凋亡抑制因子survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的研究凋亡抑制因子survivin在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其临床意义.方法采用免疫组化法(S-P法),检测54例BTCC和8例正常膀胱组织中survivin的表达,分析其表达情况并与肿瘤病理学分级、临床分期和患者复发等情况的关系.结果 Survivin在正常膀胱组织中不表达,在BTCC中有不同程度表达,其表达随BTCC的病理分级、临床分期的增高而相应增高,复发BTCC表达明显增高.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级BTCC表达率分别为54.5%、75.0%、81.8% (P<0.05);浅表性(T1～T2)、浸润性(T3～T4) BTCC表达率分别为69.6%、87.5% (P<0.05);未复发、复发BTCC表达率为61.8%、90.0% (P<0.01).结论 Survivin在BTCC组织中表达上调, survivin随BTCC病理分级、分期增高而表达增高,并与肿瘤复发有关.Survivin有望成为判断分级、分期和监测复发的指标.     

骨肉瘤中APE1的表达及其与血管生成的关系

目的探讨APE1在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系.方法采用免疫组化S-P法检测10例正常骨、10例良性骨瘤和60例骨肉瘤组织中APE1、CD34和FⅧ-Rag等蛋白表达,并根据CD34和FⅧ-Rag染色结果计数微血管密度.结果 APE1蛋白表达主要定位于肿瘤细胞的胞核,骨肉瘤中APE1显著高于正常骨(P<0.05),60例骨肉瘤中43例(72%)呈高表达,17例呈低表达,APE1强表达组中的MVD显著高于弱表达组(P<0.01).结论 APE1在骨肉瘤中过度表达与骨肉瘤分化以及微血管密度密切相关,有可能作为骨肉瘤抗血管生成治疗中一个新的靶向分子.     

大肠癌组织中VEGF-D的表达及其与淋巴结转移和预后的关系

目的:探讨血管内皮生长因子(vascu-lar endothelial growth factor, VEGF) D在大肠癌组织中的表达及其与临床病理和预后的关系。方法:应用免疫组化SP法检测96例大肠癌组织中VEGF D的表达,并分析其与大肠癌临床病理和预后的关系。结果:96例大肠癌组织VEGF D阳性表达率为38 54%(37/96),明显高于癌旁正常组织的 13 54%(13/96),P=0 .000 1。大肠癌VEGF- D表达与大肠癌分化程度、淋巴结转移、Duke’s分期及患者预后密切相关,P< 0 .01 或 P< 0. 05 (P 值分别为0 .026 9、0. 002 3和 0. 004 2)。低分化大肠癌VEGF D阳性率8 33%(1/12),明显低于高分化大肠癌的 48. 15% ( 26/54 ),P= 0. 026 9。Duke’s分期的 C期和 D期 VEGF D阳性率54 35%(25/46),明显高于 A 期和 B 期的24 00%(12/50),P=0 004 2。VEGF D阳性病例组淋巴结转移率62 16%(23/37),明显高于阴性组的 30 51% (18/59),P= 0. 002 3。VEGF D阳性组 5 年生存率 48 .65%,显著低于阴性组的 69. 49%,P= 0 .029 1。但是VEGF -D表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、部位、浸润深度及远处器官转移无关,P>0 05(P值为别为 0 142 1、0. 467 9、0 131 9、0 .831 1、0 .107 0和0 .340= 5)。结论:VEGF-D可能通过诱导淋巴管生成促进大肠癌淋巴结转移,并且可以作为指导大     

锌指蛋白A20转基因预处理对小鼠内毒素血症肺组织炎症损伤的影响

内毒素性急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)是严重创伤或感染后出现最早、发病率最高的并发症之一.     

siRNA重组腺病毒增强贝伐单抗对移植骨肉瘤的治疗作用

目的：探讨以DNA损伤修复基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶基因（apurinic/aprimidinic endonuclease1,APE1）为靶点的siRNA在骨肉瘤治疗中的作用及其与贝伐单抗（bevacizumab,Avastin）的协同效应。方法：建立人骨肉瘤9901细胞荷瘤裸鼠模型,16只荷瘤鼠随机分为4组：EGFP对照组,APE1 siRNA治疗组,Avastin治疗组和联合治疗组（Avastin+APE1 siRNA）。观察移植瘤生长情况并计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤组织微血管密度和Ki67表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,激光共聚焦检测肿瘤组织的缺氧状态,Western blotting检测肿瘤组织内VEGF蛋白的表达。结果：与APE1 siRNA治疗组和Avastin治疗组相比,Avastin+APE1 siRNA治疗组的抑瘤率显著增加（P<0.01）。各治疗组的微血管密度及Ki67表达明显低于对照组,且Avastin+APE1 siRNA治疗组微血管密度和Ki67表达显著低于单独治疗组（P<0.01）。各治疗组的凋亡指数明显高于对照组,且Avastin+APE1 siRNA治疗组明显高于单独治疗组（P<0.01）。APE1siRNA或Avastin治疗均可引起肿瘤组织缺氧,抑制肿瘤组织中VEGF的表达,Avastin+APE1 siRNA治疗效果更加明显。结论：以APE1为靶点的siRNA能显著抑制裸鼠移植骨肉瘤的血管生成和瘤体生长,并诱导肿瘤细胞凋亡,且与Avastin具有协同作用。     

基于Bayes法的C-12蛋白芯片联合检测判别函数的建立及临床意义分析

目的 结合C-12蛋白芯片检测结果 ,采用Bayes法建立多肿瘤标志物判别函数,以明确肿瘤类型,提高肿瘤诊断准确率;比较多肿瘤标志物判别函数与C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统的差异及对肿瘤诊断的临床意义.方法 用C-12蛋白芯片法检测2 177例恶性肿瘤患者(肺癌836例,肝癌318例,胰腺癌84例,胃癌123例,肠癌338例,乳腺癌206例,卵巢癌47例,子宫内膜癌28例,食管癌197例)和2 111例正常及患良性疾病的非肿瘤患者的12项常见肿瘤标志物,并结合临床资料进行回顾性研究.应用Bayes法建立肿瘤判别诊断函数,比较12种肿瘤标志物和判别诊断函数对肿瘤诊断的准确率差异.结果 成功建立了多肿瘤标志物的三级诊断判别函数.一级判别函数诊断的特异度为82.11%,灵敏度为71.28%,准确率为83.97%,而C-12蛋白芯片法检测12项肿瘤标志物的特异度为70.11%,灵敏度为66.10%,准确率为68.07%.二级判别甬数能显著提高10种常规肿瘤诊断的灵敏度、特异度和准确率.三级诊断判别函数对确定部分肿瘤的类型有意义.结论 基于Bayes法建立的C-12蛋白芯片联合检测判别甬数具有较高的灵敏度、特异度和准确率,对肿瘤的诊断具有重要临床价值.     

咖啡酸苯乙酯对人大肠癌HCT116细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的观察咖啡酸苯乙酯（CAPE）对人大肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法以大肠癌细胞株HCT116为研究对象,对20只BAL13／c裸鼠建立人大肠癌皮下移植瘤模型,随机分为对照组和治疗组各10只。治疗组以CAPE5mg／d,观察两组第7、14、21、28天皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化;治疗结束时取肿瘤组织及心、肝、肺、肾、肠等行病理组织学检查,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果CAPE对HCT116裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,与对照组相比,瘤体重量明显降低、体积减小（P〈0．01）,坏死面积显著增加,凋亡指数明显升高,但对裸鼠体重无明显影响,心、肝、肺、肾、肠等组织未见明显病理学改变。结论CAPE具有抑制人大肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用,可能与其诱导细胞凋亡有关。     

PD98059对肝癌HepG2细胞Tec信号转导作用的初步研究

目的探讨MEK1抑制剂PD98059对肝癌细胞株HepG2细胞中Tec(tyrosine kinase expressed in hepatocellular carcinoma)及ERK2作用.方法免疫细胞化学方法检测Tec、ERK2在HepG2细胞中的表达;用RT-PCR和Westernblot方法检测,不同浓度PD98059处理细胞后,HepG2细胞中的Tec、ERK2 mRNA及蛋白表达.结果Tec、ERK2在HepG2细胞中呈高表达,PD98059明显影响HepG2细胞Tec、ERK2 mRNA以及蛋白表达,呈剂量依赖性,40 μmol/LPD98059细胞抑制最明显.结论Tec可能是肝癌细胞内Ras/Raf/ERK信号转导途径上游的信号蛋白,与Ras/Raf/ERK信号转导通路存在着某种信号联系.     

骨肉瘤VEGF表达及VEGF抗体抑制血管生成的实验研究

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）表达与骨肉瘤血管生成和预后的关系,以及VEGF抗体抑制骨肉瘤细胞OS-732诱导血管生成的作用和可能机制,为以VEGF为靶点治疗骨肉瘤提供实验依据。方法应用免疫组化和形态计量方法,检测80例骨肉瘤VEGF表达、肿瘤微血管密度（MVD）,以及OS-732血管生成相关因子的表达。进一步应用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型观察VEGF抗体对OS-732诱导血管生成及肿瘤细胞生长的抑制作用。结果（1）骨肉瘤VEGF表达与肿瘤微血管密度（MVD）及预后密切相关。（2）OS-732表达VEGF和BFGF,而且VEGF表达强度明显高于BFGF,OS-732具有很强的诱导血管生成能力。（3）VEGF抗体干预实验结果显示VEGF抗体组肿瘤区血管密度明显低于PBS对照组,细胞凋亡指数显著高于PBS对照组,而增殖指数两组差异无统计学意义。同时,VEGF抗体组凋亡的微血管内皮细胞增多,增殖期内皮细胞少见。结论VEGF是骨肉瘤重要的血管生成因子,其表达可能是评估骨肉瘤预后的一项有价值的指标。VEGF抗体能够抑制内皮细胞增殖,促进内皮细胞凋亡,显著抑制骨肉瘤OS-732血管形成,并可能通过抑制血管形成而促进肿瘤细胞凋亡,达到抑制瘤细胞生长的作用。该结果提示VEGF可以作为骨肉瘤抗血管生成治疗的潜在靶分子。