介绍一种应用双色荧光复位杂交检测人精子染色体数目异常的技术

研究人类精子染色体常用的方法有两种,一种是用人类精子体外穿透金黄地鼠卵[1],这个方法虽然可以观察到精子的全部染色体组成,但由于这个方法操作复杂,十分耗时,且只适合于可以穿透金黄地鼠卵的精子,因而在临床上受到很大限制,推广起来也很困难.     

精子形态正常率与体外受精妊娠结局的关系

目的：探索精子形态对卵子受精率、卵裂率及临床妊娠率的影响,为不孕症患者行辅助生殖技术治疗前助孕方式的选择提供理论依据也为辅助生殖技术方法的改善,积累理论和实践经验。方法：回顾性分析2008年1月至12月接受辅助生殖治疗的1 369例患者的精液分析资料,根据患者精子形态分为4组（≤5.0%,5.1%～10.0%,10.1%～15.0%,＞15.0%）,分别采用体外受精（IVF;n=490)或卵胞浆精子注射(ICSI; n=261）的受精方式。供精者（618例）精子也分为4组（14.0%～17.0%, 17.1%～19.0%,19.1%～23.0%及＞23.0%）,采用IVF受精方式。比较各组精子形态与受精率、卵裂率及临床妊娠率的关系。结果： IVF（病人或供精者）受精方式下,各形态精子组的临床妊娠率、受精率差异有统计学意义（P＜0.05),但卵裂率差异无统计学意义（P＞0.05);ICSI受精方式下,各形态精子组的临床妊娠率、受精率、卵裂率间差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：精子形态异常影响IVF成功率;精子形态对ICSI治疗结局无显著影响,对精子形态异常患者采用ICSI技术为最佳。     

精子库的设立及面临的伦理问题

据世界卫生组织统计,在育龄夫妇中不孕不育者所占比例为10%～15%[1],并仍有上升趋势.不孕不育症严重影响了人类的生殖健康,并对家庭及社会的稳定造成一定的危害.在不孕不育症中,男性因素所占比例高达40%,导致男性不育的因素很多,其中生精机能障碍是非常重要的因素.随着冷冻生物学及生殖医学的迅猛发展,人类精子库的建立为解决男性因素所致的不育及男性生殖保险提供了现实的技术支持.     

树鼩CD4蛋白多克隆抗体的制备及检测

目的 原核表达、纯化树鼩CD4蛋白并制备多克隆抗体,检测树鼩体内的CD4蛋白.方法 克隆树鼩CD4基因并连接到表达载体,构建重组质粒pET30a(+)-CD4和pGEX-5X-1-CD4,表达并纯化重组蛋白His-CD4和GST-CD4,用不同佐剂[弗氏佐剂、MF59和A1(OH)3]制备多抗,用Western blot法检测血清抗体特异性.结果 蛋白表达产物His-CD4和GST-CD4的相对分子质量分别约为53.5×103和70.0×103,纯化后蛋白浓度分别为600 μg/mL和1 mg/mL;三组佐剂均能诱导产生抗体,抗体几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)的比较结果为:弗氏佐剂组(GMT:97 420)＞Al(OH)3佐剂组(GMT:67 202)＞MF59佐剂组(GMT:55 128);其中弗氏佐剂组显著高于原蛋白组(P＜0.001);Al(OH)3组显著高于原蛋白组(P＜0.01);而MF59组显著高于原蛋白组(P＜0.05).结论 制备了特异性良好的小鼠抗血清,能够特异性地结合树鼩的CD4蛋白.为下一步本实验室制备CD4单克隆抗体、CD4蛋白分子的功能研究以及树鼩的病毒感染模型等免疫相关实验的进行提供了基础.     

精子因素对反复自然流产的影响

目的 分析精子因素对反复自然流产的影响.方法 病例组:21例不明原因反复自然流产患者丈夫,对照组:20名已生育男子,采用精子染色质结构分析方法 分析精子DNA完整性,参照WHO标准分析精液质量,选用X、Y和18号染色体探针进行荧光原位杂交(FISH)检测精子的非整倍体性.结果 病例组正常形态率(10.8±2.8)%低于对照组,DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)值(21.7±6.7)%、18染色体非整倍体率(0.23±0.09)%、性染色体非整倍体率(0.80±0.14)%均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 精子形态、DNA完整性和染色体非整倍体率是反复自然流产的相关性因素.     

无头精子症的表型、遗传学分析与治疗策略

目的 探讨无头精子症的表型、遗传学病因与治疗策略.方法 对2020年1月至12月来中信湘雅生殖与遗传专科医院就诊的10例严重无头精子症患者,进行全外显子组测序、精子巴氏染色和卵细胞质内单精子注射(ICSI)妊娠结局分析.结果 在10例严重无头精子症患者中,鉴定到3个基因SUN5、TSGA10、PMFBP1的11种纯合或...     

高质量脑组织快速冷冻切片的制作方法

冷冻切片由于其方法简便快捷,在临床术中快速病理诊断中起重要作用。尤其神经外科疾病的术中快速诊断,利用冷冻切片已成常规,由于术中送检脑病变组织较少,富含水份,易形成冰晶,快速冷冻切片的制作难度大,从而影响病理诊断的准确性,笔进行通过反复摸索,对常规方法加以改进,并对操作过程中的重要步骤进行规范,制作出了质量较高的冷冻切片,现介绍如下。     

企业所得税节税筹划方法研究

依法纳税是纳税人应尽的义务,但税收的无偿性决定了纳税人税款的支付是资金的净流出,所以,税收筹划作为纳税人对经济利益的一种追求是完全必要的。文章从税基、税率及企业经营结构的调整等三方面系统地分析了企业所得税节税筹划的方法、理念及其应注意的事项,以帮助企业达到合法节税的目的。     

不同来源精子及其活力与无精子症患者ICSI受精结局的关系

目的 探讨不同来源精子及其活力与无精子症患者卵胞浆内单精子注射(ICSI)受精结局的关系.方法 回顾性分析ICSI助孕的286例无精子痘患者的临床资料.根据精子来源的不同,将患者分为附睾精子组(PESA组)或睾丸精子组(TESA组);同时根据精子活力的不同,将两组患者分别分为活动精子和不活动精子亚组.比较各组患者受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、胚胎种植率和临床妊娠率的差异.结果 PESA组和TESA组患者的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、胚胎种植率及临床妊娠率差异无统计学意义(P＞0.05).PESA组不活动精子患者的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、胚胎种植率和临床妊娠率显著低于PESA组活动精子、TESA组活动精子和TESA组不活动精子患者(P＜0.05);TESA组不活动精子患者的受精率显著低于PESA组活动精子和TESA组活动精子患者(p＜0.05).结论 不同来源精子与无精子症患者ICSI的妊娠结局无相关性;附睾精子活力影响ICSI受精结局,睾丸精子活力影响ICSI受精率.