61例,对两组食管菌群的16SrRNA基因V4高变区测序,比较两组...     

T淋巴细胞亚群和DNA倍体检测在腹水鉴别诊断中的价值

目的:探讨T淋巴细胞亚群和DNA倍体检测在腹水鉴别诊断中的价值.方法:腹水患者74例,其中结核性腹膜炎24例,肝硬化21例,癌性腹水29例,流式细胞仪测定腹水T淋巴细胞亚群和DNA倍体.结果:腹水中T淋巴细胞(CD3~ )、T辅助/诱导细胞亚群(CD4~ )、T辅助细胞亚群/T抑制细胞亚群(CD4~ /CD8~ )所占比例从大到小依次为结核性腹膜炎(CD3~ :86.2%±5.1%,CD4~ :64_3%±6.4%,CD4~ /CD8~ :3.20%±0.30%)、癌性腹水(65.7%±4.6%,32.5%±2.2%,1.04%±0.11%)、肝硬化腹水(15.1%±2.7%,3.6%±0.5%,0.36%±0.05%)(三组间P<0.01),CD8~ 比例从小到大依次为肝硬化腹水(10.1%±3.2%)、结核性腹膜炎(20.1%±4.3%)、癌性腹水(31.3%±5.2%)(三组间P<0.01).腹水DNA倍体阳性率癌性腹水达89.7%(26/29),与结核性腹膜炎4.2%(1/24)和肝硬化4.7%(1/21)具有显著性差异(P<0.01).结论:T淋巴细胞亚群和DNA倍体在结核性腹膜炎、肝硬化及癌性腹水存在显著差异,其检测可用于腹水的鉴别诊断.     

恩替卡韦联合百令胶囊治疗对干扰素α-2b无应答的HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者疗效研究

目的探讨恩替卡韦(ETV)联合百令胶囊治疗对干扰素α-2b无应答的HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的临床疗效及安全性。方法 76例对干扰素α-2b治疗无应答的HBeAg阳性CHB患者被分为对照组37例和观察组39例,给予对照组贯ETV治疗,观察组接受恩替卡韦和百令胶囊治疗,观察2年。采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量,采用化学发光微粒子免疫测定法定量检测血清HBsAg和HBeAg水平,采用ELISA法检测血清TGF-βl、CPK、MDA、SOD和GSH。结果在治疗2年时,两组血清HBV DNA载量无显著差异(P0.05),观察组血清HBsAg和HBeAg水平显著低于对照组;观察组ALT、AST、CPK和MDA水平显著低于对照组,而血清SOD和GSH水平显著高于对照组(P0.05)。结论在应用ETV抗病毒的同时加用百令胶囊治疗对干扰素α-2b无应答的HBeAg阳性CHB患者可提高疗效。     

PAX-5在Barrett食管、食管腺癌中的表达及其对食管腺癌细胞侵袭和转移的影响

目的检测配对盒基因-5(paired box,PAX-5)在Barrett食管、食管腺癌组织和食管腺癌细胞系中的相对表达,及其对食管腺癌细胞转移的作用和机制。方法以食管腺癌细胞、正常食管组织、Barrett食管和食管腺癌组织为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PAX-5 mRNA在食管腺癌细胞系中表达;qRT-PCR和免疫蛋白印迹实验验证PAX-5 mRNA和蛋白在组织中的相对表达。采用表达最低的OE33为研究对象,分别转染pcDNA3.1(+)-Flag-PAX-5质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector质粒(对照组)至OE33细胞系,利用Transwell迁移和侵袭实验检测PAX-5的迁移和侵袭的影响,并用qRT-PCR和免疫蛋白印迹验证PAX-5基因迁移和侵袭的分子机制。结果食管腺癌中PAX-5 mRNA和蛋白的表达显著低于Barrett食管和正常食管组织(P0.001),PAX-5 mRNA在食管腺癌细胞系中表达下调(P0.001);Transwell实验研究显示:与对照组相比,实验组迁移和侵袭能力明显受到抑制;过表达PAX-5抑制上皮-间质转化(EMT)相关基因的表达(P0.001)。结论 PAX-5在食管腺癌中表达下调,可能作为潜在的抑癌基因参与食管腺癌的进程。     

根除Hp前后胃窦粘膜COX-2表达的变化

目的检测胃窦粘膜在根除Hp前后环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)表达水平的变化,探讨COX-2表达与急、慢性炎症的关系.方法对我院1999.6-2000.3胃镜诊断为慢性胃炎、胃粘膜活组织尿素酶试验和14C尿素呼气试验均证实Hp阳性的14例住院病人,在根除Hp前后取胃粘膜活检组织,HE染色显示组织结构和炎性细胞浸润情况,用免疫组织化学方法(SP法)显示COX-2表达情况.结果感染区域的胃窦上皮细胞和相应的壁细胞、单核细胞均可检测到COX-2的阳性表达,与根除Hp后比较,COX-2的表达明显减少而不完全消失(P＜0.005),COX-2阳性表达率与胃粘膜的急性炎症程度无关,而与慢性炎性细胞浸润密切相关(r=0.74 P＜0.05).结论COX-2的高表达可能是Hp相关性胃炎发生的重要机制.     

腺病毒介导的COX—2反义RNA对食管癌细胞株生长的影响

目的：验证环氧合酶（COX）－2在食管癌组织是否高度表达;构建表达人COX－2反义RNA的腺病毒载体,研究其对人食管癌细胞生长的抑制作用。方法：用免疫组织化学方法（SP法）,检测COX－1、COX－2在38例食管癌癌旁组织和癌组织中表达情况;并将人COX－2的cDNA片段反向构建于腺病毒载体并转染食管癌细胞EC9706,采用生长曲线、用^3H-TdR、^3H-Leucine掺入法及免疫细胞化学的方法,研究其对COX－2表达、及对食管癌细胞生长、DNA复制及蛋白合成的影响。结果：COX－2在食管癌中的阳性表达率为91．7％,主要为癌组织的表达,而在癌旁正常组织无表达或弱表达,而COX－1在食管癌正常组织和癌旁组织均有不同水平的表达。同时,我们构建的重组腺病毒感染肿瘤细胞后,COX－2表达水平与对照组比较明显降低,^3H-TdR和^3H-Leucine掺入量均明显减少,与对照组比较P＜0．001;同时发现食管癌细胞的生长细胞计数随时间递减,对照组生长细胞计数随时间而递增,Ad-LacZ组与空白对照组生长曲线几乎重叠。结论：COX－2可能与食管癌的发生发展有关;抑制COX－2的表达可能是治疗食管癌的一种新途径。     

环氧合酶-2选择性抑制剂NS-398诱导食管癌细胞EC 9706凋亡及其机制的探讨

目的 观察环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂NS一398对食管癌细胞株EC 9706增殖及凋亡的影响,砌究其对凋亡抑制蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响,探讨NS-398诱导Ec 9706细胞凋亡的作用机制.方法 NS-398作用EC 9706细胞后,MTT法测定NS-398对人食管癌EC 9706细胞增殖的抑制率;DNA片段分析法和流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫细胞化学检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化.结果 NS-398(10～100μmol/L)对EC 9706细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长抑制作用增强,并诱导EC 9706细胞凋亡,呈剂量-时间效应关系;NS-398可降佴Survivin蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达.结论 NS-398可诱导人食管癌细胞株EC 9706凋亡,其机制可能与下调Survivin表达及激活Capase-3表达有关.