表达前列腺特异性膜抗原的DNA疫苗对肿瘤细胞的抑制作用

目的构建表达前列腺特异性膜抗原（PSMA）的DNA疫苗，观察其在体外对肿瘤细胞的免疫攻击和在体内对肿瘤细胞攻击的免疫保护作用。方法通过稳定转染构建表达PSMA的小鼠黑色素瘤细胞系B16-PSMA，将DNA疫苗pCDNA3．1-PSMA通过肌肉注射导入C57BL／6小鼠体内，分离小鼠脾细胞，检测细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes，CTL）反应。以B16-PSMA细胞攻击免骺小鼠，观察免疫动物的无瘤生存期和肿瘤体积增长情况，评价DNA疫苗的抗肿瘤作用。结果DNA疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞CTL活性，经过免疫后的小鼠成瘤率降低，无瘤生存期延长，肿瘤生长缓慢，肿瘤组织内有较多淋巴细胞浸润，表明产生较强的抗肿瘤反应。结论表达PSMA的DNA疫苗能够诱导小鼠产生特异性免疫反应，对表达PSMA的肿瘤细胞的攻击产生免疫保护作用，为前列腺癌的预防和免疫治疗提供了新的思路。     

肝毒清颗粒对大鼠实验性肝纤维化的防治作用

目的 :观察肝毒清颗粒的抗纤维化作用。方法 :将Wistar雄性大鼠随机分成 6组 ,即正常对照组、模型组、肝毒清大、中、小剂量组和乙肝宁阳性组 ,采用四氯化碳诱导肝纤维化模型。于造模第 2个月始给予治疗药物。实验持续 3月后将大鼠处死取血作肝功检查及取肝组织做病理检查。结果 :肝毒清能降低AST ,升高TP、ALB ,与模型组比较 (P <0 .0 5 ) ;减轻肝脂肪变性、减少纤维组织增生、促进肝细胞再生。结论 :肝毒清对大鼠肝纤维化有明显防治作用     

血浆置换临床应用102例次体会

目的 :探讨用膜滤过方式血浆置换临床应用的效果。方法 :患者 42例 ,男 16例 ,女 2 5例。年龄 18～ 70岁 ,平均 (49.6 6± 2 3.46 )岁 ,共进行了 10 2次血浆置换。原发病为肝功能衰竭 15例 ;系统性红斑狼疮 10例 ;多发性骨髓瘤 8例 ;过敏性紫癜性肾炎临床表现为急进性肾炎 5例 ;淀粉样变 2例 ;格林巴利氏综合症 1例 ;原发性硬化性胆管炎 1例。利用常规血透机进行血浆置换治疗。在血路泵管和透析器之间串联连接一膜式血浆分离器 ,补充的冰冻新鲜血浆或配制的白蛋白溶液由血浆分离器和透析器之间的动脉管路输入 ,经透析处理后进入患者全内。每…     

荧光定量PCR在不孕症宫颈沙眼衣原体和解脲支原体检测中的临床意义

目的：评价荧光定量PCR（QPCR）技术对不孕症妇女宫颈沙眼衣原体和解脲支原体检测。方法：用QPCR技术对60例不孕症患者（不孕组）及78例正常生育者（对照组）行宫颈沙眼衣原体（CT）和解脲支原体（UU）检测。结果：不孕组宫颈分泌物CT DNA、UU DNA及混合感染阳性检出率明显高于对照组（P＜0．05）。结论：QPCR对不孕症患者宫颈CT DNA、UU DNA的检测特意性强、快速、灵敏、临床应用价值高。     

日本血吸虫成虫67kDa分子抗原的纯化及其对血吸虫病的诊断和疗效考核

目的 为检测日本血吸虫成虫67kDa分子抗原(SjAWA67)对血吸虫病的诊断及疗效考核价值。方法 通过SDS-PAGE和电渗方法,从日本血吸虫成虫抗原中分离纯化出67kDa分子抗原,并用该抗原包被酶标反应板微孔,进行ELISA检测。结果 SjAWA67的纯度已达到电泳纯和免疫纯,对急、慢性血吸虫病患血清的捡出率分别为100％和95％,与正常人血清、肝吸虫病和肺吸虫病患血清均未出现明显的交叉反应,44例血吸虫病患治疗后3、6和12个月后的阴转率分别达45．5％、75．0％和90,9％。结论 SjAWA67分子抗原具有较好的疗效考核价值和现场应用前景。     

中药中金属元素的生化作用机理

机体内环境是一个多层次纵横交错的大系统 ,有一套复杂的调控体系 ,金属元素与此调控体系有密切联系。机体内所有复杂的生化反应都离不开酶 ,而金属元素有的是酶的辅助因子参与酶的组成 ,有的是酶的激活剂 ,是酶活性的主要调节者。深入研究中药中金属元素对酶活性的影响 ,将有利于提高药效。此外肾虚病人血清中金属元素与正常人相比有显著差异 ,若能比较准确地测得肾虚不同阶段的金属元素图谱 ,并结合中药中各金属元素含量的不同加以针对性地治疗 ,将对提高药物对疾病的治疗效果及延缓衰老有重要意义。     

氧化苦参碱对小鼠免疫性肝纤维化作用机制的研究

目的 研究氧化苦参碱对小鼠免疫性肝纤维化的作用机制。方法 将BABL/c 小鼠随机分成正常对照组、阳性对照组、氧化苦参碱小剂量、大剂量治疗组,阳性对照组和氧化苦参碱治疗组每周静脉注射1次刀豆蛋白A,共20周。氧化苦参碱治疗组分别腹腔注射氧化苦参碱30mg/kg、60mg/kg。共20周。分别于注射刀豆蛋白A后5、12和20周取血低温保存;并每次处死一批小鼠取肝脏组织液氮低温保存、常规HE染色、Van Gieson胶原纤维染色,冰冻切片CD4,CD8T淋巴细胞染色。图像分析系统定量分析肝纤维组织含量。结果 氧化苦参碱治疗组血清ALT含量及肝组织内炎症活动度、纤维含量均低于阳性对照组,而且呈剂量依赖性。结论 氧化苦参碱有减轻小鼠肝脏炎症活动度及抗小鼠免疫性肝纤维化的作用。     

大鼠胃黏膜癌变过程细胞凋亡及相关癌基因bcl—2、c—myc的动态表达

目的：探讨大鼠胃黏膜癌变发生发展过程中细胞凋亡及其相关基因的关系。方法：采用MNNG,10％NaCl及酒精灌胃建立了大鼠胃黏膜癌变模型,设立正常空白组,模型组,分别用TUNEL,原位杂交技术及免疫组化大鼠检测胃黏膜细胞凋亡指数,bcl-2,c-myc基因表达。结果：本造模方法成功率较高。从正常胃黏膜到胃癌,细胞凋亡指数逐渐下降,bcl-2,c-myc基因表达逐渐增高,大鼠胃黏膜细胞凋亡受到抑制与bcl-2,c-myc基因高表达具有高度的一致性,结论：细胞凋亡失控是胃黏膜癌变发生发展的机制之一,bcl-2,c-myc基因可能参与了对大鼠胃黏膜癌变细胞凋亡的调控。     

辛伐他汀联合雷奈酸锶对成骨细胞及破骨细胞生物学特性的影响

目的探讨辛伐他汀(simvastatin,SIM)联合雷奈酸锶(strontium ranelate,SR)治疗对大鼠成骨细胞及破骨细胞生物学特性的影响。方法分离和培养大鼠成骨细胞和破骨细胞;使用SIM或SR和较低剂量SIM联合较低剂量SR处理大鼠成骨细胞和破骨细胞;用Western blot方法检测成骨细胞和破骨细胞中p-akt、p-gsk3β、β-catenin、p-β-catenin和NFATC1的蛋白水平。用相应的试剂盒测定ALP活性和TRACP活性。结果与单独使用SIM或SR相比,SIM+SR联合处理使成骨细胞活性明显增加,而破骨细胞分化和骨吸收能力明显降低(P<0.05)。进一步研究发现与单独使用SIM或SR相比,SIM+SR处理使成骨细胞中p-akt、p-gsk3β、β-catenin、p-β-catenin和NFATC1的蛋白水平显著增加(P<0.05);而破骨细胞中p-akt、p-gsk3β、β-catenin、p-β-catenin和NFATC1的蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论较低剂量的SIM+SR比单独使用较高剂量的SIM或SR,更能显著通过AKT/GSK3β/β-catenin/NFATC1信号通路介导成骨细胞和破骨细胞功能。     

mPer2对小鼠B16黑色素瘤细胞增殖作用的影响

目的:研究mPer2对小鼠黑色素瘤细胞B16增殖作用的影响。方法:将构建好的mPer2全长表达质粒(pcDNA3.1-mPer2)转染入小鼠黑色素瘤细胞B16中,并以pcDNA3.1空质粒转染为对照,通过平板克隆形成实验和MTT法检测两组细胞的增殖情况。结果:平板克隆形成实验和MTT法检测结果均显示Period2转染组小鼠黑色素瘤细胞B16较空质粒对照组明显降低。结论:mPer2的高表达能显著性的抑制小鼠黑色素瘤细胞B16的生长。