医学微生物学二段式教学改革

我们将医学微生物学教学改为二个阶段进行 ,第一阶段 :基础医学微生物学教学 ,安排在基础课后期进行 ,主要讲授医学微生物学的基础理论和基础知识。第二阶段教学为临床微生物学 ,安排在临床教学中后期 ,由微生物学教研室、传染科、内科、检验科等联合主办。即解决与临床脱节问题 ,又通过多学科联合教学解决各学科之间内容的衔接问题     

深低温保藏软骨细胞的胶原凝胶立体培养

目的研究经深低温保藏后软骨细胞在胶原凝胶载体中的生长特性。方法取4周新西兰兔关节软骨,经分离成软骨细胞悬液后,置于深低温保藏。2月后,复苏被冻存的软骨细胞,包埋于含小牛血清和DMEM的胶原凝胶中培养,通过组织化学和透射电镜观察进行分析。结果与新鲜软骨相同,经深低温保藏的软骨细胞,复苏后包埋在胶原凝胶中培养7d,见单个的软骨细胞形成增殖的两个或两个以上的同源细胞,细胞周围集聚异染性细胞外基质。结论经深低温保藏的软骨细胞,在胶原凝胶中培养,仍保持了分裂增殖和合成细胞外基质的能力,可作为种子细胞,供组织工程修复软骨组织。     

胃腺癌组织中KAI1/CD82蛋白的表达及其意义

目的 探讨KAI1／CD82蛋白在胃腺癌组织中表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学技术S-P法检测68例胃腺癌组织中KAI1／CD82蛋白的表达，以20例非肿瘤性胃黏膜组织作对照。对随访14个月～13年的35例做生存分析。结果 68例胃腺癌组织KAI1／CD82蛋白阳性表达率为26、5％（18／68），对照组胃黏膜组织阳性表达率95．0％（19／20）；高／中分化胃腺癌KAI1／CD82蛋白阳性表达率较低分化者为高，分别为41．4％（12／29）、15．4％（6／39），P〈0．05；无淋巴结转移胃腺癌的KAI1／CD82蛋白阳性表达率较有淋巴结转移者为高，分别为45.5％（10／22）、5.3％（8／46），P〈0.05；侵及黏膜及黏膜下层、肌层和浆膜层胃腺癌KAI1／CD82蛋白阳性表达率分别为66、7％（4／6）、34.8％（8／23）、15.4％（6／39），P〈0.05。KAI1／CD82蛋白在Ⅰ～Ⅱ期胃腺癌阳性表达率为37.0％（17／46），在Ⅲ～Ⅳ期胃腺癌中阳性表达率为13.6％（1／22），P〈0.05。KAI1／CD82蛋白阳性患者术后1、3、5、7、10年生存率分别为100.0％（7／7）、85.7％（6／7）、57.1％（4／7）、42.9％（3／7）和28．6％（2／7），而KAI1／CD82阴性患者术后生存率分别为89、3％（25／28）、42、9％（12／28）、14．3％（14／28）、7．1％（2／28）和3、6％（1／28）。KAI1／CD82蛋白阳性患者术后1、3、5、7和10年生存率比KAI1／CD82阴性患者术后1、3、5、7和10年生存率显著提高，P〈0．05。结论 KAI1／CD82蛋白在胃腺癌的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、临床分期及淋巴结转移有关，与患者性别、年龄无关。检测KAI1／CD82蛋白有助于临床评估病情，判断预后。     

高分辨率磁共振检测急性脑梗死早期神经功能恶化患者颅内动脉粥样硬化血管特征

目的 利用高分辨率磁共振研究颅内动脉管壁及斑块特点与急性脑梗死早期神经功能恶化(END)的关系。 方法 收集51例颅内动脉粥样硬化斑块所致急性脑梗死患者并进行高分辨磁共振扫描。根据脑梗死发病后72 h内患者是否发生END,分为END组和non-END组,比较两组患者颅内动脉血管管壁及斑块的差别。 结果 END组患者的斑块长度较non-END组更短[6.35(9.54) vs 10.75(9.73),P＜0.05],END组血管重构指数低于non-END组[(0.917 3±0.146 8) vs (1.010 9±0.125 1),P＜0.05],END组负性重构的比例高于non-END组[56.52% vs 28.57%,P＜0.05]。 结论急性脑梗死END与血管重构及斑块长度密切相关。     

不同术式治疗前列腺增生的疗效对比

目的对比不同术式用于前列腺增生患者治疗中的临床疗效。方法对本医院行手术的70例前列腺增生患者开展分析,选取于2016年2月—2018年5月,分组法为抽签法,一组纳入35例。试验组行经尿道膀胱镜鞘推剥配合等离子切割剜除术,对照组行经尿道等离子前列腺切除术,评比两组临床相关指标。结果试验组术中出血量、术后并发症合计率少于对照组指标,试验组术后3个月最大尿流率多于对照组指标,残余尿量少于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论对前列腺增生患者开展经尿道膀胱镜鞘推剥配合等离子切割剜除术治疗的临床效果优于经尿道等离子前列腺切除术。     

结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B-ESAT6的融合表达及纯化

目的　融合表达结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B ESAT6 ,为结核病的预防提供有效亚单位疫苗。方法　设计含不同酶切位点的Ag85B和ESAT6引物 ,采用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)的方法从结核分枝杆菌毒株H3 7Rv DNA中分别扩增出相应大小的DNA片段 ,将片段分别与PGEM T easy载体连接测序。将测序正确的Ag85B和ESAT6按照不同的酶切位点克隆入PPROEXHT表达载体 ,挑选出阳性克隆 ,将诱导的表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析 ,同时与含6个组氨酸 (histidine 6×his)的单克隆抗体 (monoclonalantibody ,mAb)进行固定化蛋白质免疫学测定(Western blot) ,将用含Ni 鳌合剂的Ni NTA亲合柱纯化的表达产物免疫小鼠 ,用结核分枝杆菌培养上清滤液蛋白 (culturefiltrateproteins ,CFP)作为抗原 ,酶联免疫吸附试验 (enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。结果　PCR获得的Ag85B和ESAT6序列与基因文库 (GenBank)报道的完全一致。两者在大肠杆菌DH5α株中融合表达的产物约为 370 0 0 ,与预计大小相吻合。Western blot结果显示 ,在相对分子量约 370 0 0处有表达产物与 6×hismAb特异性结合带。表达产物为包涵体 ,通过Ni NTA纯化系统 ,可得到纯化的目的蛋白。Ag8     

痰热清注射液联合治疗支气管哮喘急性发作临床观察

目的观察痰热清注射液对支气管哮喘急性发作患者的临床疗效。方法将80例支气管哮喘急性发作患者随机分为两组，均予西医基础治疗，治疗组加用痰热清注射液静滴；两组疗程均为7d。结果两组疗效有差异。结论痰热清注射液治疗支气管哮喘急性发作患者疗效肯定。     

分枝杆菌胞壁融合表达Ag85B-ESAT-6穿梭质粒的构建

目的　构建E coli BCG(BacilleCalmette Guerin)穿梭载体 ,在母牛分枝杆菌细胞壁融合表达结核分枝杆菌 (MTB)的分泌蛋白Ag85B ESAT 6。方法　用聚合酶链反应 (PCR)从MTB毒株H3 7Rv基因中扩增出结核分枝杆菌 190 0 0抗原 ( 19 ss)胞壁区及其上游调控元件基因 ,克隆入E coli BCG穿梭载体 pOLYG中 ,构建表达蛋白能嵌入细胞壁中的E coli BCG穿梭载体。用间接免疫荧光染色法观察该载体携带所构建的结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B和ESAT 6基因在母牛分枝杆菌宿主中的融合表达。结果　经测序证实所克隆的 19 ss基因序列正确 ,所构建的E coli BCG穿梭载体 (pCW )能完成在大肠杆菌和母牛分枝杆菌细胞之间的穿梭 ,经免疫荧光检查外源基因Ag85B ESAT 6可融合表达于分枝杆菌宿主表面。 结论　本方法可成功构建能够在分枝杆菌胞壁融合表达MTB分泌蛋白Ag85B ESAT 6的E coli BCG穿梭质粒     

孟鲁司特钠联合布地奈德治疗小儿哮喘的疗效及其对肺功能和细胞免疫的影响

目的 探讨孟鲁司特钠联合布地奈德对小儿哮喘的疗效及其对细胞免疫的影响。方法 选取延安大学附属医院2017年1月-2019年1月120例哮喘患儿为研究对象,根据随机法将患儿分为对照组和观察组,每组60例。对照组患儿将吸入用布地奈德混悬液1.0 mg采用2.0 mL生理盐水溶解后以氧气为驱动力进行雾化吸入治疗,流量控制在6 L/min以内,2次/d,15 min/次。观察组患儿在对照组的基础上口服孟鲁司特钠咀嚼片,5 mg/次,1次/d。两组连续治疗2周。观察两组患者的临床疗效,同时比较两组治疗前后的、症状评分、肺功能指标及免疫功能指标水平。结果 治疗后,对照组总有效率为78.33%,显著低于观察组的93.33%（P<0.05）。治疗后,两组日间及夜间症状评分均显著降低（P<0.05）,且观察组显著低于对照组（P<0.05）。治疗后,两组第1秒用力呼气容积（FEV₁）、用力肺活量（FVC）、呼气峰流速（PEF）和FEV₁/FVC水平均明显升高（P<0.05）,且观察组各肺功能指标均显著优于对照组（P<0.05）。治疗后,两组CD3⁺、CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺水平均显著升高（P<0.05）,且观察组CD3⁺、CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺水平明显高于对照组（P<0.05）。结论 孟鲁司特钠联合布地奈德可有效改善患儿临床症状及肺功能,正向调节机体免疫水平,疗效确切,在小儿哮喘治疗中具有较高的应用价值。