茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响

目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ, ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用;用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮＥ２ 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果　ＴＰ可引起ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２ 细胞在周期中的进程,使Ｇ１ 期细胞明显增多,Ｓ期细胞减少,细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时,ＴＰ可诱导ＣＮＥ２ 细胞凋亡,其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论　ＴＰ１９９８ １２ ０４ 收稿,１９９９ ０７ ３１ 修回＊ 国家自然科学基金资助课题,Ｎｏ ３９３７０８００作者简介：谢冰芬,女,副研究员,硕士生导师,研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞的ＤＮＡ 断裂,使细胞停滞于Ｇ１ 期,阻止Ｇ１ 期细胞进入Ｓ期;同时亦可诱导细胞凋亡,这些结果可能为ＴＰ的抗瘤作用提供理论依据     

拓扑替康诱导卵巢癌细胞自噬的实验研究

目的:检测拓扑替康(TPT)对卵巢癌OVCAR3细胞的增殖抑制作用,观察TPT诱导OVCAR3细胞自噬现象,初步探讨其发生的可能机制。方法:采用不同浓度的TPT处理卵巢癌OVCAR3细胞,MTT法测定TPT对OVCAR3细胞增殖的抑制作用,吖啶橙(AO)染色观察酸性小体(AVO)形成,MDC荧光染色检测自噬囊泡。免疫印迹法检测TPT对OVCAR3细胞LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白的影响。结果:TPT对OVCAR3细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的剂量依赖性,IC50为0.057μg/mL。TPT可诱导OVCAR3细胞产生AVO。MDC荧光染色显示,TPT可诱导OVCAR3细胞产生自噬囊泡。采用0.05μg/mL TPT处理OVCAR3细胞24h后,免疫印迹法显示,随着时间的推移LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白水平表达个逐渐增加,提示TPT诱导的OVCAR3细胞自噬可能与Bec-lin1蛋白有关。结论:TPT对OVCAR3细胞有显著的抑制作用,TPT可以诱导OVCAR3细胞发生自噬,TPT诱导OVCAR3细胞自噬可能与Beclin1蛋白上调有关。     

神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的　了解第二信使神经酰胺信号转导对鼻咽癌细胞生长的影响。方法　采用MTT法检测神经酰胺对鼻咽癌细胞株 (CNE 2 )增殖的抑制作用。光镜观察、荧光染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变。Westernblot法检测p2 1WAF1的表达。结果　神经酰胺在 6 2 5、12 5、2 5、5 0 μm浓度下 ,对CNE 2细胞生长有明显的抑制作用 ,流式细胞仪检测发现亚G1峰出现 ,荧光染色可见核荧光强度增加、核片段化和凋亡小体。p2 1WAF1蛋白表达明显上调。结论　神经酰胺能诱导鼻咽癌细胞株CNE 2凋亡 ,且上调 p2 1WAF1蛋白表达。p2 1WAF1可能是神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡中起作用的因素之一。     

DNA引物酶的提取分离与引物合成活性的研究

以小鼠艾氏腹水癌细胞经超声破碎的提取液为材料，依次用ＤＥ－５２和Ｐ－１１层析柱进行离子线的洗脱，分别在ＫＣｌ浓度的０．１７～０．２ｍｏｌ／Ｌ和０．２５～０．２７ｍｏｌ／ｌ处ＤＮＡ引物酶被洗脱下来。用大肠杆菌大片段ＤＮＡ多聚酶Ｉ延长引物法检测Ｄ引物酶比活性为８７５３Ｕ／ｍｇ，酶总获得为２２．１％，放射自显影法检测引物合成活性显示引物酶合成了不同长度的引物。     

化疗药物对肿瘤微血管的毒性作用

一般认为，化疗药物是非特异的血管生成抑制剂。如果部分化疗药物在体内有较强的血管毒性，在常规化疗中恰当应用该类药物有可能改善化疗反应，提高实体瘤缓解率.     

无刺根中蛇葡萄素体外抗肿瘤作用研究

目的:研究蛇葡萄素在体外对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法:采用MTT法,检测蛇葡萄素对白血病细胞HL-60、K562以及肝癌Bel-7402细胞生长的抑制作用.结果:蛇葡萄素在浓度为100、50、25、12.5、6.25μg/ml下,对Bel-7402细胞增殖抑制率分别为82.3±19%、79.5±1.7%、73.4±5.5%、47.0±2.5%和6.0±3.2%,对HL-60、K562细胞增殖抑制率分别为94.1±5.1%、88.2±3.2%、67.6±3.1%、60.1±4.7%、23.5±6.2%和88.9±3.1%、83.3±2.4%、55.6±7.1%、31.5±4.6%、25.9±6.0%,抑制的IC50值分别为18.65(15.92、21.84)μg/ml、12.41(10.40、14.78)和18.39(15.59、21.70)μg/ml.结论:本研究结果显示蛇葡萄素对肿瘤细胞Bel-7402、HL-60和K562增殖有明显的抑制作用,可能具有较高的开发价值.     

阿诺宁乳化剂的抗瘤作用和急性毒性试验

 目的研究阿诺宁乳化剂的抗瘤作用和急性毒性反应。方法用小鼠和裸鼠移植性肿瘤模型测定体内抗瘤活性，用Blliss方法计算小鼠给药的急性毒性的LD₅₀。结果阿诺宁乳化剂在4，8和16 mg·kg^-1，灌胃(ig)qd×10 d，对小鼠肝癌HepS 3批实验的平均抑瘤率分别为39.2%，46.9%和55.7%；对小鼠肉瘤S-180的平均抑瘤率分别为34.6%，47.3%和54.4%；对小鼠L₂的平均抑瘤率分别为37.5%，45.9%和56.5%。阿诺宁乳化剂在7.5，15，30和60 μg·kg^-1腹腔注射(ip)×10d 剂量下，对小鼠肝癌(HepS)实验的平均抑瘤率分别为31.0%，42.9%，50.2%和62.4%；对小鼠肉瘤S-180的平均抑瘤率依次为23.6%，39.4%，50.9%和61.2%；在15，30和60μg·kg^-1，ip，每日1次，每周6次，共4周的剂量下，对人肝癌(Bel-7402)裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为32.0%，50.5%和60.2%；在上述3个剂量下，对人肺腺癌(GLC-82)裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为30.3%，41.9%和56.1%。结果表明，阿诺宁乳化剂ig，ip对上述5种肿瘤均有明显的抑制作用，且其抑瘤率与阿诺宁乳剂的剂量相关。用Bliss方法统计出阿诺宁乳化剂对小鼠ig一次的半数致死量(LD₅₀)及其95%可信限为74.75 (58.67～5.26) mg·kg^-1；ip的LD₅₀)为1.12 (1.01～1.24)mg·kg^-1)，静脉注射(iv)的LD₅₀为1.81(1.61～2.03) mg·kg^-1。结论阿诺宁乳化剂对多种小鼠和裸鼠移植瘤均有明显抗瘤作用。     

单侧椎弓根固定m-TLIF治疗单节段极外侧腰椎间盘突出伴腰椎不稳的临床效果

目的:研究单侧椎弓根固定改良型腰椎间孔椎间融合(m-TLIF)治疗单节段极外侧腰椎间盘突出伴腰椎不稳的临床效果.方法:收集2015～2019年弋矶山医院脊柱外科收治的采用单侧椎弓根固定m-TLIF治疗单节段极外侧腰椎间盘突出伴腰椎不稳患者20例,记录年龄、性别、手术时间、手术出血量及突出节段等信息,并记录患者术前及术后...     

发夹结构RNA表达载体特异性抑制结肠癌LoVo细胞绿色荧光蛋白基因表达

目的 构建针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA表达载体(SHi-pU6-GFP)，观察SHi-pU6-GFP对结肠癌LoVo细胞的GFP特异性抑制作用。方法 设计合成针对绿色荧光蛋白GFP基因的发夹RNA(shRNA)序列，构建SHi-pU6-GFP质粒。采用报告基因质粒pCX-GFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6(3．3kb)质粒，应用Lipofectamine^TM 2000将pCX-GFP质粒和SHi-pU6-GFP质粒转染K562细胞和LoVo细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果 质粒pU6和SHi-pU6-GFP经EcoRⅤ和XbaⅠ酶切电泳后，前者出现3．3kb和约300bp条带，而后者出现3．3kb和约350bp条带，与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHi-pU6-GFP质粒。K562细胞和LcVo细胞中分别观察到转染pCX-EGFP质粒和SHi-pU6-GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。结论 结肠癌LoVo细胞存在RNA干扰现象，可以进行相关RNA干扰抑制实验。     

天然紫草萘醌类化合物及其衍生物的抗瘤作用研究

紫草为传统中药，具有广泛的药理作用，抗瘤作用是其中之一。由于天然紫草有效成分含量极低，抗癌活性不强，限制了临床上应用。为了提高萘醌类化合物的抗癌活性，现以紫草有效成分β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁作为先导化合物，进行结构改造，在芳环C-6或C-7以及侧链C-11引入含巯基或含氮基团，半合成系列紫草萘醌类衍生物（SYUNZs），对这系列衍生物进行体外体内试验，进一步了解紫草萘醌类衍生物的抗癌活性与其结构的相关性，为开发高效低毒的新型紫草萘醌类抗肿瘤药物提供理论数据。