马立克病疱疹病毒基因组IRL区一特异性cDNA基因在大肠杆菌？…

目的 了解从人工感染马立克病泡疹病毒（ＭＤＶ）致瘤毒株京－１株发病鸡内林巴肿瘤组织中分离鉴定到的，定位于ＭＤＶ基因组ＩＲＬ区ＢａｍＨＩ－Ｉ２和Ｌ片段内的一长７２０ｂｐ特异性ｃＤＮＡ基因在大肠杆菌表达系统中的表达能力。方法 将该ｃＮＤＡ基因克隆进行色氨酸（Ｔｒｐ）启动子控制下的大肠杆菌表达质粒ＰＡＴＨ２３中，连接质粒转化受体菌ＤＨ５α。分别采用原位杂交、斑点杂交和ＰＣＲ法对重组转化子进行筛选鉴定，最     

细粒棘球蚴EG95s重组蛋白串联表达免疫原性分析

目的 比较、分析EG95s重组蛋白的免疫原性。方法 本研究分别诱导表达含有1、2、3拷贝EG95s的pET-1EG95s、pET-2EG95s和pET-3EG95s重组质粒,并用His亲和纯化HIS-1EG95s、HIS-2EG95s和HIS-3EG95s3种重组蛋白。再以相同的免疫程序分别免疫8周龄BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法检测小鼠体内抗体水平的变化分析其免疫原性。结果 经过改造的EG95s重组蛋白:HIS-1EG95s、HIS-2EG95s、HIS-3EG95s均保留了免疫原性,能诱导小鼠产生特异性抗体。3者抗体水平的比较结果显示HIS-1EG95s首次免疫后1周产生的抗体水平明显高于HIS-2EG95s、HIS-3EG95s,但免疫后2周开始,HIS-3EG95s抗体水平超过HIS-1EG95s组,并在二次免疫及三次免疫后持续高于HIS-1EG95s组。免疫后最终抗体效价显示HIS-1EG95s和HIS-2EG95s两组均为1∶819 200,而HIS-3EG95s组为1∶1 638 400。HIS-1EG95s、HIS-2EG95s、HIS-3EG95s均诱导机体产生IFN-γ,但差异不显著,与羊包虫阳性血清反应结果显示HIS-1EG95s的反应性均显著低于HIS-2EG95s和HIS-3EG95s。结论 HIS-1EG95s、HIS-2EG95s与HIS-3EG95s均具有很好的免疫原性,虽HIS-EG95s在免疫初期免疫效果好,但串联3拷贝的EG95s后使得重组蛋白免疫效果更持久,更有利于产生更长效的免疫保护作用。本研究为羊包虫病疫苗的研制及免疫预防奠定了科学基础。     

K型和D型CpG寡脱氧核苷酸对猪外周血单个核细胞免疫刺激活性的比较研究

目的：比较K、D两型CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对猪外周血单个核细胞(PBMC)免疫刺激活性的差异。方法：用人工合成的-K型和D型两类CpG ODN和不含CpG基元的对照ODN D48分别刺激已分离的猪PBMC,^3H—TdR掺入法测定每分闪烁次数(cpm)值,计算刺激指数(SI)。双抗体夹心ELISA法测定活化细胞上清中IFN—γ和IL—2表达水平。结果：D和K型CpG ODN对猪PBMC增殖均具有较强刺激作用,K型的增殖效应高于D型。含“GTCGTT”基元的2006作用尤为显著,但不能有效刺激猪：PBMC分泌IFN—γ和IL—2。D型刺激增殖效应低于K型,但能有效地促进猪PBMC分泌IFN—γ和IL—2。结论：K型和D型CpG ODN在刺激猪PBMC增殖及其分泌IFN—γ、IL—2的水平有所不同。     

3组典型中药药对的配方颗粒与合煎液成分对比分析

目的：考察3组典型中药药对（黄连-吴茱萸、桂枝-白芍、白芍-甘草）配方颗粒与共煎液的成分差异。方法：采用红外光谱法和高效液相色谱法,进行不同制法成分对比分析,并利用t检验进行统计分析。结果：3组药对红外指纹图谱对比分析相关性为,合煎液：配方颗粒=1：0.976 024（黄连-吴茱萸）/1：0.967 559（桂枝-白芍）/1：0.950 687（白芍-甘草）。建立了黄连关键成分（小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀）、吴茱萸关键成分（吴茱萸碱、吴茱萸次碱）、桂枝关键成分（肉桂酸）、白芍关键成分（芍药苷）和甘草关键成分（甘草酸、甘草苷）的高效液相色谱分析方法,经t检验,合煎液与配方颗粒中各成分均无显著性差异（P>0.05）。结论：结果表明,3组药对的配方颗粒与合煎液成分分析差异不显著。     

染料木素和青藤碱对佐剂型关节炎大鼠血清IL-17、Tracp的影响

目的:研究染料木素和青藤碱对佐剂型关节炎(AA)大鼠血清白介素17(IL-17)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tracp)含量的影响,以初步探讨其对AA大鼠骨免疫系统的调节作用。方法:通过给大鼠左后足跖皮下注射完全弗氏佐剂建立AA大鼠模型。注射诱导后第2天大鼠出现急性关节炎症状,踝关节不同程度肿胀,炎症持续第21天开始给予药物干预。染料木素组给予染料木素(1 mg/200 g.d-1)灌胃,青藤碱组给予青藤碱(3 mg/200 g.d-1)灌胃,配伍组给予染料木素(1 mg/200 g.d-1)和青藤碱(3 mg/200 g.d-1)灌胃,甲氨喋呤组给予甲氨喋呤(1 mg/200 g.w-1)灌胃。连续干预40d后用酶联免疫吸附法测定大鼠血清IL-17和Tracp的含量。结果:①配伍组与青藤碱组和甲氨喋呤组比较,IL-17、Tracp含量均明显降低(P<0.05,P<0.01);与染料木素组比较,IL-17、Tracp含量下调但差异不显著(P>0.05)。②染料木素组Tracp含量明显低于青藤碱组和甲氨喋呤组(P<0.05);染料木素组IL-17含量低于青藤碱组、高于甲氨喋呤组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:染料木素和青藤碱合用能发挥协同作用,降低AA大鼠血清IL-17、Tracp含量。