人生长分化因子-5完整成熟肽基因的克隆

目的：克隆人生长分化因子-5(hGDF-5)完整成熟肽基因。方法：根据Genbank中hGDF-5的序列化学合成两条引物，从人胎儿软骨组织提取总RNA，通过反转录聚合酶链式反应(RT—PCR)得到hGDF-5完整成熟肽基因。将所得基因片段插入克隆载体pMD18-T并转化大肠杆菌DH5α，提取重组质粒，酶切鉴定并测序。结果：DNA琼脂糖凝胶电泳显示：PCR产物为一长约380bp的带，阳性克隆质粒经双酶切可切出约380bp的片段。全自动DNA测序表明与Genbank中的序列完全相符。结论：通过反转录聚合酶链式反应从人胎儿软骨组织中成功克隆出人GDF-5完整成熟肽基因，基因序列完全正确。     

鸡胚鳃器官的扫描电镜观察

用显微解剖术和扫描电镜方法观察第11～21期鸡胚鳃器官的形态结构．鸡胚鳃器官由4对鳃弓、鳃沟、鳃膜和咽囊组成。第11期第1对鳃弓出现于心隆起颅侧。此后，第2—4对鳃弓分别出现在心隆起两侧。相邻鳃弓之间隔以相应的鳃沟，鳃沟与咽囊之间的薄层组织为鳃膜。在原始咽内部，咽囊最初呈圆弧形小坑状，继而加深变窄呈沟缝状。第17期第1、2对咽囊借鳃裂与鳃沟相通。     

生长分化因子5基因转染诱导骨髓基质干细胞分化的研究

目的 探讨人生长分化因子5(GDF5)基因转染对骨髓基质干细胞(BMSCs)生长及分化的影响.方法 采用脂质体介导法将GDF5基因导人人BMSCs,通过MTT法和流式细胞仪分别检测细胞增殖能力和细胞周期,在光镜和电镜水平观察细胞形态,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法榆测GDF5和Ⅱ型胶原mRNA和蛋白质的表达.柠檬酸铅法检测细胞碱性磷酸酶活性,RT-PCR法检测骨钙素mRNA表达.结果 GDF5在转染细胞内得到稳定表达,转染细胞的增殖能力和细胞周期与未转染细胞基本一致.光镜下转染细胞中多角形细胞相对增多,排列方式不规则.电镜下转染细胞核呈不规则形,细胞器丰富.转染细胞Ⅱ型胶原mRNA和蛋白表达阳性,骨钙素mRNA表达阴性.结论 GDF5基因脂质体法转染BMSCs成功,转染细胞仍保持正常生长增殖特性.GDF5可诱导BMSCs向软骨表型分化,GDF5基因修饰的BMSCs可作为软骨组织上程的候选种子细胞.     

凹度、规化形状因子和线参照数密度新参数在大肠癌定量病理学中的应用

本文将凹度、规化形状因子和线参照数密度新参数用于大肠癌定量病理学研究。病例分为正常大肠粘膜、大肠腺瘤和大肠管状腺癌三组。用Q500 MC 显微图像分析系统测试腺体的面积、周长、长轴、短轴, 并分别计数各腺体周长上的腺上皮细胞数和杯状细胞数。据此计算腺体的体凹度、表凹度、面凹度、边凹度、规化形状因子和腺上皮细胞的线参照数密度及杯状细胞的线参照数密度。结果表明, 腺体的体凹度、表凹度、面凹度、边凹度、规化形状因子和以基底膜为参照系的腺上皮细胞的线参照数密度和杯状细胞的线参照数密度在大肠正常粘膜、腺瘤和管状腺癌之间的差异有显著性( P< 0-05) 。基于本文测试结果, 我们发现癌性腺体和腺瘤性腺体在定量病理学方面具有以下特点, 即: 癌性腺体其腺上皮细胞的线参照数密度明显下降, 绝大部分病例中腺体的杯状细胞消失, 其线参照数密度为0 或接近0 , 此外腺体的凹度增加, 规化形状因子值下降; 腺瘤性腺体其腺上皮细胞的线参照数密度明显增加, 腺体凹度的增加程度和RFF值下降的程度较癌性腺体小。本研究表明体凹度、表凹度、面凹度、边凹度、规化形状因子和曲线上的线参照数密度在病理学定理分析中有实际应用价值     

受体介导内吞过程中巨噬细胞线粒体质子动力势的变化

ＳＮＡＦＬ－ｃａｌｃｅｉｎ－ＡＭ、ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３分别标记培养的小鼠腹腔巨噬细胞胞浆ｐＨ、线粒体ｐＨ和线粒体跨膜电位；用激光共聚焦显微镜，观察了巨噬细胞内线粒体的分布，ＣｏｎＡ刺激后胞浆ｐＨ、线粒体ｐＨ及线粒体跨膜电位随时间变化曲线。结果显示ＣｏｎＡ刺激可引起线粒体内外ｐＨ差增加，线粒体跨膜电位在刺激开始时上升，而后逐渐下降；线粒体质子动力势绝对值在刺激开始一段时间增加，随后逐渐降低到比刺激前更低的水平。     

损伤肌腱再生修复过程中胶原纤维的形成与降解

在跟腱缺损的动物模型中植入人发角蛋白(human hair keratin，HHK)人工腱进行修复，观察HHK人工腱诱导自体腱形成过程中胶原纤维的形成与降解。实验发现：在HHK人工腱植入后1周，肌腱的断端有新生腱细胞(成腱细胞)；第3周，人发之间的组织中成腱细胞增多，顺着人发的方向生长，成行排列，且与损伤肌腱的长轴平行，有时可见细胞分裂相，     

长春新碱诱导的自噬性细胞凋亡对线粒体膜电位的影响

目的：了解长春新碱（VCR）诱导的自噬性细胞凋亡是否与线粒体跨膜电位（△Ψm）改变有关及其可能的机制。材料与方法：以正常人的肝细胞系为体外模型,应用碘化丙啶（PI）／Rhodamine123(Rh123)双重染色检测△Ψm,通过亚GI期细胞和透射电镜鉴定细胞凋亡。结果与结论：VCR可明显诱导线粒体△Ψm下降,也可以诱导L－02细胞自噬性凋亡。线粒体△Ψm下降可能是VCR诱导自噬性细胞凋亡的关键环节。     

人发角蛋白人工腱体内降解机制的形态学研究

目的：研究人工腱植人体内后的降解过程及细胞变化。方法：将人发角蛋白HHK人工腿植入兔离断跟腱中,于术后不同时期的取出植入物中段及吻合端取材,制作常规石蜡切片。结果：第一周,人工腱表面有一层粘膜状物,周围聚集大量的炎症细胞;第2周人腱中人发开始被纤维鞘包裹;第3,6周为人工腱降解活动高峰期,且降解步调不一致;第9周人发被完全降解,只残留少量的色素,结论：从形态学方面来看,人工腱植入兔体后经过系列变化,最终可被完全降解,吸收,而细胞表现的不仅仅是吞噬作用。     

强灵片增加骨密度值的药理研究

通过对骨质疏松模型大鼠的实验观察，证实了强灵片具有增加骨密度值及磷钙含量的作用。