神经保护蛋白同源基因在阿尔茨海默病大鼠海马中的表达

目的：探讨活性依赖性神经保护蛋白（activity-dependent neuroprotective protein,ADNP)同源基因的表达与阿尔茨海默病的关系。方法：采用淀粉样β-肽注射大鼠脑室，制备阿尔茨海默病样损伤大鼠模型，15d后通过RT－PCR方法检测大鼠脑海马胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase,ChAT)基因，活性依赖性神经保护蛋白基因及Mn-SOD,Cu,Zn-SOD基因的表达。结果：胆碱乙酰转移酶，ADNP基因的表达在实验组海马中均下降，Cu,Zn,-SOD基因的表达没有明显变化，而Mn-SOD则有所升高。结论：结果提示ADNP表达降低，使神经细胞缺乏保护因素，与阿尔茨海默病的发生发展相关。     

MPTP对小鼠和淀粉样蛋白对大鼠处理后相关脑区NAP1基因表达的影响

目的 研究1－甲基－4－苯基－1，2，3，6－四氢吡啶（MPTP）和β－淀粉样蛋白（Aβ）对小鼠或大鼠相关脑区核小体组装蛋白－1（NAP－1）基因表达的影响。方法 通过MPTP腹腔注射诱导C57BL小鼠产生类似帕金森病症状，Aβ脑室注射诱导SD大鼠产生类似阿尔茨海默病症状，利用逆转录PCR方法检测小鼠黑质与纹状体及大鼠皮质与海马NAP－1mRNA丰度的变化。结果 在小鼠中，MPTP导致黑质NAP－1基因表达显著降低，而对纹状体NAP－1的表达没有明显影响。在大鼠中，Aβ对海马与皮质NAP－1基因的表达均无明显影响。结论 NAP－1很可能参与了MPTP诱导的神经元调亡过程，但在Aβ诱发的神经元凋亡过程中可能不起作用。     

1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶致黑质多巴胺能神经元变性的分子机制的研究

目的：初步研究1－甲基4－苯基－1,2,3,6－四氢吡啶（MPTP）致黑质多巴胺能神经元变性的分子机制,方法：采用MPTP腹腔注射制备帕金森病褐鼠模型,利用mRNA差异显示技术获得在实验组及正常对照组黑质中差异表达的基因片段,应用反Northern杂交去除假阳性,对真阳性的表达序列标签（EST）进行克隆,测序及同源性比较,结果：用1个随机引物和锚定引物对进行差示反应,在实验组获得2个黑质特异表达的EST,其中1个被克隆,测序,为121bp,与人基因abl外显子1b有低的同源性,结论：MPTP致黑质社经元变性可能是通过改变促神经元凋亡基因表达而起作用。     

左侧视网膜剥夺鸽右视盖差异表达基因的克隆与鉴定

采用抑制消减杂交技术构建左侧视网膜剥夺后右视盖基因差异表达的文库 ,研究在无光刺激的条件下视盖发育受阻的分子机制。随机测序 2 1个序列 ,6个序列经反 Northern证实为真阳性 ,3个序列未发现明确的同源序列 ,另外 3个分别与 homosapiens SH3 GL2、G.domesticaus、 transthyretin有较高的同源性。 2 1个序列中 ,11个基因片段被分配序列号。这些结果为深入研究视觉发育提供了有益的线索     

大鼠小脑部分表达序列标签的鉴定

目的:为了获取大鼠小脑特异表达的cDNA序列,筛选新的EST基因片段,以便进一步获取有意义的cDNA全基因。方法:以大鼠大脑、脑干mRNA逆转录cDNA作为driver(驱动)cDNA,大鼠小脑mRNA逆转录cDNA作为tester(测试)cDNA,经消减杂交法,消除与大脑及脑干相同的cDNA,并富集低丰度基因,从而获得大鼠小脑特异表达基因片段,以及低表达基因片段,克隆制备成大鼠小脑特异表达cDNA文库。结果:共挑选出32个阳性克隆质粒,测序得到34个不同基因片段的序列。最后用反Northern杂交去除假阳性,筛选出8个有意义的差异表达cDNA基因片段。同时,将测序结果与Genbank进行同源性比较,发现13个新的EST序列,并申请获得基因序列号(AW288461-AW288474)。结论:抑制消减杂交法是一种筛选特异表达基因的有效方法。本结果可为研究脑功能的分子机制提供有益的资料。     

自人脑胶质瘤cDNA文库克隆与鼠SH2-B同源基因片段

目的自人脑胶质瘤文库克隆新的表达序列标签.方法以人脑胶质瘤文库为模板,利用生长休止特异基因的5′特异引物与载体特异引物组合进行PCR扩增,对目的片段进一步克隆、测序.结果扩增出一个328 bp的片段,同源性分析发现该片段与鼠SH2-B有86%的同源性.结论 SH2-B是生长激素信号转导途径中酪氨酸激酶JAK2的底物,推测得到的基因片段可能介导胶质瘤的发生、发展过程中的某些信号转导途径,需克隆其cDNA序列并研究其基因表达产物的功能方可证实.     

实验性动脉粥样硬化家兔主动脉ApoB胆固醇及血浆ApoB之间的相关性

通过复制家兔动脉粥样硬化(As)模型,用自制豚鼠抗兔ApoB血清,探讨病变程度不同的各主动脉节段上ApoB的分布及其与Ch沉积量之间的相关性及二者与血浆ApoB之间的相关性。同时还测定了血浆TC、HDL-C及TG水平。实验组主动脉ApoB高于对照组,且弓段>胸段>腹段(P均<0.01),对照组未测出;在病变较严重的节段ApoB与Ch含量呈直线正相关(r弓段=0.860,r胸段=0.737),而病变较轻节段不相关(r腹段=0.467)。血浆ApoB与主动脉ApoB(r=0.895)及Ch(r=0.827)呈高度直线正相关。血浆ApoB与TC的升高不平行,ApoB的上升较TC为稳定。     

单眼视网膜摘除鸽视盖差异表达基因的筛选

目的　筛选单眼剥夺鸽视盖差异表达的基因。　方法　采用抑制消减杂交技术构建左侧视网膜剥夺后左视盖基因差异表达的文库 ,对部分重组克隆进行序列分析 ,反Northern进一步去除假阳性。　结果　随机测序 15 0个表达序列标签 ,16个表达序列标签经反Northern证实为真阳性 ,包括与基因库已知基因同源的及未发现明确的同源序列 ,138个基因片段已申请序列号。　结论　视盖差异表达基因的研究为深入研究视觉发育、视中枢的分子构筑提供有益的线索