肺炎链球菌诱导SPLUNC1表达及白藜芦醇对SPLUNC1表达的影响

目的 探讨肺炎链球菌(SP)感染时短腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)的宿主防御作用,及白藜芦醇(Res)对SPLUNC1表达的影响,为SP感染性疾病的治疗提供新的思路。方法 根据感染复数(MOI)不同将SP感染BEAS-2B细胞分为对照组、MOI20 SP组和MOI50 SP组;根据Res药物浓度不同将Res预处理MOI20 SP感染BEAS-2B细胞分为12.5Res+SP组、25Res+SP组、50Res+SP组(Res终浓度分别为12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L)。通过CCK-8法检测细胞活性,并选出SP、Res最佳作用浓度及时间。正式实验分为对照组、Res组、SP组和Res+SP组,采用实时定量PCR法和ELISA法检测各组SPLUNC1 m RNA及蛋白表达。结果 随SP感染时间延长,细胞活性呈降低趋势;与对照组和MOI20 SP组相比,MOI50 SP组细胞活性有下降趋势;与MOI20 SP组相比,25Res+SP组细胞活性增强(P0.05),50Res+SP组细胞活性降低(P0.05)。以MOI20 SP菌悬液和25μmol/L Res进行正式实验。SP组和Res+SP组随感染时间延长,BEAS-2B细胞SPLUNC1m RNA水平表达先增高,后降低(P0.05);与SP组相比,各时间点Res+SP组SPLUNC1 m RNA及蛋白表达水平均增高(P0.05);与对照组相比,仅Res组SPLUNC1 m RNA及蛋白表达水平随时间延长未见明显改变(P0.05)。结论 SP感染可以诱导SPLUNC1表达,发挥宿主防御作用,Res可以在感染发生时上调SPLUNC1的表达,以浓度及时间依赖的方式加强细胞保护。     

儿童支气管哮喘急性发作临床特征及其年龄差异分析

目的 探讨儿童支气管哮喘急性发作及不同年龄发作的特点,以预防及控制其发作。方法 收集2013年1月~2015年12月笔者医院哮喘急性发作住院患儿395例,分成<5岁组和≥5岁组两组,对患儿的一般资料、流行病学、诱发因素、呼吸道感染及病原谱、过敏原、并发症进行比较分析。结果 入组病例平均年龄4.25±2.51岁,男女性别比例为2.06：1,住院高峰季节为秋季,合并呼吸道感染367例（92.91%）,入院前已确诊哮喘113例（28.61%）,长期规范治疗随访31例（7.85%）。与≥岁组比较,<5岁组易合并呼吸道感染（χ²=9.856,P=0.007）,且更易合并肺炎（χ²=9.846,P=0.002）。<5岁组呼吸道合胞病毒检出率明显增高（χ²=10.870,P=0.001）,但支原体感染检出率两组之间比较,差异无统计学意义（χ²=3.090,P=0.079）。并且<5岁组住院前诊断哮喘率（χ²=16.742,P=0.000）、长期规范治疗随访率（χ²=12.948,P=0.000）均明显低于≥5岁组。结论 呼吸道感染、未早期规范诊治是儿童支气管哮喘急性发作主要诱因。<5岁幼儿哮喘急性发作更易并发呼吸道感染,易合并肺炎及呼吸合胞病毒感染,并且住院前诊断率及长期规范治疗依从性均较低。     

温州地区婴幼儿急性下呼吸道感染病毒病原学分析

急性下呼吸道感染是婴幼儿时期的常见病,其中病毒感染占有相当大的比重,并呈一定的季节性流行趋势。但由于病毒实验室诊断手段的限制,我国许多地区仍缺乏多种病毒病原学的可靠监测资料,且各地区的流行病学又不尽一致,温州地区关于呼吸道病毒病原的完整实验室资料更是缺乏。本院     

儿童哮喘诊断治疗中存在问题探讨

支气管哮喘严重影响着儿童的身心健康,而且造成缺课、学习成绩下降、活动受限、生活质量下降、家长缺勤和医疗费用的增加,WHO将其列入21世纪急需防治的重大疾病之一,得到了各国政府和医学界的高度重视。随着《全球哮喘防治的创议》(Global Inmative for Asthma,GINA)方案在各国的推广和实施,使全球哮喘的诊断和治疗统一化和规范化。在我国儿童哮喘的诊疗亦取得了一定的成效,但同时还存在着一些问题,现针对存在的问题加以探讨分析。     

儿茶酚雌激素介导慢性间歇低氧诱导OSAHS雌性大鼠遗尿模型的建立

目的：利用慢性间歇低氧（CIH）诱导建立阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）遗尿雌性大鼠模型,并探讨儿茶酚雌激素（CE）在CIH诱导的OSAHS遗尿中的作用。方法：选取6周龄SD雌性大鼠16只,随机分成CIH组和对照组,每组8只。实验组置于常压间歇低氧舱,对照组置于同等条件下的空气模拟对照舱,均放置4周。监测24 h进水及排尿量;测定血清中CE,儿茶酚胺类化合物如肾上腺素（Adr）、去甲肾上腺素（NA）和多巴胺（DA）含量及其儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）活性;测定排尿阈;留取膀胱行HE及Weigert染色,光镜下观察组织学变化。结果：CIH组大鼠氧舱外进水量及排尿量与对照组比,差异无统计学意义（P＞0.05）。但CIH组大鼠氧舱内排尿量明显增加,血清中CE、Adr、NA和DA含量明显增高,而COMT的活性明显降低,排尿阈明显降低,膀胱组织光镜下显示膀胱逼尿肌肌束排列紊乱、疏松,部分肌束断裂。结论：CIH可诱导雌性大鼠发生遗尿,伴有排尿量增多,排尿阈降低,血清中儿茶酚胺类化合物含量增高,而COMT的活性降低,与儿童OSAHS诱发遗尿的临床症状相似,提示通过CIH诱导建立OSAHS遗尿雌鼠模型基本可行。     

Toll样受体与支气管哮喘免疫调控

Toll样受体 (TLRs)是一种属于I型跨膜蛋白的天然免疫模式识别受体。近年来发现TLRs参与多种媒介组分的识别 ,且TLRs信号激活通过转接蛋白MyD88和 /或TIRAP/Mal依赖性通路诱导树突细胞成熟、促进T细胞分化和调节肥大细胞反应 ,成为联系天然免疫和适应性免疫的桥梁 ,从而在哮喘免疫调控中起重要作用。     

哮喘大鼠TGF—β1／Smad3信号通路中黄芪与激素调控的对比研究

目的：观察黄芪、糖皮质激素对哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路及哮喘气道重塑的对比调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠50只随机分为5组,分别为对照组（A组）、哮喘组（B组）、布地奈德组（C组）、地塞米松组（D组）、黄芪组（F组）,每组10只。用卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立大鼠哮喘模型。应用图像分析技术测定肺内支气管壁厚度（Wat）及平滑肌厚度（Wam）等重塑指标;免疫组化法检测肺组织TGF—β1、P—Smad3蛋白的表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中TGF—β1的浓度。结果：干预组大鼠Wat、Warn较哮喘组显著性降低（均P〈0．01）,C组、D组Wat比较无显著性差异,但均低于黄芪组（均P〈0．01）;C组、D组Wam比较无显著性差异,D组Wam较F组有降低;免疫组化染色阳性结果呈棕黄色,TGF-β1蛋白表达于胞浆,P—Smad3蛋白表达于胞浆和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。干预组TGF-β1的蛋白表达均显著低于哮喘组（P〈0．05或P〈0．01）;C组、D组、F组比较无显著性差异,P—Smad3蛋白表达：各干预组均显著低于哮喘组（均P〈0．01）,C组、F组之间无显著性差异,D组较F组降低（P〈0．01）;干预组血清、BALF中TGF—β1浓度与哮喘组比较有降低（均P〈0．01）,BALF中C组、D组、F组比较无显著性差异,血清中C组、D组无显著性差异,但均低于F组（P〈0．05或P〈0．01）。结论糖皮质激素、黄芪可通过调控TGF-β1／Smad3信号通路而拮抗气道重塑,但黄芪效果比糖皮质激素稍差。     

糖皮质激素、香菇多糖对哮喘气道重塑大鼠肺组织c-Jun氨基末端激酶表达的影响

 目的 研究糖皮质激素、香菇多糖（lentinan,LNT）对哮喘气道重塑大鼠肺组织c-Jun氨基末端激酶（JNK）表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘组、布地奈德（BUD）组、地塞米松（DXM）组、LNT组,以卵白蛋白致敏和激发复制哮喘气道重塑模型,干预组分别于每次雾化激发前以BUD雾化或DXM、LNT腹腔注射干预,正常对照组以生理盐水代替卵清白蛋白致敏和激发。留取支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞分类计数。采用图像分析技术测定支气管壁厚度（Wat）和平滑肌厚度（Wam）,免疫组化（IHC）检测肺内磷酸化JNK（p-JNK）蛋白表达,WESTERN BLOT检测肺匀浆p-JNK表达,直线相关分析肺组织p-JNK蛋白平均吸光度（A_m）与BALF中嗜酸性粒细胞百分比（EOS%）的相关性以及Wat、Wam与p-JNK蛋白的相关性。 结果 哮喘组BALF中EOS%显著高于正常对照组（P＜0.01）,各干预组EOS%均显著低于哮喘组（均P＜0.01）,但仍高于正常对照组（P＜0.05或P＜0.01）;哮喘组气道壁厚度较正常对照组显著增加,各干预组可抑制气道壁增厚;BUD、DXM组Wam比较,无显著性差异（P＞0.05）,二者均低于LNT组（均P＜0.01）;BUD、LNT组Wat比较无显著性差异（P＞0.05）,但均比DXM组高（P＜0.05或P＜0.01）;IHC显示p-JNK蛋白主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞及散在炎性细胞的胞浆和胞核;IHC、WESTERN BLOT检测均显示哮喘组肺组织p-JNK蛋白表达增高;BUD、DXM、LNT均可抑制JNK磷酸化;BUD、DXM组p-JNK表达均较LNT组低（均P＜0.01）;肺组织p-JNK A_m与BALF中EOS%呈显著正相关（P＜0.01）,Wat、Wam与p-JNK A_m均呈显著正相关（均P＜0.01）。结论 BUD、DXM、LNT有减轻哮喘气道EOS炎症,抑制哮喘气道重塑的作用,其机制可能与其下调JNK表达有关;LNT抑制气道重塑的作用较糖皮质激素弱。     

儿童肺吸虫病21例临床分析

目的 分析肺吸虫病的临床特征,以提高临床诊治水平,减少误诊误治.方法 回顾1998～ 2012年在温州医学院附属育英儿童医院确诊的21例不同类型的儿童肺吸虫病,分析其临床表现及诊疗情况.结果 21例患儿中15例有明确生食、醉吃或烤吃溪蟹、淡水虾史,6例有常饮用生溪水或捕捉溪蟹史.11例为多浆膜腔积液,表现为不同程度的胸腔积液、腹腔积液和心包积液.3例为肺吸虫脑病,1例同时存在多浆膜腔积液和肺吸虫脑病.1例皮下结节,1例同时存在多浆膜腔积液和皮下结节.21例患儿外周血嗜酸性粒细胞绝对数及百分比均升高(最高达72％),14例行血清总IgE检测患儿其数值明显高于正常.6例肺吸虫抗原皮试阳性,11例肺吸虫血清抗体阳性,4例肺吸虫抗原皮试和血清抗体均阳性.结论 儿童肺吸虫病临床表现复杂多样,应详细询问病史尤其是生活饮食习惯,结合血嗜酸性粒细胞计数、影像学及免疫学检查做到早诊断早治疗.     

2013年我国儿童呼吸系统疾病研究进展

<正>儿童呼吸系统疾病是一类常见病、多发病,对该领域年度研究进展的综述,有助于儿科医师更好了解该类疾病的最新研究现状。本研究团队曾分别就2009年、2010年和2011年对我国儿童呼吸系统疾病的研究进展进行综述[1-3]。2013年我国儿童呼吸系统疾病的研究在临床和基础方面均取得新进展,笔者拟就2013年我国儿童呼吸系统疾病的主要研究进展总结如下。1儿童呼吸系统疾病相关指南的制定