中药不同组分对小鼠缺血脑组织蛋白表达谱的影响

目的 运用蛋白质组学技术分析中药不同组分对小鼠缺血脑组织蛋白表达谱的影响.方法 黄芩苷、栀子苷、胆酸、珍珠母分别干预缺血再灌小鼠3h后,断头取脑,提取蛋白,用蛋白质芯片比较分析以上组分对小鼠缺血脑组织蛋白表达谱影响的差异.结果 黄芩苷、栀子苷、胆酸、珍珠母可影响5373Da,5707Da,15103Da 3个靶点蛋白的表达,中药对蛋白表达具有多靶点性和差异性.结论 蛋白质芯片技术是探索中药药理机制的有效手段.     

母-胎界面趋化因子及其受体表达与NK 细胞在蜕膜中选择性聚集的关系

目的 探讨母-胎界面中自然杀伤细胞（NK细胞）募集机制及生物学意义。方法 留取8～10孕周正常孕妇行人工流产术后滋养层、蜕膜组织及外周血标本。采用免疫磁珠法分离、纯化外周血及蜕膜中NK细胞,逆转录-聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测蜕膜和滋养层组织中的趋化因子,检测外周血、蜕膜NK细胞中相应的趋化因子受体及血源性生长因子。结果 获得了高纯度的NK细胞;蜕膜和滋养层组织中可检测到某些趋化因子的表达;在蜕膜与外周血NK细胞中检测到有相应的趋化因子受体的表达及血源性生长因子。结论 蜕膜中的NK细胞可能来源于外周血NK细胞,并由趋化因子募集而来,其可能参与母-胎界面血管形成。     

肿瘤细胞培养上清对小鼠骨髓来源的树突状细胞分化发育的影响

目的：探讨肿瘤细胞对树突状细胞（dendritic cells,DC)分化发育的影响。方法：在诱导小鼠骨髓DC发育的过程中,加入肿瘤细胞培养上清,观察DC生成情况,产与政党培养条件下的DC比较共刺激分子,Ⅱ类分子、黏附分子的表达,刺激同种T细胞增殖,以及抗原提呈功能水平,通过ELISA法检测肿瘤细胞分泌的细胞因子。结果：经小鼠黑色素细胞瘤B16和肺癌细胞3LL的分泌上清培养后,DC表达共刺激分子CD40,CD86,CD80,和黏附子CD5R的水平下降,分泌Th1细胞因子IL－12的水平也降低;并且DC的抗原提呈功能和刺激同种混合淋巴细胞反应的功能下降,上述肿瘤细胞均可分泌抑制性细胞因子IL－10。结论：在肿瘤细胞的微环境中存在免疫抑生因子,对DC分化发育和抗原提呈功能起负性调节作用。     

雏凤精对小鼠免疫功能的影响

正常小鼠肌肉注射环磷酰胺(CTX)或醋酸氢化泼尼松(HPA)造成免疫低下模型,通过巨噬细胞(Mφ)吞噬功能试验,淋巴器官重量测定,外周血淋巴细胞α-醋酸萘酯酶染色,溶血素测定及PFC试验,观察雏凤精对小鼠免疫系统的影响。结果表明:雏凤精能完全或部分对抗免疫抑制剂的免疫抑制作用,对细胞及体液免疫功能均有一定保护和促进作用。     

CYP1A1基因多态性与子宫内膜腺癌发生的关系研究

目的研究细胞色素P4501A1(CYP1A1)基因MspI位点和Ile-Val位点多态性与子宫内膜腺癌发生的关系。方法以病例-对照研究,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法和等位基因特异性PCR(AS-PCR)技术检测84例子宫内膜腺癌患者和66例对照者CYP1A1基因MspI位点和Ile-Val位点的多态性。结果Ile-Val三种多态基因型在对照组和子宫内膜腺癌组中的分布在显著性差异(P<0.05),其中Ile/Val和Val/Val基因型在子宫内膜腺癌组中的分布频率明显高于对照组。与Ile/Ile基因型相比,Ile/Val基因型个体发生子宫内膜腺癌的相对危险度(OR)是2.682,两者差异有统计学意义(P<0.05);而MspI位点的多态性在对照组和子宫内膜腺癌组中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论CYP1A1基因第7外显子的Ile/Val基因型与子宫内膜腺癌的发生有关,可以作为子宫内膜腺癌易感人群筛查的重要指标,MspI位点多态性与子宫内膜腺癌的发生无相关性。     

罗勒胶囊对小鼠脾细胞产生IL-2和IFNγ能力的影响

目的探讨罗勒胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法用罗勒胶囊含药血清孵育小鼠脾细胞而诱生IL-2和IFNγ,利用IL-2依赖株CTLL-2和IFNγ敏感细胞L929细胞,采用MTT法检测含药血清作用后小鼠脾细胞产生IL-2和IFNγ的能力.结果罗勒胶囊血清大、中剂量组及香菇多糖(LNT)组能显著提高小鼠脾淋巴细胞IL-2产生能力,与生理盐水对照组比较,P＜0.01,但罗勒胶囊大、小剂量组作用不如香菇多糖(P＜0.05,P＜0.01);罗勒胶囊血清大、中剂量组及香菇多糖(LNT)组能显著提高小鼠脾淋巴细胞IFNγ产生能力,与生理盐水对照组比较,P＜0.01.结论罗勒胶囊能促进IL-2和IFNγ的产生,增强机体的免疫功能.     

不同途径免疫的AFP基因修饰DC瘤苗体内抗肿瘤效应的研究

目的:评价bcl-2反义寡核苷酸对肾细胞癌细胞Bcl-2蛋白表达抑制及诱导凋亡作用.方法:合成与已知人类基因无同源性的bcl-2反义寡核苷酸(AS1与翻译起始端互补,AS2与编码区互补),以阳离子脂质体Lipofectin为转染载体,MTS比色实验测定细胞活率,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定bcl-2 mRNA的表达,Western杂交法测定Bcl-2蛋白表达,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术测定凋亡细胞.结果:所测定的5个肾癌细胞株均有稳定的bcl-2 mRNA表达;转染的反义寡核苷酸对ACHN细胞Bcl-2蛋白的表达有明显抑制作用,而正义寡核苷酸无明显影响,AS2的抑制作用大于AS1;反义寡核苷酸可诱导ACHN细胞的凋亡,AS1和AS2的诱导率分别为32.1%和43.2%.结论:bcl-2反义寡核苷酸可抑制肾癌细胞Bcl-2蛋白的表达,并进而诱导细胞的调亡.     

子宫NK细胞与妊娠关系的研究

子宫NK(uNK)细胞是妊娠子宫最主要的淋巴细胞,它参与了母胎界面免疫平衡的维持。本文简要介绍了uNK细胞的来源、分化和分布特征,重点论述了uNK细胞受体库的组成、功能以及与妊娠的关系。     

去甲肾上腺素对胶质母细胞瘤侵袭迁移能力的影响及机制研究

目的   研究应激激素去甲肾上腺素(NE)对胶质母细胞瘤侵袭迁移能力的影响及机制,并探讨β受体阻断剂普萘洛尔(propranolol)抗应激所致肿瘤侵袭转移的可行性。方法   培养胶质母细胞瘤细胞系T98G、U251及U87,采用RT-PCR检测胶质瘤细胞系β肾上腺素能受体表达,Transwell评价NE对胶质瘤细胞侵袭迁移的影响,明胶酶谱法检测NE对胶质瘤细胞系MMP 2分泌水平影响。结果   随NE浓度增加(0.1~10μmol/L),胶质瘤细胞侵袭力逐渐增强(P>0.05),普萘洛尔(1nmol/L)可抑制此效应;随NE浓度增加(0.1~10μmol/L),胶质瘤细胞基质金属蛋白酶 2(MMP-2)分泌显著增多,普萘洛尔(1nmol/L)可抑制NE诱导的MMP 2分泌。结论   应激激素去甲肾上腺素可以促进胶质母细胞瘤MMP-2分泌酶活性从而增强其迁移能力,普萘洛尔可以抑制NE诱导的胶质瘤侵袭增强。     

正常早孕及稽留流产患者NK细胞中整合素αvβ3的表达分析

目的分析正常早孕妇女和稽留流产患者外周血及蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+自然杀伤(NK)细胞比率以及细胞表面整合素αvβ3的表达。方法分别采集15例正常早孕妇女和7例稽留流产患者外周血和蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率以及其细胞表面αvβ3表达。结果 与早孕妇女外周血相比,蜕膜组织中CD56+CD16-NK细胞比率增高而CD56+CD16+NK细胞的比率却降低(P<0.01);正常早孕妇女及稽留流产患者外周血和蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率均无差异(P>0.05)。与正常早孕妇女相比,稽留流产患者蜕膜组织CD56+CD16-NK细胞表面αvβ3阳性表达率降低而其平均荧光强度(GM)值却增高(P<0.05)。结论 NK细胞及其所表达的整合素αvβ3在早孕期胚胎植入及胎盘形成过程中发挥重要作用,稽留流产患者NK细胞表面整合素αvβ3的表达异常,可能是稽留流产发生的免疫致病因素。