表面增强激光解吸电离飞行时间质谱在卵巢癌中的应用

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是近年出现的蛋白质研究新技术,其综合了蛋白芯片和质谱技术的优点,可快速、高通量捕捉血清、组织及体液中的特异性蛋白质。SELDI-TOF-MS已应用于卵巢癌的早期诊断、指导治疗及预后判断等研究。     

树突状细胞抗原负载方法探讨

目的 探讨树突状细胞（DC）抗原负载方法。方法 体外诱导培养外周血单核细胞来源的DC,分别用脂质体和Nucleofector转染试剂盆体外负载抗原,比较2种负载方法转染效率以及对DC表型的影响。结果 Nucleofector转染方法能够显著的提高转染效率,2种转染方法对DC细胞的表型无显著影响。结论 Nucleofector转染是一种有效的DC抗原体外负载方法,为抗原修饰的DC细胞疫苗的改进提供了新的途径。     

生物信息学在医学研究中的应用进展

随着高通量技术的出现及其在疾病基因组、蛋白组学研究中的应用,生物信息学在解读基因组、转录组及蛋白质组学分析产生的海量数据中发挥着越来越重要的作用。生物信息学在致病基因寻找、药物有效靶点筛选等医学研究各领域的发展日益深入。现就生物信息学在基础医学、临床医学及药物开发研究中的应用进展进行综述。     

雌、孕激素对早孕蜕膜基质细胞中Mig和IP-10表达的影响

母胎平衡机制一直是生殖研究领域的热点和难点之一.有研究证实,母胎界面中表达的趋化因子-趋化因子受体系统在保持母胎平衡中起重要作用[1-2].CXC类趋化因子Mig和IP-10在早孕蜕膜上皮及基质细胞中高表达,其表达变化与蜕膜中免疫细胞聚集和滋养细胞生物学行为有关[3-4].     

四氧嘧啶糖尿病小鼠免疫状态及胰岛素免疫调节作用的研究

本文以四氧嘧啶糖尿病小鼠为模型,探讨了糖尿病小鼠在高血糖低胰岛素状态下对免疫器官、自然杀伤活性细胞、脾淋巴细胞增殖及IL-2产生的影响。结果表明,高血糖低胰岛素状态可致小鼠脾脏及胸腺明显萎缩,脾细胞总数减少(均P<0.01)。体内YAC-1细胞清除率降低,淋巴细胞对ConA的增殖反应及IL-2产生能力减弱。体外给予胰岛素可使病鼠淋巴细胞对ConA的增殖反应显著升高,IL-2合成增多,表明胰岛素具有重要的免疫调节作用。     

缺氧条件下HIF-1α对舌鳞癌细胞VEGF-C及FAS表达的影响

目的探讨缺氧条件下人舌鳞癌Tca8113细胞株HIF-1α对VEGF-C及FAS基因表达的影响。方法采用RT-PCR技术半定量检测人Tca8113细胞常氧和缺氧培养0.5、1、3、6、12和24h HIF-1α、VEGF-C和FAS基因的表达。结果缺氧条件下HIF-1α与VEGF-C基因表达呈先升后降的趋势,二者表达呈显著正相关性（rs=0.979,P〈0.01）。FAS基因表达呈上升趋势,与HIF-1α表达无明显相关性（rs=0.556,P〉0.05）。结论缺氧条件下Tca8113细胞中HIF-1α可上调VEGF-C的表达,促进癌细胞的转移;HIF-1α参与促进肿瘤细胞FAS的表达,影响舌癌细胞的凋亡。     

hCG对HTR8 SVneo滋养层细胞系MMP 2表达的影响与调控机制

目的探讨绒毛膜促性腺激素（hCG）对滋养层细胞系HTR8 SVneo侵袭活性的影响及其可能的调控机制。方法将培养的HTR8 SVneo细胞根据处理因素分为对照组、低浓度hCG（10?IU/mL）刺激组、高浓度hCG（100?IU/mL）刺激组,再将HTR8 SVneo细胞分为对照组、hCG（100?IU/mL）刺激组、DPCPX(A1R特异性阻断剂）+hCG（100IU/mL）联合刺激组。采用RT PCR检测各组HTR8 SVneo细胞基质金属蛋白酶 2（MMP 2）的表达变化,明胶酶谱检测各组HTR8 SVneo细胞MMP 2蛋白水平的分泌变化。 结果高浓度hCG（100?IU/mL）较低浓度hCG（10?IU/mL）刺激后的HTR8 SVneo细胞MMP 2的表达与分泌均上升（P<均0.05）;腺苷受体A1R的表达同时升高（P<0.05）。阻断A1R的作用通路后,MMP 2的表达与分泌均下降（P均<0.05）。 结论随着hCG浓度的升高, HTR8 SVneo细胞的侵袭性逐步增强,其调控机制为通过促进A1R的表达而使MMP 2的分泌升高。     

谷氨酰胺对人肺泡Ⅱ型上皮细胞热休克蛋白70表达的影响

目的评价谷氨酰胺对人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞热休克蛋白（HSP）70表达的影响。方法取人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞,在不含谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育24h作为空白对照组（C组）,43℃孵育1h、37℃恢复4h作为阳性对照组（PC组）,不同浓度（2、4、8、12和16 mmol/L）谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育24h作为不同浓度谷氨酰胺诱导组（Gln2组、Gln4组、Gln8组、Gln（12）组和Gln（16）组）,8mmol/L谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育不同时间（1、2、6、12、24和48 h）作为不同时间谷氨酰胺诱导组（T1组、T2组、T3组、T4组、T5组和T6组）。分别采用RT-PCR和Western blot法检测HSP70 mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,PC组和不同浓度谷氨酰胺诱导组人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞HSPTO mRNA和蛋白的表达均升高,Gln8组HSP70 mRNA和蛋白表达水平高于Gln2组、Gln4组、Gln（12）组和Gln（16）组（P＜0．01）,而与PC组相比差异无统计学意义（P＞0．05）。与C组比较,PC组和不同时间谷氨酰胺诱导组HSP70 mRNA和蛋白的表达均升高,T5组HSP70 mRNA和蛋白表达水平高于T1组、T2组、T3组、T4组和T5组（P＜0．01）,而与PC组相比差异无统计学意义（P＞0．05）。结论谷氨酰胺可明显上调体外培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞HSP70 mRNA和蛋白的表达,并呈浓度和时间依赖性。     

表面增强激光解吸／离子化质谱技术在诊断下咽癌中的应用研究

目的探讨表面增强激光解吸／离子化质谱技术（SELDI-TOF-MS）在下咽癌早期诊断中的价值。方法采用弱阳离子（WCX2）蛋白质芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术检测38例下咽癌患者和46例健康体检者的血清,建立预测模型。结果从下咽癌患者和健康人血清中筛选出4个明显表达差异的蛋白质峰,其分子量分别为4175、13265、3160和5804Da,均为下咽癌高表达。用其中的10例下咽癌患者和12例健康体检者样本作训练集和交叉验证后,再用筛选出的4个差异蛋白质峰建立诊断预测模型,然后对健康人和下咽癌患者样本进行盲法测试。结果显示,其准确率为89.3％（75／84）,敏感性为97．4％（37／38）,特异性为82．6％（38／46）。结论用SELDI-TOF-MS技术建立的诊断预测模型对区分下咽癌和正常人有较好的特异性与准确率,该技术为下咽癌的早期诊断及预后判断提供了新的手段。     

肝细胞癌微血管和成熟血管的特征及其相互关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)微血管和成熟血管的特征及其关系。方法选取行手术切除并经病理证实的HCC 31例,检测VEGF、Flk 1、PCNA的表达情况,同时对微血管和成熟血管的数目、平均面积、总面积、周长、直径、异型指数、血管间距、表达部位,以及动脉数、静脉数、动脉比、静脉比、血管成熟指数和平均灌注分数等进行统计。HE染色计算细胞外间隙及细胞外血管外间隙。分析微血管和成熟血管特征差异及其相互关系。结果HCC微血管的数目、总面积、异型指数均大于成熟血管,而平均面积、直径和血管间距则相反(P＜0.05)。在VEGF阴、阳性表达组之间,微血管的数目、周长及细胞外间隙均存在统计学差异(P＜0.05),但各成熟血管参数未见统计学差异(P＞0.05)。在Flk 1阳性和阴性表达组,微血管的数目、异型指数、周长以及动脉数也存在统计学差异(P＜0.05)。另外,PCNA与微血管异型指数呈正相关(P=0.045, r=0.563),与微血管间距负相关(P=0.022, r=-0.627)。其余测量参数之间差异未见统计学意义(P＞0.05)。结论HCC微血管和成熟血管特征存在较大差别,VEGF及Flk 1主要参与微血管生成的调控,对成熟血管作用不大。