低氧微环境对MDA-435细胞株MMP2、9及其抑制剂TIMP21表达的影响

目的：探讨低氧微环境对人乳腺癌细胞株MDA 435中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinases，TIMPs)表达的影响。方法：分别置人乳腺癌细胞株MDA 435于常氧（21% O2、5% CO2）和低氧（1% O2、5% CO2和94% N2）环境中培养6?h，RT PCR技术mRNA水平检测MMP2、9及TIMP2、1的表达。结果：MDA 435细胞株表达MMP9和TIMP1 mRNA，未检测到MMP2和TIMP2 mRNA；低氧环境下MDA 435细胞株中MMP9 mRNA 水平显著上升(P＜0.05)，TIMP1基因的表达在低氧环境与常氧环境下差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：与常氧环境相比，低氧环境下乳腺癌细胞株MDA 435中MMP9及其抑制剂TIMP1的表达平衡发生了改变，提示，进行肿瘤转移分子机制的体外研究应充分考虑氧环境的影响。     

弓形虫-IgM诊断试剂的研制

目的　对间接酶联免疫吸附法 (EL ISA)法检测人弓形虫 (TOXO) - Ig M的试剂进行优化改良。方法　以自制原材料采用间接 EL ISA法研制 TOXO- Ig M检测试剂 ,对试剂的特异性、精密性、灵敏度以及稳定性进行鉴定。结果　质量检定结果表明 ,该试剂特异性强、本底低 ,能有效消除类风湿因子等干扰因素的影响 ;灵敏度>1∶ 16 0 ;精密性好 ,变异系数 (C.V )均 <15 % ;试剂稳定 ,37℃存放 6天 ,各项指标的变化率不超过 15 %。结论　本试剂盒有较好的特异性、敏感性和稳定性 ,可广泛应用于临床优生优育检测     

超声引导下肾囊内穿刺胰岛移值的初步探讨

超声引导下肾囊内穿刺胰岛移值的初步探讨宋树良①东野光②曲迅③陈玉荣①高英俊①我们在对胰岛素依赖型糖尿病（Ｉ型糖尿病）的治疗中，以超声引导下肾囊内穿刺进行胰岛移植，获得了很好的疗效。报告如下。１材料与方法全组Ｉ型糖尿病人５例，均为我院住院病人。男１例，...     

卵巢肿瘤患者外周血NK细胞受体NKG2A、NKG2D及NK活性检测的临床意义

通过研究卵巢癌及良性卵巢肿瘤患者外周血NK细胞表面受体的表达情况及NK活性的变化,分析探讨宿主NK细胞受体与肿瘤免疫逃逸的关系及其临床价值。分离受检者外周血单个核细胞,应用MTT法检测NK细胞的细胞毒活性,流式细胞术检测NK细胞受体NKG2D和NKG2A的表达,并结合临床病理因素作比较分析。结果显示,与良性卵巢肿瘤组和正常组相比,卵巢癌患者外周血NK细胞的细胞毒活性降低,NK细胞表面NKG2D的表达水平降低,而NKG2A的表达水平明显升高,其变化与卵巢癌的病情进展有关。此结果表明,卵巢癌患者机体NK细胞杀伤活性下降,NKG2D与NKG2A二者之间的平衡表达可能对NK细胞的功能状态起着重要的调节作用。     

表达谱芯片技术在罗勒多糖抗肿瘤机制研究中的应用

目的探讨表达谱芯片技术在罗勒多糖抗肿瘤机制研究中的价值与作用。方法建立荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型共20只,10只予罗勒多糖（2．5mg／kg）连续灌胃50d（药物组）,另10只予等量生理盐水灌胃50d（对照组）。以腹水量、腹腔脏器转移程度积分判断各组肿瘤生长及转移情况。分别用Cy3-dUTP、Cy5-dUTP标记两组癌组织cDNA,与含有2000点的大鼠基因表达谱芯片杂交。结果对照组与药物组共有168条基因出现差异表达。结论表达谱芯片技术可以快速确定药物作用的可能机制． 并为进一步研究提供重要信息。     

妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达

目的:探讨妊娠子宫自然杀伤细胞(uterinenaturalkillercell,uNK)和外周血NK细胞(peripheralnaturalkillercell,pNK)中乏氧诱导因子(hypoxiainduciblefactor,HIF)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)C、VEGFE的表达。方法:采用免疫磁珠法分离纯化妊娠早期uNK和pNK细胞,提取其总RNA,采用RT-PCR技术检测HIF和VEGF的mRNA在人妊娠早期uNK细胞和pNK细胞中的表达。结果:①人妊娠早期uNK细胞中HIFmRNA表达强于pNK细胞(2.31±0.19和0.12±0.02);②VEGFC和VEGFE在两种细胞中均有表达,但VEGFE在uNK中的表达强于pNK(0.82±0.03和0.10±0.01),VEGFC在两种细胞中的表达相近。结论:人妊娠早期uNK细胞HIF和VEGFE的强表达可能与uNK细胞在胎盘血管形成中的作用密切相关。     

谷氨酰胺增强氧化应激时肺微血管内皮细胞热休克蛋白70的表达

目的研究谷氨酰胺（Gln）对氧化应激状态下体外培养肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cells,PMVEC）热休克蛋白（HSP）70表达的影响。方法采用体外培养Wistar大鼠PMVEC,分为阳性对照组（G组）、生理盐水组（PS组）、谷氨酰胺组（Gln组）、过氧化氢加生理盐水组（H₂O₂+PS组）和过氧化氢加谷氨酰胺组（H₂O₂+Gln组）。Western blotting检测PMVEC HSP70的表达情况,分别记录平均灰度值。结果与PS组（9.05±1.51）相比,Gln组（40.28±10.19）和H₂O₂+PS组（43.89±10.32）PMVEC HSP70表达分别增高4.5倍和5倍（P＜0.01）;与H₂O₂+PS组相比,H₂O₂+Gln组（65.59±14.53）HSP70表达进一步增高,约为PS组的7倍,接近G组（70.56±12.23）表达水平。结论谷氨酰胺可增强氧化应激状态下体外培养肺微血管内皮细胞HSP70表达。     

卵巢肿瘤患者自然杀伤细胞活化性受体NKG2D与其配体MICA表达的初步研究

目的:研究卵巢癌、良性卵巢肿瘤患者外周血NK细胞表面活化性受体NKG2D的表达及局部组织中相应配体MICA的表达情况,并结合临床病理因素分析探讨宿主NK细胞受体NKG2D在抗卵巢癌中的作用及其与肿瘤免疫逃逸的关系。方法:对4 2例卵巢癌、2 3例良性卵巢肿瘤及2 0例正常妇女,采用流式细胞术检测外周血NK细胞NKG2D的表达状况,RT PCR技术检测在上述部分相应组织标本中MICA的表达。结果:恶性、良性卵巢肿瘤患者及正常人外周血NK细胞NKG2D的表达水平分别为( 94 2 3±6 0 2 ) %、( 98 70±0 98) %、( 98 6 1±1 5 9) % ,恶性组与另两组之间比较,差异有统计学意义(P <0 0 5 ) ;相应配体MICA在卵巢癌组织中的表达率较良性卵巢肿瘤中明显增高,差异有统计学意义(P <0 0 1) ;在卵巢癌病人是否绝经、不同组织类型、分化程度、手术分期及是否淋巴转移等各组临床病理情况下,其表达率未见明显差异(P >0 0 5 )。结论:卵巢恶性肿瘤患者外周血NK细胞活性降低,其活化性受体NKG2D表达的下降是NK细胞活性下降的原因之一。NKG2D的配体MICA的基因表达可能与卵巢癌的恶性转化有一定的相关性,卵巢癌的免疫逃逸可能与NKG2D表达下调及其配体MI CA的表达升高有关     

罗勒多糖对荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型的作用研究

目的：探讨罗勒多糖对荷NuTu-19 卵巢癌大鼠模型的作用。方法：建立荷NuTu-19 卵巢癌大鼠模型，体内观察罗勒多糖对荷瘤大鼠肿瘤生长及转移行为的影响，取大网膜瘤组织，提取总RNA，经逆转录、荧光标记后与R 20 s大鼠表达谱芯片杂交，经Gene Pix Pro 3.0图像处理软件分析。同时取肿瘤组织，进行常规病理学检测。结果：罗勒多糖处理组肿瘤的数量明显少于对照组，肿瘤体积小于、腹水量显著少于对照组(P<0.05)；腹腔脏器转移程度积分与对照组有显著差异(P<0.01)；同时采用表达谱芯片技术从药物组肿瘤组织中比较筛选出了268条差异表达基因。结论：罗勒多糖可能是一种抗卵巢癌转移的新型中草药，它对卵巢癌显现的独特效果可能是多个药效靶点综合作用的结果，本研究也显示了表达谱芯片技术在药物效应靶点研究中的优势和价值。     

散发性结直肠癌中MMR与突变p53的表达

目的　探讨错配修复基因MMR(hMSH2与hMLH1基因 )在散发性结直肠癌发生中的作用。方法　采用PCR SSCP和PCR产物直接测序法对 41例散发性结直肠癌患者肿瘤组织及正常组织的hMSH2、hMLH1与p53基因进行检测。结果　41例散发性结直肠癌中,有 2例发生hMSH2基因突变,占 4. 88% (2 /41), 5例发生hMLH1基因突变,占 12. 20% (5 /41), 20例发生p53基因突变,占 48. 78% (20 /41)。hMLH1和hMSH2基因在p53突变患者的突变率 30. 00% (6 /20)显著高于p53未发生突变患者的突变率 4. 76(1 /21) (P<0. 05)。结论　部分散发性结直肠癌患者中存在MMR基因缺陷,其中hMLH1基因的作用大于hMSH2。MMR基因突变与p53突变密切相关。