慢性肾炎患者T细胞亚群及其IL－2产生功能的探讨

慢性肾炎患者Ｔ细胞亚群及其ＩＬ－２产生功能的探讨闫振成，朱妙珍，朱锡华（第三军医大学第三附院肾科，重庆６３００４２）慢性肾炎（ＣＧＮ）　的发病机制至今尚未明了，近年来的研究表明，ＣＧＮ　的发病与Ｔ细胞功能紊乱有一定的关系。现认为ＩＬ－２很大程度上反映...     

脂筏与病毒感染

脂筏是质膜上具有低流动性,呈现有序液相,富含胆固醇和鞘磷脂的特殊膜结构。与糖基磷脂酰肌醇(GPI)相连,或被肉豆蔻酸酰化是脂筏分子主要的两种蛋白修饰形式。膜上许多结构可通过被GPI锚固的形式作为细菌、病毒以及毒素的受体。脂筏介导质膜的内吞作用、病毒颗粒的装配及出芽过程以及跨膜信号传导等重要的生物学过程。     

人FascDNA的克隆及其在大肠杆菌中表达的研究

为获得高质量及充足的Ｆａｓ蛋白，采用ＰＣＲ技术调整Ｆａｓ基因的开放阅读框架，使之与生物素化蛋白基因阅读框架一致；缺失了ＦａｓｃＤＮＡ基因的起始密码子并增加一个大肠杆菌偏性终止密码子，构建ＦａｓｃＤＮＡ和生物素化融合原核表达质粒ＰｉｎＰｏｉｎｔ－Ｆａｓ。将重组质粒转入大肠杆菌ＨＢ１０１，经５００ｍｍｏｌＩＰＴＧ在３７℃条件下诱导４ｈ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测融合蛋白在大肠杆菌得以高效表达，表达量为细菌总蛋白的１３．８％。用亲和层析树脂对生物素化融合蛋白进行亲和层析纯化，得到Ｆａｓ重组的蛋白，且表达的Ｆａｓ融合蛋白具有抗体结合活性。此蛋白的表达成功将解决Ｆａｓ膜蛋白不易提取的难题，为深入研究Ｆａｓ提供了良好材料来源     

人脐静脉内皮细胞清除补体攻膜复合物的机制

目的：探讨内皮细胞清除补体攻膜复合物（MAC）的途径及其清除动力学，方法：原代培养的人脐静脉内皮细胞以RH414荧光标记质膜双层，0℃组装亚溶剂量的MAC，37℃复苏后，LSCM实时监MAC沉积诱导的质膜囊泡化形成和胞吞，胞吐情况,流式细胞仪定量检测内皮细胞表面MAC抗原的清除情况，结果：MAC沉积后，内皮细胞有的质膜囊泡化形成，囊泡以胞吞和胞吐2种方式离开细胞，并以前者占优，37度条件下，内皮细胞清除表面MAC的半衰期约为5min。结论：内皮细胞可通过胞吞和胞吐2种机制清除细胞表面沉积的MAC，并以胞吞方式为主。     

耳穴静态电测量中的瞬变响应

耳穴电参数时变关系实验表明，在测量起始ｔ＜２τ时，因瞬变作用，电位Ｅ（ｔ）和压降Ｕ（ｔ）为瞬态响应，响应函数呈指数关系，特征参数为弛豫时间τ，τ≈ＲＣ；ｔ＞２τ时，为时变间期。电路分析给出数学描述，并与耳穴和模拟实验结果较相符。提示，时变特征应以ｔ＞２τ后提取，静态电测量时，采样应避开瞬变期，可提高准确性。该工作对正确鉴别时变性和特征提取，全面认识耳穴电特性具有重要意义。     

单克隆抗体2A7亲和层析法纯化红细胞膜表面的CD59分子

用抗ＣＤ５９单抗２Ａ７与ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制备亲和层析柱，从正常人红细胞膜蛋白抽提物中分离纯化出ＣＤ５９分子。本法纯化的ＣＤ５９分子量为１８－２０ＫＤａ对还原剂敏感，与ＭｃＡｂｓｓＭＥＭ４３和１Ｆ５有高亲和性，再掺入豚鼠红细胞后，能够抑制人体补体的反应性溶血，本文还对三株抗ＣＤ５９单抗２Ａ７，ＭＥＭ４３及１Ｆ５的抗原特异性进行了初步分析。     

妊娠高血压综合征与A型行为关系的初步研究

性格类型与高血压病的相关性[1 ,2 ]及因妊娠而诱发高血压的研究甚多[1 - 3] 。但妊娠后高血压是否同A型行为有关?为此,作者于2 0 0 3年1月～10月,选取本院产科门诊中没有高血压家族史、基础血压正常,妊娠期发生妊娠高血压综合征(以下简称“妊高征”)的孕妇6 4例作为研究组,并设对照组6 4例,对她们进行A型行为测定。研究组:年龄最小2 3岁,最大35岁,平均年龄2 7岁;受教育程度:小学16人、中学4 0人、大专以上8人;职业:工人2 0人、农民4 0人、干部2人、无业2人;孕产次:G1:16人、G2 :34人、G3:12人、G5 :2人;P0 :5 6人、P1:8人;孕周:最短2 7…     

Fas cDNA克隆、表达及重组蛋白纯化的研究

目的:获得高质量及充足的Fas重组蛋白。方法:采用PCR构建表达重组质粒,亲和层析纯化Fas重组蛋白,ELISA检测其免疫学功能。结果:①PCR扩增获得目的片段约 470 bp。②Sanger双脱氧链终止法测序表明,该 DNA序列仅 174位由A→G突变,属于同义突变,与已知的Fas膜外区氨基酸完全一致。③重组质粒经IPTG诱导有一蛋白得以表达,其目的融合蛋白占细菌总蛋白的17. 4%,分子量约为 34．3 kD。④经 Factor Xa切割 Fas融合蛋白,纯化获得 Fas重组蛋白,Western印迹出现特异性Fas蛋白带,分子量为21．3kD,与预测结果相吻合。⑤ELISA检测 Fas重组蛋白,具有抗体的免疫学活性。结论:成功地表达并纯化了Fas重组蛋白,解决了Fas不易获得的难题,为研究Fas提供了良好的实验材料。     

新生儿静脉补钙方法的探讨

目的 探讨减少新生儿钙渗漏的有效措施。方法 对2002年1月至2004年5月住院的静脉补钙患儿380例及2004年6月至2006年12月住院的静脉补钙患儿420例，实施两种不同的静脉补钙流程，比较两组患儿钙渗漏发生率。结果 实施新静脉补钙方法的渗漏发生率为0．7％，实施旧静脉补钙方法的渗漏发生率为4．2％。结论 规范钙剂使用方法。统一制定处理流程，可减少钙渗漏发生。