有丝分裂关卡基因致染色体数目异常自然流产胚胎发生的机制

目的 探讨有丝分裂关卡基因(hBUB1)在染色体数目异常自然流产胚胎发生中的可能机制.方法 采用实时定量逆转录(RT)-PCR和免疫印迹法(WB)检测染色体数目异常组和正常对照组的自然流产胚胎组织中目的 基因在mRNA和蛋白水平的表达;构建针对hBUB1基因的短发卡状(shRNA)表达载体,用细胞免疫化学、WB和实时定量RT-PCR方法评价其对胚胎细胞内源性hBUB1表达的干扰效果;用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTF)试验测定细胞增殖抑制率;用流式细胞术解析细胞周期分布.结果 hBUB1蛋白在染色体数目异常组中的表达显著低于正常对照组(阳性表达率分别为8%和93.5%,P＜0.05).shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制胚胎细胞中hBUB1基因的表达(干扰前后mRNA水平分别为0.196±0.067和0.042±0.006,P＜0.05).胚胎细胞转染有效干扰质粒48 h后,染色体数目异常组细胞增殖抑制率达62%,显著高于正常对照组(4%,P＜0.05).有效干扰质粒引起G2/M期细胞从对照组的40.2%和41.3%降低至21.3%.结论 hBUB1基因表达下调可导致细胞增殖的抑制和周期的改变,在染色体数目异常自然流产胚胎发生中可能起很重要的作用,这将为寻找可靠的临床检测指标奠定基础.     

戊二酸尿症Ⅱ型患儿的护理

总结1例戊二酸尿症Ⅱ型患儿的护理。护理上加强生命体征的观察,及时发现酸中毒征象,预防低血糖的发生,同时加强心理护理,重视出院指导及随访。患儿恢复顺利,1周后好转出院,肢体功能基本恢复。     

结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)基因表达与染色体数目异常胚胎关系

目的:探讨结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)对染色体分离的影响。方法:采用荧光定量PCR和免疫组化比较APC基因和蛋白在自然流产绒毛核型分析异常胚胎细胞(实验组)中的表达,并以人工流产绒毛核型分析正常胚胎细胞为对照(对照组)。结果:APCmRNA拷贝数/GAPDHmRNA拷贝数均值研究组为0.098±0.035,对照组为0.009±0.005。免疫组织化学结果表明其在实验组中的表达也高于其在对照组中的表达,P<0.01。结论:APC基因的高表达可能导致染色体分离异常。     

微小RNA对胚胎细胞BUB1基因的表达抑制

目的:探讨微小RNA对胚胎细胞BUB1基因表达的调控.方法:用定量real-time PCR比较microRNA转染前后的胚胎细胞内源性基因BUB1 mRNA表达水平,同时用western blot比较转染前后Bub1蛋白的表达水平.结果:对照组的BUB1基因mRNA拷贝数/GAPAH mRNA拷贝数为0.1960±0.0688,而转染microRNA重组质粒后,实验组的mRNA比值分别为0.1968±0.0689和0.1962±0.0670,经统计分析,两实验组细胞的内源性BUB1基因mRNA水平与对照组无显著性差异;而蛋白水平在转染后均有明显降低.结论:microRNA主要在翻译水平调节哺乳动物细胞内基因的表达,为研究基因表达的调控机制奠定了良好的基础.     

微小RNA抑制胚胎细胞MAD2基因的表达

目的:探讨微小RNA(microRNA)抑制胚胎细胞MAD2基因表达的机理.方法:用定量real-time PCR比较microRNA转染前后的胚胎细胞内源性基因MAD2 mRNA表达水平,同时用western blot比较转染前后Mad2蛋白的表达水平.结果:对照组的MAD2基因mRNA拷贝数/GAPAH mRNA拷贝数为0.1780±0.0688,而转染microRNA重组质粒后,实验组的mRNA比值分别为0.1778±0.0689和0.1778±0.0670,经统计分析,两实验组细胞的内源性MAD2基因mRNA水平与对照组无显著性差异;而其中一实验组的蛋白水平在转染后有明显降低.结论:microRNA主要在翻译水平调节哺乳动物细胞内基因的表达,为研究基因表达的调控机制奠定了良好的基础.     

低浓度罗哌卡因鞍麻用于小儿包皮环切术的麻醉效果观察

目的评价低浓度罗哌卡因鞍麻用于小儿包皮环切术的麻醉效果及安全性。方法 120例择期行包皮环切术患儿,随机分为鞍麻组和静脉麻醉组,每组60例。记录术前(T1),游离冠状沟(T2),切皮(T3),术毕(T4)的Bp、HR、SpO2等血流动力学改变;以镇痛镇静评分评价麻醉效果;记录术后清醒时间及并发症。结果与静脉麻醉组相比较,鞍麻组麻醉效果满意,血流动力学改变更为平稳(P<0.05);术后清醒时间短(P<0.05);术后疼痛、躁动和SpO2下降等并发症明显少于静脉麻醉组(P<0.05)。结论低浓度罗哌卡因鞍麻用于小儿包皮手术,操作简单、安全,麻醉效果好,不良反应小,是一种安全可行的麻醉方法,与静脉全麻比较具有更多的优势。     

结缔组织生长因子全长及其缺失突变体重组腺病毒的构建和鉴定

目的:结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)含有4个不同功能结构域,构建表达带有3×Flag标签的全长基因及5个缺失突变体的重组腺病毒,以研究CTGF各结构域的功能和作用机制.方法:通过聚合酶链反应(Polymerasechain reaction,PCR)等克隆方...     

马拉松赛对业余选手内环境干扰的监测

目的观察并评估马拉松赛业余选手内环境的变化。方法 26名全程及24名半程马拉松赛业余选手赛前1周体检,比赛当天选择与内环境相关项目25项进行现场采血监测,进行赛前赛后比较。结果 50名选手赛后均表现出体重下降、尿量减少、尿比重升高（P〈0.01）;血Na＋与Ca2＋降低,K＋及血乳酸升高（P〈0.01）;PvO2及SvO2明显升高（P〈0.01）,动脉氧含量降低,静脉氧含量增加,动静脉氧含量差增大（P〈0.01）。结论马拉松赛业余选手内环境呈现多方面变化,主要表现在体液量和质及血气的变化,以及氧供需平衡等方面。     

超声微泡介导双报告基因在椎间盘髓核中表达的研究

目的:探索超声微泡能否介导外源性基因在椎间盘髓核中表达.方法:40只SD大鼠被随机分为4组.第1组仅于髓核内注入含舣报告基因的质粒;第2组为在第1组基础上加超声照射;第3组同时注入含双报告基因的质粒和微泡的混悬液;第4组为在第3组基础上加超声照射.每只大鼠末接受手术和照射的第4、5椎间盘作为对照.一周后处死大鼠取出全部椎间盘做荧光素酶检测.结果:第4组(96.7×103±72.3×103)荧光素酶强度最高,与第1组(8.7×103 ±7.2×103)、第2组(3.1 × 103±2.4×103)、第3组(47.5×103± 443.3×103)比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论:超声微泡介导的基因转染系统能促进外源基因髓核中的高表达,为今后椎间盘病变的基因治疗提供了方法和依据.     

中心静脉血、肘静脉血与混合静脉血血气指标值相关性研究

目的比较中心静脉血和肘静脉血血气值与混合静脉血正常血气值的相关性。方法监测54名马拉松赛业余选手（活动组）赛前的动脉血、肘静脉血血气和30名无心肺疾患的术后病人（静息组）全麻拔管前动脉血、中心静脉血和肘静脉血血气。比较肘静脉血、中心静脉血血气值与混合静脉血正常血气值的相关性。结果 84名被测者动脉PO2和PaCO2均正常;肘静脉血PO2均值30.1 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）低于混合静脉血氧分压（P vO2）23%,低于中心静脉PO218%左右。结论混合静脉血、中心静脉血和肘静脉的血气三者具有一定的相关性,在无条件监测PvO2时可用中心静脉或肘静脉血气值作参考。