药用植物叶绿体基因组研究

本文在总结植物叶绿体基因组测序研究进展基础上,提出了药用植物叶绿体基因组测序的策略,对物种的选择,测序平台的确定,生物信息学工具的综合分析应用,样品提取、分析及检测等技术环节进行了深入讨论。     

高纯度尿促性腺激素辅助来曲唑治疗多囊卵巢综合征所致不孕的效果研究

目的:分析用高纯度尿促性腺激素(Hp-HMG)辅助来曲唑治疗多囊卵巢综合征(PCOS)所致不孕的效果.方法:选择2020年2月至2021年2月期间枣庄市妇幼保健院收治的84例PCOS所致不孕患者作为研究对象.按照随机抽签法将其分为常模组和研究组,常模组42例患者持有蓝色签,研究组42例患者持有红色签.用Hp-HMG对常...     

小儿和胃利脾颗粒质量标准研究

目的 建立小儿和胃利脾颗粒(鸡内金,山药,三七,黄芪等)质量标准.方法 采用薄层色谱法对小儿和胃利脾颗粒中三七、黄芪进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定小儿和胃利脾颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、黄芪甲苷,色谱柱为C18柱,乙腈-水为流动相,检测器分别为紫外检测器、蒸发光散射检测器.结果 薄层色谱鉴别方法专属性强,斑点清晰,且阴性无干扰;三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、黄芪甲苷线性范围分别为0.42～4.20μg,r=0.999 7;0.76～7.60μg,r=0.999 8;0.70～7.ooμg,r=0.999 7及1.52～7.60μg,r=0.999 9.结论 本质量标准方法结果准确、重复性好,可有效控制该制剂的质量.     

白细胞介素-2在肾癌根治术后的应用价值

目的 探讨白细胞介素-2(IL-2)对肾癌根治术后患者的疗效.方法 将67例病理证实为肾透明细胞癌并行肾癌根治术的患者随机分为两组,治疗组(33例)手术后应用IL-2治疗;对照组(34例)行单纯手术治疗,比较两组患者术后1～5年的生存率.结果 1年、2年生存率:治疗组分别为100%、93.9%,对照组分别为100%、85.3%,两组比较差异无显著性意义(P＞0.05);3年、4年、5年生存率:治疗组分别为90.9%、84.8%、69.7%,对照组分别为70.6%、58.8%、38.2%,两组比较差异均有显著性意义(P＜0.05).结论 对肾癌根治术患者术后应用IL-2治疗,可减少肾癌复发、提高患者生存率.     

年龄对ICU机械通气患者记忆和舒适度的影响

目的探讨年龄对ICU机械通气患者记忆程度和舒适度的影响。方法ICU机械通气超过24 h的患者,转出ICU 3~7 d内行回顾调查。按年龄分为<30岁(A组,n=22)、30~60岁(B组,n=45)和>60岁(C组,n=46)三组,分析年龄对机械通气和气道吸引记忆程度和舒适度的影响。结果113例患者纳入,C组患者APACHEⅡ评分(19.00±9.15)分明显高于A、B组[(8.38±6.37)分(、13.38±5.93)分](P<0.05)。A、B组患者ICU住院时间[(3.89±4.99)d、(3.38±3.63)d],明显短于C组[(7.46±14.47)d](P<0.05)。C组患者记得机械通气和气道内吸引的比例最低,仅为47.8%和21.7%,明显低于A、B组(P<0.01)。B组患者机械通气痛苦指数为(2.58±3.11),明显低于A组和C组[(6.80±2.42)和(7.43±2.28)](P<0.01)。结论随着年龄的增加,患者对机械通气和气道吸引的记忆明显减少。     

一种经济高效的人外周血NK细胞纯化方法的建立

目的:建立一种经济并且纯化率高的人外周血NK细胞分离方法.方法:对用RosetteSepR法直接从全血分离NK细胞的方法进行改进,先从全血中获得单个核细胞(PBMC),与红细胞按比例混合后再进行分离,利用流式细胞仪检测纯度,并且用CCK-8法检测NK细胞对K562细胞的杀伤活性.结果:改进后分离每毫升血所需RosetteSep抗体复合物用量仅为直接分离法的1/50;NK细胞的纯度由纯化前的(11.02±3.15)%提高到(96.52±2.42)%,细胞回收率为(70.24±10.51)%;纯化的NK对靶细胞K562有较强的杀伤作用,与直接分离法比较杀伤活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论:改进后的方法可以获得高纯度的NK细胞,该分离方法不影响NK的杀伤活性,同时极大的降低了分离成本.初步建立了一种经济高效,快速简便,并且纯化率高的人外周血NK细胞纯化方法.     

人舌鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系的建立及其耐药基因表达

目的建立耐顺铂(cisplatin,CDDP)人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113/CDDP,探讨其与亲代细胞耐药基因表达水平的差异。方法以人舌鳞癌Tca8113细胞系为实验对象,采用间歇性加药,逐步递增剂量,体外连续诱导培养,诱导其耐药性。用MTT法测定细胞的耐药指数和IC50。RT-PCR检测MDR-1、MRP、GST-π和Bcl-2的表达状况,测其光密度比值。结果建立顺铂耐药细胞系Tca8113/CDDP,耐药指数为9.2倍。RT-PCR显示:其MDR-1、MRP、GST-π和Bcl-2的表达均升高,光密度比值MRP:Tca8113/CDDP∶Tca8113=6.667∶1.111=6倍,Bcl:Tca8113/CDDP∶Tca8113=0.912∶0.549=1.6倍,GST-π∶Tca8113/CDDP∶Tca8113=2∶1=2倍。结论耐CDDP人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113/CDDP有多种耐药基因的表达上升,提示肿瘤细胞的耐药现象受到多种基因的调节。     

Tca8113细胞系耐药性的实验研究

目的：建立耐顺铂（CDDP）人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113/CDDP,对其耐药特性进行研究,方法：应用间歇性加药,逐步递增剂量,体外连续透导培养方法,获得Tca8113耐药细胞,采用MTT法,琼脂糖凝胶电泳和免疫组化法对细胞增增时间、裸鼠成瘤性、化疗药敏感性,P-gp和GST－π蛋白表达进行研究。结果：初步建成耐CCDP的人舌鳞癌细胞系（Tca8113／CDDP）,其耐CDDP浓度为10μmol/L。该细胞同时对卫猛（Vm-26)、博来霉素（BLM）、长春地辛、（VDS）、表阿霉素（E－ADM）、泰素（Taxol)等化疗药物产生交叉耐药。连续传代1月后,倍增时间从29．9h降至16．7h,具有裸鼠成瘤性,瘤体倍增加速。CDDP作用Tca8113细胞后,电泳显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带,耐药细胞Tca8113／CDDP则无。P－gp（P－糖蛋白）及GST－π表达量升高,表明MDR－1mRNA表达水平增高,结论：CDDP能致Tca8113细胞耐药性。Tca8113／CDDP细胞系具有多药耐药特性,GSH／GST解毒系统可能与Tca8113／CDDP耐药性的产生。     

基于TLR4/NF-κB信号通路研究清开灵口服液防治肺炎的作用机制

目的 基于Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路研究清开灵口服液防治肺部炎症的作用及机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组及清开灵口服液低、中、高剂量(4、8、16 mL/kg)组和头孢氨苄(175 mg/kg)组,各给药组ig相应药物,1次/d,连续6 d。给药同时进行造模,肺部注射肺炎克雷伯菌菌液造模3 d,对照组肺部注射生理盐水。给药结束后采集大鼠血液、肺泡组织灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),进行菌落培养和计数;采用全自动血液细胞分析仪检测白细胞数量及中性粒细胞、单核细胞比例;采用ELISA法检测血清中白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、IL-2、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、缓激肽(bradykinin,BK)、单核细胞趋化因子(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)水平及环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)、COX-2活性;采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肺组织病理变化;采用免疫组化法检测肺组织TLR4蛋白表达;采用Western blotting法检测肺组织磷酸化p65(phosphorylated p65,p-p65)、p65、磷酸化NF-κB抑制因子(phosphorylated inhibitor of NF-κB,p-IκB)和IκB表达。结果 与模型组比较,清开灵口服液组大鼠全血及BALF中经培养后的菌落数显著降低(P<0.05);全血中白细胞数目及中性粒细胞、单核细胞比例均显著降低(P<0.05、0.01);血清中IL-1、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、BK、MCP-1水平及COX-1、COX-2活性均显著降低(P<0.05、0.01);肺实质中炎性细胞浸润、红细胞渗出及肺泡上皮细胞脱落等现象明显减少;肺组织中TLR4蛋白阳性表达明显减少,p-p65/p65和p-IκB/IκB蛋白表达水平显著下降(P<0.05、0.01)。结论 清开灵口服液具有抑制肺炎克雷伯菌所致肺炎的作用,其机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路有关。