6O例成年癫痫患者生活质量的调查

目的：评价成年癫痫患者的生活质量。方法：用癫痫患者生活质量量表-31（QOLIE-31）对湖南省岳阳市60例确诊的成年癫。痫患者和60名对照组进行评定。结果：癫痫组较对照组生活质量降低[得分分别为（58．71±16．78）分和（62．16±11．99）分],表现在惧怕发作以对日常生活不满意,认知功能下降和社交受限等。结论：湖南省岳阳地区成年癫痫患者生活质量降低,应控制癫痫发作以提高患者的生活质量。     

TGF-β1基因修饰的树突状细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠外周血单个核细胞CD28/CTLA-4:B7表达的影响

目的 探讨TGF-β1基因修饰的树突状细胞(DC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)CD28/CTLA-4:B7表达的影响.方法 近交系8～10周龄健康雌性Lewis大鼠30只,分为正常组、EAMG组、DC对照组、pcDNA3-TGF-β1-DC组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组.除正常组外,其余各组均采用丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体(AChR)蛋白二次免疫的方法复制EAMG大鼠模型.初次免疫后第5天分别皮下注射2×106的DC、pcDNA3-TGF-β1-DC、pcDNA3-DC及等体积的生理盐水,正常组和EAMG组不接受任何治疗.初次免疫后7周分离各组PBMC,应用RT-PCR和流式细胞术方法分别进行CD28、CTLA-4 mRNA及B7-1、B7-2蛋白表达水平的检测.结果 (1)正常组大鼠PBMC CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平较低,尤其CTLA-4 mRNA极少量表达;EAMG组大鼠CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平均明显增加;pcDNA3-TGF-β1-DC组CD28 mRNA的表达较EAMG组明显降低(P<0.01),而CTLA-4 mRNA的表达水平较EAMG组明显增加(P<0.05);EAMG组、DC治疗组、pcDNA3-DC对照组和生理盐水对照组之间CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平无显著性差异(P＞0.05).(2)正常大鼠B7-1、B7-2在PBMC上少量表达;EAMG组B7-1、B7-2两者表达明显增加(P<0.001);pcDNA3-TGF-β1-DC治疗组B7-1、B7-2的表达较EAMG组均明显降低(P<0.01);DC对照组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组与EAMG组比较均无明显差异(P＞0.05).结论 EAMG大鼠存在PBMC CD28/CTLA-4:B7协同刺激分子的表达异常,主动调节机体的共刺激通路可能是TGF-β1基因修饰的DC治疗EAMG的机制之一.     

辛苍鼻舒胶囊中挥发油成分的提取与包合工艺研究

目的:研究辛苍鼻舒胶囊中细辛、川芎、苍耳子、辛夷所含挥发油的提取与包合工艺。方法:采用正交试验,以浸泡时间、加水量、提取时间为考察因素,以挥发油提取量为指标,考察提取工艺;以挥发油与β-环糊精比例、包合温度、包合时间为考察因素,以包合物收得率为指标,考察包合工艺。结果:挥发油最佳提取工艺为加10倍量水,浸泡1h,提取8h;最佳包合工艺为采用饱和水溶液法,挥发油与β-环糊精比例为1:6,在40℃下包合60min。结论:所选提取、包合工艺合理、可行。     

负载乙酰胆碱受体的未成熟树突状细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠细胞因子表达的影响

目的 探讨负载乙酰胆碱受体(AChR)的未成熟树突状细胞(iDC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠细胞因子表达的影响.方法 30只雌性Lewis大鼠随机分为EAMG组、iDC组、成熟Dc(mDC)组、负载AChR的iDC(AChR+iDC)组、负载AChR的mDC(AChR+mDC)组和正常对照组.分别给...     

Experimental Study on Induction of Tolerance to Experimental Autoimmune Myasthenia Gravis by Immature Dendritic Cells

To investigate the effect of immature dendritic cells (iDCs) on experimental autoimmune myasthenia gravis (MG), iDCs were generated in low dose of GM-CSF, and then they were pulsed with acetylcholine receptor (AchR) and transferred to allogeneic rats. After 3 weeks, all rats were immunized with AchR and complete Freund‘s adjuvant (CFA) and observed for the corresponding indices of MG for 7 weeks. Our results showed that compared with mature DCs (mDCs) generated at high dose of GM-CSF plus additional stimulation by lipopolysaccharide, iDCs expressed significantly lower levels of MHC-Ⅱ , CD80 and CD86, and their ability to uptake FITC-Dextran was stronger but the ability of stimulating proliferation of allogeneic T cells were weaker. Like controls, after immunization, all rats transferred with iDCs, mDCs and AchR-pulsed mDCs showed typical symptoms in 4 to 7 weeks. The amplitude of electromyogram wave dropped obviously, the level of serum AchRab increased and neuromuscular junction showed typical damage of MG. In contrast, no conspicuous changes were noted in rats transferred with AchR-pulsed iDCs. The results suggest that iDCs could be generated by inducing bone marrow precursors in low dose of GM-CSF, AchRpulsed iDCs could induce tolerance of EAMG. The dysfunction of DCs may play an important role in the initiation and maintenance of normal immune response in MG.     

TGF—β1基因修饰的树突状细胞移植对EAMG大鼠T淋巴细胞IFN-γ／IFN-γR表达的影响

目的 探讨TGF-β1基因修饰的树突状细胞(DC)移植对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γ受体(IFN-γR)表达的影响.方法 近交系、8～10周龄、健康雌性Lewis大鼠25只,随机分为健康对照组、EAMG组、DC对照组、pcDNA3-TGF-β1表达质粒转染的DC(pcDNA3-TGF-β1-DC)组与生理盐水对照组5组.除健康对照组外,各组均采用丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体(AChR)蛋白二次免疫方法复制EAMG大鼠模型.初次免疫后第5天分别皮下注射2×106 DC、pcDNA3-TGF-β1-DC及等体积生理盐水,健康对照组和EAMG组不接受任何治疗.初次免疫后7周,分离脾脏T淋巴细胞,分别应用酶联免疫吸附试验和免疫组化方法检测T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γR表达水平.结果 (1)体外培养48 h后,健康对照大鼠T淋巴细胞上清液中IFN-γ水平很低,而EAMG组大鼠T淋巴细胞上清液中IFN-γ水平显著升高(P<0.001).pcDNA3-TGF-β1-DC治疗组IFN-γ水平与EAMG组差异无统计学意义(P>0.05).(2)健康对照大鼠T淋巴细胞经体外培养后可见少量IFN-γR阳性细胞,而EAMG组大鼠T淋巴细胞经体外培养后可见较多IFN-γR阳性细胞,其阳性细胞数及平均吸光度均明显高于健康对照组(P<0.001);pcDNA3-TGF-β1-DC组IFN-γR阳性细胞数较EAMG组明显增多,其阳性细胞平均吸光度亦明显高于EAMG组(均P<0.01).结论 EAMG组大鼠T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γR表达水平明显提高;pcDNA3-TGF-β1-DC治疗可进一步诱导IFN-γR表达,调节T淋巴细胞IFN-γ/IFN-γR表达可能是TGF-β1基因修饰的DC治疗EAMG的机制之一.     

实验性自身免疫性重症肌无力大鼠T淋巴细胞IFN-γ-iNOS-NO通路的研究

目的 探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠T淋巴细胞干扰素-γ(IFN-γ)-诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-一氧化氮(NO)通路的表达水平.方法 将大鼠随机分为EAMG组、正常对照组、完全弗氏佐剂(CFA)对照组.EAMG组大鼠分别于足垫、腹部及背部皮下多点注射丁氏双鳍电鳐的电器官乙酰胆碱受体(AChR)蛋白乳剂共1 ml,第4周再次注射上述乳剂;CFA对照组在相应时间、用相同的方法注射等量CFA;初次注射7周后,分离各组大鼠脾脏T淋巴细胞,体外培养48 h后取上清液分别应用酶联免疫吸附试验和Griess试剂法,检测IFN-γ和NO水平.结果 IFN-γ含量EAMG组为(81.68±10.23)pg/ml,正常对照组为(29.20±5.41)pg/ml,CFA对照组为(31.54±6.12)pg/ml;NO含量EAMG组为(23.68±7.13)μmol/L,正常对照组为(9.05±2.11)μmol/L,CFA对照组为(10.21±2.67)μmol/L;EAMG组IFN-γ和NO水平显著高于正常对照组和CFA对照组(均P＜0.01);正常对照组和CFA对照组间差异无统计学意义.结论 EAMG大鼠T淋巴细胞IFN-γ和NO分泌明显提高;T淋巴细胞IFN-γ-iNOS-NO通路异常可能与MG发病有关.     

白细胞介素-12对实验性自身免疫性重症肌无力耐受的影响

目的探讨白细胞介素(IL)-12对未成熟树突状细胞(iDC)诱导实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)耐受的影响。方法采用乙酰胆碱受体(AChR)负载的iDC接种Lewis大鼠,IL-12组大鼠在接种DC的同时和次日分别给予重组大鼠白细胞介素-12(rrIL-12)腹腔注射,200 ng/次。3周后以AChR和完全福氏佐剂(CFA)进行免疫,观察免疫7周后大鼠重症肌无力(MG)相关指标的改变。结果接种AChR负载的iDC的大鼠和健康大鼠经AChR和CFA免疫后MG相关指标无明显改变;而经IL-12干预的大鼠和EAMG对照组大鼠均产生明显的MG症状,重复电刺激出现明显衰减,血清AChR抗体滴度明显增高,神经肌肉接头呈现典型的MG样改变。结论 IL-12可阻止AChR负载的iDC诱导EAMG耐受,提示DC功能异常和IL-12可能在MG异常免疫反应的启动机制中具有重要作用。     

未成熟树突状细胞对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响

目的:探讨未成熟树突状细胞(DC)对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响。方法:通过诱导Lewis大鼠骨髓前体细胞,获取未成熟(iDC)和成熟(mDC)两种状态的DC;将两种DC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后进行T细胞重复刺激、交叉刺激和无关抗原刺激试验,观察T细胞增殖情况并测定T细胞IFN-γ、IL-12的表达水平。结果:(1)AChR负载的iDC可明显抑制T细胞增殖,且这种被抑制的T细胞对AChR负载的mDC的交叉刺激也不引起增殖,但对无关抗原OVA负载的mDC的刺激可产生明显增殖。(2)与mDC组比较,AChR负载的iDC初次和重复刺激均明显抑制T细胞IFN-γ和IL-12的表达。结论:iDC可诱导抗原特异性T细胞耐受,耐受机制可能与Th1细胞因子IFN-γ和IL-12的抑制有关。