辛伐他汀对鼠心脏成纤维细胞DNA合成的影响

目的探讨辛伐他汀(Sim)对新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFs)DNA合成的影响及甲羟戊酸(MVA)的干预效应。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定DNA合成,观察不同浓度Sim及MVA分别作用不同时间对CFsDNA合成功能的影响。结果 (1)CFs的3H-TdR掺入率随着Sim干预浓度的增加而降低,其中10-6和10-5mol／L Sim组的3H-TdR掺入率分别为(1175±202．66)、(771±164．86)cpm／2000细胞, 显著低于对照组的(1608±204．32)cpm／2000细胞(均P<0．01);(2)10-5mol／L Sim作用CFs 6、12、18、24、30、36、42、48 h, 随着Sim作用时间的延长,CFs的3H-TdR掺入率呈递减趋势,与时间呈明显的负相关(r=-919,P<0．01);(3)CFs的3H-TdR 掺入率随着MVA干预浓度的增加呈进行性上升,其中10-4、10-3 mol／L MVA 10-5 mol／LSim组3H-TdR掺入率分别为 (1612±308．57)、(1995±353．83)cpm／2000细胞,显著高于对照10-5mol/L Sim组的(771±164．86)cpm／2000细胞(P<0．01); (4)10-3 mol／L MVA分别作用CFs 6-48 h,CFs的3H-TdR掺入率随着MVA作用时间的延长而逐渐增加,呈明显的正相关(r=0．968,P<0．01)。结论 Sim呈浓度-时间依赖方式抑制CFs DNA的合成且可被MVA拮抗,提示Sim可抑制CFs 增殖,延缓心肌纤维化,其作用可能通过MVA途径实现。     

心脏科教学中的网络教育探讨

分析了心脏科教学的特点,结合网络教育的优势,探讨了网络教育在心内科教学中的应用前景以及面临的一些问题     

人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :制备抗人心肌肌钙蛋白 I(c Tn I)单克隆抗体 (c Tn I Mc Ab)并进行初步鉴定。 方法 :从健康意外死亡者的心肌中提取、纯化人 c Tn I,以其为抗原 ,免疫 BAL B/ c小鼠后 ,取其脾淋巴细胞与小鼠 Sp2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,反复筛选及克隆 ,得到能稳定分泌 c Tn I Mc Ab的杂交瘤细胞株。初步鉴定 c Tn I Mc Ab。结果 :经间接 EL l SA法筛选 ,3次克隆化后获得 5株能稳定分泌 c Tn I Mc Ab的杂交瘤细胞 (3A7、3A 11、3D2、3F10和 1H9) ,5株单抗免疫球蛋白亚类鉴定均为 Ig G2 a类。染色体数目 92～ 110条。 5株单克隆抗体腹水按 1∶ 10 0稀释 ,与 L DH、CK、CK- MB、AST和人心肌肌钙蛋白 T(c Tn T)行交叉反应为阴性。 5株 c Tn I Mc Ab腹水效价为 3.2× 10 - 6 ～ 1.6× 10 - 7。c Tn I Mc Ab相加试验表明 ,3D2、3F10与 3A7、3A11、1H9能识别不同的抗原表位。 结论 :本实验成功制备了具有较高活性的 c Tn I Mc Ab,具有良好应用开发价值。     

心血管疾病细胞凋亡研究的进展

细胞凋亡 ( apoptosis) ,又称为细胞程序死亡( progremmed cell death) ,是一种细胞死亡的特殊形式 ,指在一定生理或病理条件下 ,有核细胞在复杂的调控机制下自身启动细胞内特定的程序 ,激活内源性 DNA内切酶 ,导致细胞自然死亡。此现象 1 0 0多年前 Carl Vogtp[1] 就已发现 ,1 972年Kerr等 [2 ] 首次命名为“apoptosis”,并初步分析其机制。在近几年的研究已证实细胞凋亡现象普遍存在心血管系统的许多生理及病理变化中 ,相信随着研究的进一步深入 ,人们会越来越认识到细胞凋亡与心血管疾病关系的重要性。1　心脏与细胞凋亡1 .1　细胞凋…     

人心肌肌钙蛋白T亚型的克隆及表达

目的 构建人心肌肌钙蛋白T(cTnT)亚型的重组载体。 方法 应用RT-PCR技术,从人胚胎心肌组织中扩增cTnT1及cTnT2基因,连接到T Easy vector载体上,筛选重组子。结果 成功地扩增出cTnT1（764 bp）及cTnT2(124)基因片段,经测序证实,构建pExSecI-cTnT1表达载体并获得表达。结论 获得单一亚型的cTnT1及cTnT2基因片段,为研究心力衰竭时的胚胎型基因重构与发病关系提供了依据。     

高温复合脂多糖应激大鼠血浆MDA、SOD的变化规律

目的:探讨高温与脂多糖(LPS)复合应激大鼠血浆丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力等指标的变化规律.方法:雄性SPF级Wistar大鼠随机分为常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温LPS组(L组)、高温LPS组(HL组),各组下设0、40、80、120 min亚组,每组5只.置动物于模拟气候舱,HL组、H组干球温度(dry bulb temperature, Tdb)为(35.0±0.5)℃,L组、C组Tdb为(26.0±0.5)℃;HL组、L组动物经尾静脉注射LPS 10 mg/kg (浓度为1 mg/ml),H 组、C组动物经尾静脉注射0.9% NaCl 10 ml/kg.检测动物应激0、40、80、120 min时血浆MDA含量、SOD活力的变化.结果:应激120 min时,L组、H组、HL组动物血浆MDA含量、SOD活力均与C组存在显著性差异(P<0.05);HL组动物MDA水平显著升高,SOD活力水平显著下降,与同时相其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:高温与LPS复合应激可能促发、扩大全身炎症反应综合征.     

高龄与非高龄患者在冠状动脉支架置入术后抗血栓方案的比较

目的:评价以口服肠溶阿司匹林片、氯吡格雷片及静脉滴注肝素的抗血栓方案,对老年患者冠状动脉支架术后应用的有效性及安全性。方法:145例患者,其中≥70岁的高龄组患者63例,<70岁的非高龄组患者82例,均在冠状动脉支架术后使用上述的抗血栓方案。观察出血的并发症及冠状动脉内急性或亚急性血栓形成的发生率。结果:高龄组中发生皮下及尿路出血各2例(3.2%),非高龄组各3例(3.7%),2组间均差异无统计学意义(P>0.05)。高龄与非高龄组中均有1例(1.7%,1.2%)发生冠状动脉内血栓形成,差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:只要严密观察及控制抗血栓指标,对高龄患者冠状动脉支架术后口服肠溶阿司匹林片、氯吡格雷片及静脉滴注肝素的抗血栓方案是安全有效的。     

尾加压素对人单核巨噬细胞DNA、RNA及蛋白质合成的影响

目的：观察新近发现最强的缩血管活性肽之一的尾加压素对体外培养的人单核巨噬细胞DNA,RNA及蛋白质的合成过程的影响.方法：实验于2004-10/12在南方医科大学心内科实验室及广州军区总医院中心实验室完成.取健康自愿者50 mL新鲜静脉血,用聚乙酰胺吡咯烷酮包被的硅胶颗粒液（d=1.130）分离单核细胞.采用24孔塑料培养板,每孔加入有巨噬细胞特性、浓度为2&;#215;105 个/mL细胞0.5 mL,随机分成4组.分别加入1&;#215;10-8,1&;#215;10-9,1&;#215;10-10,0 mmol/L尾加压素,每组再随机分成3小组,分别加入3H-Leu,3H-TdR,3H-UR 3.7&;#215;10 10Bq/mL.培养7 d,分别于第1、4、7天测定样品3H-Leu,3H-TdR,3H-UR的放射性,并分别代表蛋白质、RNA、DNA的合成状态.细胞蛋白含量测定：将细胞培养于8孔塑料培养板中,随机分成4组,培养至第3天分别加入1&;#215;10-8,1&;#215;10-9,1&;#215;10-10,0 mmol/L尾加压素,继续培养4 d,收集细胞.Lowery法常规测细胞蛋白含量.结果：①在RPMI 1640＋300 mL/L自体血清中,细胞生长、成熟、分裂状态良好,细胞合成DNA、RNA、蛋白质迅速,尤以3H-UR掺入作用较强.②成熟的人单核巨噬细胞与1&;#215;10-8,1&;#215;10-9,1&;#215;10-10,0 mmol/L浓度范围的尾加压素孵育24 h,未见细胞有形态学改变.1&;#215;10-10 mmol/L浓度尾加压素在24 h时即对3H-UR,3H-TdR掺入有抑制作用,随浓度升高和时间延长,作用均加强;且在1&;#215;10-9,1&;#215;10-8,mmol/L浓度下对RNA作用较DNA强（0.608&;#177;0.005,0.730&;#177;0.007,t=18.8,P＜0.01;0.500&;#177;0.007,0.571&;#177;0.004,t=10.4,P＜0.01）.③加入1&;#215;10-8,1&;#215;10-9,mmol/L浓度尾加压素与未加入尾加压素组比较对蛋白质的合成有抑制作用[（22.4&;#177;0.707）&;#215;10-3,（32.5&;#177;0.634）&;#215;10-3 dpm,t=23.8,P＜0.01;（27.35&;#177;0.636）&;#215;10-3,（32.5&;#177;0.634）&;#215;10-3 dpm,t=12.8,P＜0.01],但对蛋白质合成的抑制作用明显低于对DNA,RNA合成的抑制作用（0.688&;#177;0.003,0.571&;#177;0.004,0.500&;#177;0.007,t=12.3,17.5,P＜0.001;0.840&;#177;0.007,0.730&;#177;0.007,0.608&;#177;0.005,t=9.6,31.2,P＜0.001）.④1&;#215;10-8 mmol/L尾加压素与成熟人单核巨噬细胞共同作用4 d,与未加入尾加压素组比较,细胞的蛋白质含量显著降低（0.225&;#177;0.012,0.319&;#177;0.027,t=5.76,P＜0.001）,并呈浓度依赖性.结论：尾加压素在1&;#215;（10-10～10-8）mmol/L浓度范围内对单核巨噬细胞DNA,RNA合成有明显抑制作用,对RNA较强,对蛋白质作用较弱;其与成熟过程中人单核巨噬细胞较长时间孵育时,对蛋白质合成抑制作用变明显.尾加压素抑制单核巨噬细胞DNA,RNA,蛋白质合成代谢,从而影响细胞生长、分裂增殖及免疫吞噬等功能.     

频谱多谱勒技术评价冠心病人心室舒张功能

目的：采用频谱多谱勒技术观察冠心病人心室舒张功能改变。方法：冠状动脉造影确诊为冠心病患者61例，根据左室射血分数（EF）分为EF正常组（Ⅰ组，EF≥50％，33例），EF降低组（Ⅱ组，EF〈50％，28例）。正常对照组32例。频谱脉冲多普勒技术测量各组二尖瓣、三尖瓣血流频谱及肺静脉血流频谱参数；心导管测量冠心病组左室舒张末压（LVEDP）。结果：冠心病Ⅰ组左、右室舒张功能均可出现障碍，多呈松弛功能异常；冠心病Ⅱ组左室舒张功能障碍，多呈假性正常化；PVad-Ad与LVEDP呈正相关（r=0．72，P〈0．01）；以PVad-Ad〉0ms为标准来鉴别二尖瓣频谱假性正常化，敏感性为92％，特异性为80％；左右室舒张功能相关性分析（E／A：r=0．46，DT：r=0．54，P〈0．01）。结论：冠心病早期收缩功能正常时，左、右室舒张功能均可出现障碍；左室收缩功能异常时，左室舒张功能进一步减退，多呈假性正常化；PVad-Ad能准确地鉴别二尖瓣血流频谱假性正常化；冠心病人左右室舒张功能有较显著的相关性。     

经皮外周血管介入并溶栓治疗外周动脉闭塞症

目的:探讨经皮腔内血管成形术(PTA)并溶栓治疗急性外周动脉闭塞症的可行性。方法:经血管造影证实为外周动脉闭塞症患者13例,住院后行外周血管PTA或支架植入术,开通血管后,继以尿激酶动脉内灌注溶栓治疗。结果:闭塞血管开通率100%,死亡率7.7%,临床疗效好,近期(3个月)内未见复发者。结论:PTA联合溶栓治疗急性外周动脉闭塞症安全,可行。