含c-Src同源序列SH2酪氨酸磷酸酶在尖锐湿疣组织中的表达

目的 探讨与含c-Src同源序列SH2的酪氨酸磷酸酶(SHP-2)在尖锐湿疣组织中的表达及意义。方法 采用免疫组化染色法检测了30例尖锐湿疣、13例宫颈癌和11例正常包皮组织中SHP-2的表达。结果包皮组织中磷酸酪氨酸和SHP-2阳性着色主要定位在表皮基底层角质形成细胞胞核，阳性表达细胞数量较少；而尖锐湿疣则相反，主要位于呈疣状增生浅层的凹空细胞胞浆内，阳性细胞成片分布；宫颈鳞状细胞癌的胞浆呈阳性表达，弥漫性分布，胞核呈阴性表达。尖锐湿疣和宫颈鳞状细胞癌中磷酸酪氨酸和SHP-2的阳性表达率分别为96．67％(29／30)和100％(13／13)，而11例正常包皮均呈胞浆阴性表达。结论尖锐湿疣和宫颈癌细胞均存在与磷酸酪氨酸和SHP-2相关的细胞信息通路的异常激活。磷酸酪氨酸和SHP-2分布部位和阳性强度的改变可能与其癌变过程有关。     

胃液中胃癌相关抗原(GCRA)测定

作者用自行研制的鼠源性胃癌细胞单克隆抗体与溴化氰活化的葡聚糖4B（CNBr－Sepharose4B）偶联，从胃癌组织匀浆中分离相关抗原（gastriccarcinomarelatedantigen，GCRA）。通过免疫家兔获得兔源性多抗，建立酶免疫GCRA测定法。用以检测167例胃液标本，结果胃癌组阳性率71．9％（41／57）；癌前期病变28．6％（6／21）；正常组6．6％（6／89）。胃癌组与正常组比较P＜0．001。GCRA对胃癌诊断敏感性89．1％，特异性71．9％，提示检测胃液GCRA可提高胃癌的检出率。     

苦参碱抑制人大肠癌HT29细胞增殖及诱导凋亡作用与机制

目的探讨苦参碱对人大肠癌HT29细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及其可能机制。方法分别采用MTT法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡、透射电镜观察细胞结构变化、基因芯片检测细胞基因表达改变。结果0.0625～0.5mg/mL苦参碱处理48h后,细胞增殖明显受抑制;但1mg/mL时增殖抑制率降低而凋亡诱导作用明显增强;苦参碱对细胞G2/M和G1/S期均有阻滞作用;电镜下可见凋亡的形态学变化;基因芯片检测发现苦参碱影响细胞增殖、周期和凋亡相关基因的表达。结论苦参碱通过影响HT29细胞一些与增殖、周期和凋亡相关基因的表达发挥增殖抑制和凋亡诱导作用,且与苦参碱质量浓度相关。     

低位直肠癌保肛手术临床观察

目的探讨低位直肠癌保肛手术的效果。方法对38例低位直肠癌患行保肛手术,回顾性分析患者的临床资料。结果38例患者均顺利完成手术,未发生吻合口瘘、出血及狭窄等并发症。肛门排便功能均恢复正常。随访2年,2例局部癌肿复发(5.2%)。结论在直肠系膜完全切除的基础上,用双吻合器进行低位直肠癌保肛术,可显著改善患者的生活质量。     

慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌babA2和cagA及vacA基因型分析

目的 :研究慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌 (Hp) bab A2、cag A、vac A基因型的分布 ,探讨 Hpbab A2、cag A、vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。方法 :用聚合酶链反应测定 5 8株从浙江省慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2基因、cag A基因和 vac A基因亚型。结果 :5 8株 Hp中 bab A2、cag A、vac A s1a、vac A m1、vac A m2基因的阳性率分别为 87.9%、10 0 %、93.1%、1.7%、65 .5 %。慢性胃炎和消化性溃疡患者感染的Hp bab A2、vac A s1a、vac A m2基因阳性率差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :从浙江地区慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2、cag A、vac A基因型均以 bab A2阳性、cag A阳性和 vac A s1a/ m2型为主 ,未发现 Hp bab A2、cag A和 vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。     

疝环充填式无张力疝修补术17例分析

疝环充填式无张力疝修补术是利用一种人工复合材料进行无张力疝修补术的最新术式，1997年起相继在我国部分大中城市推广，但由于修补材料昂贵，目前在基层医院尚难于普及。我院2003年4月-2005年2月应用该术式治疗17例，现将手术结果分析报告如下。     

磁性激活细胞分选技术分离胃癌患者外周血、门静脉血癌细胞及临床初步应用

目的　建立一种分离血液中肿瘤细胞的磁性激活细胞分选 (MACS)技术并评价其临床价值。方法　采用胃肿瘤细胞膜表位的MG7、CEA、QY和MMP9单抗分别与溴化氰活化的Sepharose 4B磁珠交联 ,从胃癌患者外周血、门静脉血中分离出肿瘤细胞。结果　应用MACS技术从外周血中分离出肿瘤细胞的阳性率为4 9.15 % (2 9/5 9) ,从门静脉血中分离出肿瘤细胞的阳性率为 90 .32 % (2 8/31) ,两者比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。用MACS技术从外周血、门静脉血中分离出肿瘤细胞的阳性率与患者临床分期无关。结论　MACS技术是一种有效分离肿瘤细胞的可靠方法 ,可从胃癌患者外周血中分离出少量肿瘤细胞 ,有助于进一步探讨恶性肿瘤的发生、发展、浸润转移、多重耐药机制     

视黄醇结合蛋白的快速酶联免疫法测定

本文用聚乙醇为加速剂建立了视黄醇结合蛋白(RBP)的快速酶联免疫测定法。探讨不同浓度聚乙醇在不同反应温度时对快速酶联免疫反应的影响及聚乙二醇对抗体保存活性的影响,并与进口同类试剂盒进行了相关性分析。结果表明快速酶联免疫测定法具有操作简便,反应时间短,重复性好及敏感性高等优点,可替代进口同类产品。     

正常大肠干细胞的条件永生化

目的:建立正常人大肠干细胞系.方法:用中性蛋白酶分级分离法从人胚肠中分离正常大肠干细胞,以含端粒酶逆转录酶和SV40大T抗原的重组逆转录病毒感染,对其进行永生化;然后,对建立的正常大肠干细胞系进行生物学特性鉴定.结果:用中性蛋白酶分级消化获得的AKP活性阴性的细胞群生长呈多角形.该细胞群转染含端粒酶逆转录酶和SV40大T抗原的重组逆转录病毒后8～12周出现上皮样细胞克隆,经细胞特性鉴定:PAS染色黏蛋白阳性,上皮细胞角蛋白pan、CK-8、CK-19均阳性;用ELISA-PCR法检测该细胞第12代和第43代端粒酶活性,分别为0.43、0.83;用Western blot法检测发现该细胞系表达端粒酶和SV40大T抗原;用RT-PCR检测示该细胞株表达Musashi-1 mRNA;以1×106细胞数接种裸鼠,观察4个月无肿瘤形成,软琼脂克隆试验培养无转化细胞克隆出现.结论:建立的正常的大肠干细胞系具有干细胞特征,可作为体外研究致癌剂/促癌剂作用机制的较理想实验靶点.