高糖诱导人肾小球系膜细胞SGK的表达

目的　研究高糖环境中人肾小球系膜细胞(human mesangial cells, HMC) 中血清和糖皮质激素诱导的激酶(serum and glucocorticoid inducible kinase, SGK) 3种亚型SGK1、SGK2和SGK3的表达及意义。方法　将培养的HMC分为正常组(5 5 mmol/L D 葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L D -葡萄糖) 和甘露醇对照组(19. 5 mmol/L甘露醇和5. 5 mmol/L D 葡萄糖)。采用RT PCR 方法检测SGK1、SGK2 和SGK3 mRNA 的表达, Western blot 方法检测SGK1蛋白的表达。结果　在高糖及甘露醇刺激下, HMC中SGK1、SGK2和SGK3 mRNA及SGK1 蛋白的表达明显上调(P<0. 05); 其中高糖上调SGK的表达明显高于甘露醇(P<0 .05)。结论　高糖能促进HMC的SGK1、SGK2 和SGK3mRNA及SGK1蛋白的表达, SGK1可能是高糖作用于HMC的细胞内信号通路中靶分子之一, 由它介导的高糖信号转导途径在糖尿病肾病的发生中可能起了重要作用。     

血管内皮生长因子及其受体在先兆子痫大鼠肾损伤中的作用

目的　研究血管内皮生长因子 ( VEGF)及其受体 ( VEGFR)在先兆子痫大鼠肾损伤中的作用。方法　采用一氧化氮合酶抑制剂复制大鼠先兆子痫模型 ,应用原位杂交法测定肾小球 VEGF m RNA转录水平 ,利用免疫组化法检测肾小球 VEGF和 VEGFR蛋白表达情况。结果　在先兆子痫大鼠中 ,肾小球局部 VEGF m RNA和 VEGF、VEGFR-2蛋白表达均增强 ,且表达的强度与 2 4h尿蛋白排泄量呈正相关。结论　肾小球 VEGF- VEGFR系统可能参与了先兆子痫中大量蛋白尿的产生     

活性氧介导醛固酮诱导的足细胞凋亡

目的 观察醛固酮（ALD）及其受体拮抗剂螺内酯（SPI）对足细胞活性氧（ROS）产生及凋亡的影响,并探讨其可能机制。 方法 体外培养条件的永生化小鼠足细胞系,分为空白对照组、ALD组、SPI组、ALD+SPI组;用荧光分光光度计检测足细胞内ROS水平;间接免疫荧光检测nephrin表达;流式细胞仪检测足细胞凋亡率;RT-PCR、Western 印迹法检测bax、bcl-2 mRNA及蛋白表达。同时观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对上述效应的阻断作用。 结果 与对照组相比,ALD诱导足细胞ROS产生增多（P < 0.05）,该作用可被SPI阻断（P < 0.05）。ALD可诱导足细胞nephrin表达降低及足细胞凋亡（P < 0.05）,同时伴有bax mRNA、蛋白表达升高及bcl-2 mRNA、蛋白表达降低（P < 0.05）,SPI及NAC可阻断这一变化（P < 0.05）。 结论 ALD通过ROS途径作用于盐皮质激素受体上调促凋亡因子bax表达,下调抑凋亡因子bcl-2表达,进而诱导足细胞凋亡。     

浅议民间中医古处方中剂量的书写

主要对民间手写抄本的中医古处方中剂量书写字进行探究,为研究民间中医手写传本提供参考。     

特异性shRNA抑制人近端肾小管上皮细胞Toll样受体4的表达

目的:研究RNA干扰法对人近端肾小管上皮细胞(HKC)中Toll样受体4(TLR4)表达的抑制作用。方法:将针对TLR4分子设计的采用体外转录生物合成的特异性短发卡RNA(shRNA)双链分子用脂质体转染的方法导入体外培养的HKC;应用免疫荧光染色在共聚焦显微镜下观察TLR4的分布及表达强弱;半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测TLR4及内参照-βactin在mRNA水平和蛋白水平的表达量。结果:干扰组TLR4的荧光强度显著低于对照组,其mRNA和蛋白的表达量分别下降了67%和62%。同时观察到TLR4主要分布于HKC细胞的胞膜及胞质区。结论:采用生物体外转录的方法成功合成针对TLR4的shRNA双链分子,并有效地转入HKC细胞中使TLR4的表达下调。     

Protective effect of sulodexide on podocyte injury in adriamycin nephropathy rats

This study examined the effect of sulodexide on podocyte injury in rats with adriamycin nephropathy （AN）. A total of 36 healthy male SD rats were randomly assigned to three groups： control group, AN group and sulodexide treatment group. Rat models of AN were established by a single tail intravenous injection of adriamycin （6.5 mg/kg） in both AN group and sulodexide treatment group. Sulodexide （10 mg/kg） was administered the rats in the treatment group once daily by garage from the first day of model establishment until the 14th day or the 28th day. Samples of 24-h urine and renal cortex tissues were harvested at day 14, 28 after the model establishment. Excretion of 24-h urinary protein was measured by Coomassie brilliant blue method. The pathological changes in renal tissues were observed by light microscopy and electron microscopy respectively. Heparanase mRNA was detected by RT-PCR. Expressions of desmin, CD2AP and heparanase were determined by immunohistological staining. The results showed that the expressions of heparanase mRNA and protein were increased in the glomeruli of AN rats at day 14 and 28 after the model establishment, which was accompanied by the increased expression of desmin and CD2AP. The mRNA and protein expression of heparanase was decreased in the sulodexide-treated rats as compared with AN rats at day 14 and 28. And, the protein expression of desmin and CD2AP was reduced as with heparanase in the sulodexide-treated rats. Proteinuria and podocyte foot process effacement were alleviated in the AN rats after sulodexide treatment. There was a positive correlation between the expression of heparanase and the expression of desmin and CD2AP （as well as 24-h urinary protein excretion）. It was concluded that increased heparanase is involved in podocyte injury. Sulodexide can maintain and restore podocyte morphology by inhibiting the expression of heparanase in AN.     

褪黑素对高糖诱导的大鼠系膜细胞凋亡及Caspase-3的影响

目的：探讨褪黑素（melatonin，MT）对于高糖条件下培养的大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cell，MC）凋亡及Caspase-3的影响。方法：光镜观察大鼠MC凋亡的形态学变化；免疫细胞化学检测Caspase-3的表达改变。结果：褪黑素对于30mmol／L浓度的葡萄糖诱导的MC高凋亡率有明显的抑制作用（P〈0．05）；并能明显抑制Caspase-3的表达。结论：褪黑素可以通过抑制Saspase-3表达来降低高糖诱导的大鼠MC高凋亡率。     

抑制Rho—kinase在柔红霉素诱导的肾小球硬化中的作用及机制

目的：研究抑制Rho—kinase对柔红霉素诱导的肾小球硬化的调控作用，并探讨Rho—kinase抑制剂法舒地尔改善肾小球硬化的作用机制。方法：36只雄性SD大鼠，随机分为三组：假手术（Sham）组，单侧肾脏切除＋柔红霉素（模型）组，单侧肾脏切除＋柔红霉素＋法舒地尔（干预）组，每组各12只。模型组和干预组大鼠在切除左肾后第7、14天，从尾静脉各注射柔红霉素5mg／kg 1次，同时Sham组大鼠以等剂量的生理盐水尾静脉注射。干预组在第2次注射柔红霉素后从腹腔每天注射法舒地尔3mg／kg，完成上述处理后的第2、4周，随机取各组大鼠6只处死留取肾标本，处死前收集24h尿液检测尿蛋白排泄，用HE，PAS染色，免疫组化，透射电镜进行肾组织病理学分析，应用RT-PCR检测Rho—kinase，P27的核酸表达水平。结果：（1）模型组较Sham组24h尿蛋白明显升高（P〈0．01），而法舒地尔干预后，干预组24h尿蛋白较模型组显著降低（P〈0.05）。（2）模型组大鼠足细胞第4周时出现了弥漫性足突融合，系膜基质增殖明显，出现典型的肾小球节段性硬化，免疫组化PCNA表达升高，P27表达下降；而干预组可以改善柔红霉素诱导的肾小球硬化大鼠足细胞的病理改变，系膜细胞增生受抑制，系膜基质蓄积减少，较模型组PCNA表达下降，P27升高。（3）模型组较Sham组Rho—kinase的mRNA表达升高，细胞周期抑制蛋白P27 mRNA的表达下降，而干预组较模型组Rho—kinase的mRNA表达显著降低，P27 mRNA的表达明显升高。结论：（1）抑制Rho—kinase的表达能明显改善柔红霉素诱导的大鼠的肾小球硬化。（2）法舒地尔的作用机制可能是通过改善足细胞的病理改变，减少蛋白尿，升高细胞周期抑制蛋白P27的表达，从而抑制系膜基质增殖，延缓肾小球硬化的进展。     

化学诱导大鼠获得性肾囊肿模型及炭吸附剂的保护作用

目的 建立化学诱导大鼠获得性肾囊肿模型，探讨炭吸附剂对肾脏的保护作用。方法 30只大鼠分为两组，DPT组全程喂食含二苯噻唑(DPT)饲料；治疗组喂食含DPT饲料后，于第17周喂食炭吸附剂，持续19周。DPT组于第17周，治疗组于第21、25、29、33周分别测血肌酐、尿素氮指标。第33周处死动物，行病理学检测。结果 DPT组肾脏出现囊肿样改变；治疗组与DPT组比较，肾脏病理学改变轻微，血肌酐、尿素氮水平较DPT组低。结论 炭吸附剂通过提高肌酐清除率、降低血肌酐水平，延缓化学诱导大鼠获得性肾囊肿的病变进程。     

多波长直线回归法测定双唑癣药水中益康唑和克霉唑含量

应用多波长直线回归法测定双唑癣药水中益康唑、克霉唑两组分含量，测定波长范围２８０～２５０ｎｍ，以１ｎｍ为间隔，共３１点。按此法测定二组分的平均回收率分别为１００．０％和１００．５％（ｎ＝５），ＲＳＤ分别为０．３６％和０．４８％。