腺病毒载体的研究进展

近年来,随着基因治疗和重组疫苗研究的深入,作为其基础的载体的研究有了突飞猛进的发展.腺病毒载体是目前基因治疗中应用最广泛的一种病毒载体[1],本文就腺病毒载体的研究进展作一综述.     

结核分枝杆菌阿拉伯糖基转移酶AftA的原核表达及鉴定

目的构建高效表达菌株,以大量表达结核分枝杆菌AftA蛋白,为后续的抗结核药物的筛选奠定基础。方法采用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出AftA的基因片段,将其插入原核表达质粒PQE30,构建重组质粒PQE30-aftA。将PQE30-aftA转化大肠杆菌,用IPTG诱导目的基因表达。Western-blotting免疫印迹法鉴定后纯化该表达产物。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功构建了重组质粒PQE30-aftA。在大肠杆菌M15中用IPTG诱导表达后,获得了AftA蛋白。蛋白经SDS-PAGE分析约为69.5kD。免疫印迹分析证实目的蛋白与阳性结核病患者抗血清产生特异性反应。结论成功制备出重组的AftA蛋白,为新型抗结核药物的筛选奠定了物质基础。     

HBV preS2S-rhGM-CSF融合基因表达质粒的构建和表达

目的：研究GM-CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法：采用PCR方法，扩增HBV preS2 S基因约846 bp的片段和rhGM-CSF(包括甘氨酸接头)基因450bp的片段。通过T-A克隆技术和基因定向克隆，构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3．1-S2S-rhGM-CSF，并在HepG2细胞中表达。结果：经酶切、PCR及DNA测序鉴定，融合基因表达质粒HBV preS2S-rhGM-CSF成功地构建。将其转染HepG2细胞后，目的基因的转录通过RT-PCR得到证实，而且表达的融合蛋白能与抗-HBs、抗-preS2和抗-GM-CSF单克隆抗体(mAb)均产生特异性反应。结论：融合基因表达载体pcDNA3．1-S2S-rhGM-CSF的成功构建并表达，为进一步研究乙肝DNA疫苗奠定了实验基础。     

CAI在医学微生物学教学中的应用

根据医学微生物学教学特点，对运用CAI课件的必要性、CAI课件的主要形式及CAI课件的优越性等方面进行了分析，以达到提高医学微生物学教学质量的目的。     

抗体依赖性细胞毒作用的~(51)Cr释放测定法及对肺结核患者的初步检测

本文探讨用~(51)Cr释放测定法检测人外周血单个核细胞 ADCC 活性试验的影响因素,并对比正常人和肺结核患者的 ADCC 活性。检测45名健康成人的细胞毒性(CT),正常值为48.22±12.58％,无性别差异。38 例活动性结核患者的 CT为 62.21±16.97％。初步结果表明结核患者的 ADCC 活性高于正常人。