基于定量构效关系的何首乌毒性单体成分预测

目的基于定量构效关系对何首乌中39种化合物进行毒性风险评估,为毒性成分筛选及试验评价提供参考。方法根据母核结构将化合物分为蒽醌、蒽酮及二苯乙烯苷3类。将不同结构式分别导入毒性预测数据库(toxicity estimation software tool,TEST)和化合物毒性预测软件(Derek Nexus)。TEST以大鼠经口毒性半数致死量(LD₅₀)和发育毒性为预测终点;Derek Nexus选择除体外和体内致突变性、染色体损伤、致癌性外的所有毒性预测终点(包括肝毒性、肾毒性、心脏毒性、神经毒性、刺激性、光毒性、致敏性等),预测其可能的毒性靶向及相关警示结构。结果大鼠经口毒性LD50:18种蒽醌类化合物的LD50值介于453.5~3574.2 mg/kg之间,16种二蒽酮类单体的LD50值介于125.3~1239.6 mg/kg之间。发育毒性:ω-羟基大黄素和羟基大黄素的预测值最高。毒性靶向及相关警示结构:除6-methyl-1,3,8-trihydroxy-10Hanthracene-9-one外,其蒽醌类化合物均认为存在肝毒性;所有蒽醌类化合物均预测具有光致敏性和皮肤致敏性风险,但警示结构和风险程度存在差异;除2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2,3-二-O-β-D-葡萄糖苷外,其它二苯乙烯苷类单体提示存在甲状腺毒性风险;大多数二蒽酮类单体存在光致敏性和皮肤致敏性。结论本研究可为何首乌有毒成分筛选、不同成分的毒性靶器官及作用机制提供重要借鉴。     

适合纳米材料遗传毒性评价方法的选择

纳米材料独特的小尺寸和大的比表面积等物理化学性质,及其与生物体相互作用的高活性特性,为其在多种领域提供了广阔应用前景。与此同时,也可能带来潜在的安全风险。纳米材料的代谢和分布方式与普通化合物存在一定差异,如何科学地评价纳米材料对人体的潜在毒性风险,尤其是遗传毒性,是目前科学界及各相关监管部门亟需解决的问题。本文对现有常用遗传毒性评价方法用以评价纳米材料时存在的试验体系的局限性和灵敏度方面存在的优势与劣势进行回顾,总结了纳米材料遗传毒性评价时的关注点;并基于经济合作与发展（OECD）专家工作组的相关建议及相关遗传毒性评价指导原则,初步提出纳米材料遗传毒性试验组合优化方案。以期填补相关领域的空白,为纳米材料毒性评价和含纳米材料产品的上市前技术审评工作提供有益的借鉴。     

大气PM_(2.5)毒性及致癌性作用机制的研究进展

大气颗粒物对人体健康危害极大,受到学界关注。颗粒物进入体内可通过氧化应激反应、炎性损伤、免疫反应、遗传物质损伤、直接作用癌基因等方式产生毒性。近年来有关PM2.5的致癌性及作用机制成为研究热点。针对PM2.5的致病机理,尤其是致癌活性和致癌机理进行讨论,并对目前常用的遗传毒性检测手段对PM2.5致癌活性检测的应用进行综述。     

金橙II及金胺O的体外遗传毒性评价

目的 使用基于鼠伤寒沙门氏菌的Ames波动试验和小鼠淋巴瘤细胞（L5178Y）的体外微核试验评价2种染料金橙Ⅱ和金胺O的遗传毒性风险。方法 在-/+S9处理下,不同质量浓度的金橙Ⅱ和金胺O（0.625~10.000 μg·mL^-1）分别与鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型菌株TA98和TA100混合后接种于96孔板中,37℃下孵育72 h后判断其对细菌回复突变的影响;在体外微核试验中,在-/+S9处理下,金橙Ⅱ（10~50 μg·mL^-1）和金胺O（0.6~1.2 μg·mL^-1）分别与L5178Y细胞作用4 h或24 h,并在给药后24 h收集细胞进行流式细胞术检测。结果 金橙II自2.50 μg·mL^-1起可引起-S9和+S9处理组的TA98回复性突变孔数显著增加（P<0.05、0.01）,代谢活化后增加幅度更为明显;自5 μg·mL^-1起可引起-S9处理组的TA100回复性突变孔数显著性增加（P<0.01）,作用均呈浓度相关性。10 μg·mL^-1金胺O可引起-S9处理组的TA98回复性突变孔数显著增加（P<0.01）;自0.625 μg·mL^-1起即可引起+S9处理组的TA98回复性突变孔数显著增加（P<0.05、0.01）,且存在浓度相关性;自2.5 μg·mL^-1起可引起+S9处理组的TA100回复性突变孔数显著性增加（P<0.05、0.01）,且存在浓度相关性。在-S9处理组中,30~50 μg·mL^-1金橙Ⅱ可引起L5178Y细胞微核率显著增加（P<0.01）,且存在浓度相关性; 0.9~1.2 μg·mL^-1金胺O可引起L5178Y细胞微核率显著增加（P<0.01）,且存在浓度相关性。在+S9处理组中,10~50 μg·mL^-1金橙Ⅱ可导致L5178Y细胞微核率显著增加（P<0.05、0.01）。30~50 μg·mL^-1金橙Ⅱ可导致S期的L5178Y细胞比例增加;金胺O自0.6 μg·mL^-1起即可导致L5178Y细胞亚二倍体细胞核率增加。结论 金橙Ⅱ和金胺O均存在一定的遗传毒性风险。     

百格斯和乳酸依沙吖啶与碘伏换药敷料的临床疗效及细胞增殖毒性比较

目的 了解临床常用伤口抗菌敷料百格斯、乳酸依沙吖啶和碘伏对头面部感染伤口的疗效、成本以及细胞增殖毒性。方法 回顾性分析2013年7月-2014年4月北京同仁医院急诊外科收治的各种原因所致头面部皮肤裂伤清创缝合术后感染患者46例,根据采用的抗菌溶液不同,将患者分为百格斯组（16例）、碘伏组（15例）及乳酸依沙吖啶组（15例）,分别采用相应消毒剂进行换药。记录患者伤口愈合时间及治疗费用。将CHL（中国仓鼠成纤维肺细胞）接种于96孔板,分别稀释碘伏（0.000 5%～0.1%）、过氧化氢（0.002 5%～0.5%）、百格斯（0.1%～20%）及乳酸依沙吖啶（0.5%～100%）至8个不同浓度,加入培养基孵育6 h。用酶标仪在450 nm波长处检测各孔的吸光度(OD)值,以吸光率(%)=(OD待测组/OD对照组)×100%评估细胞增殖抑制率。结果 百格斯组、碘伏组和乳酸依沙吖啶组愈合时间、7 d愈合率及14 d愈合率比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。各组治疗费用比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中,碘伏组和乳酸依沙吖啶组治疗费用低于百格斯组,差异有统计学意义（P＜0.05）。孵育6 h后,细胞增殖抑制率为乳酸依沙吖啶（41.922%）＞百格斯（5.528%）＞过氧化氢（0.058%）＞碘伏（0.006%）。结论 与碘伏和乳酸依沙吖啶比较,应用百格斯对头面部感染伤口治愈时间和治愈率均未见显著差异,但治疗费用较高,细胞增殖毒性中等。患者可根据免疫力及经济水平,选择合理消毒剂。     

药物毒理学研究中体外替代试验研究现状及展望

药物的安全性和有效性是药物研发成功的决定因素,而药物毒性是终止药物研发的关键因素之一。相关监管指南和指导原则为利用动物进行毒理学研究及生物测试或其他相关试验制定了基本标准。动物体外替代试验不仅遵守了国际上提倡的“3R原则”,也符合毒理学学科发展、社会经济发展及新药研发的要求。动物体外替代试验已成为21世纪毒性测试的重要方向,毒性测试的重点将集中在敏感性终点的选择与评价、细胞-反应网络、高通量与中通量筛选方法的构建及应用、作用机制及作用模式、毒性通路以及系统生物学效应等方面,并且已获得药物研发领域广泛的支持和监管部门的认可,具有广阔的发展前景和重要的应用价值。     

Bhas 42细胞转化试验高通量检测方法的建立及应用

目的: 建立Bhas 42细胞转化试验高通量检测方法,并应用于染料木黄酮(GEN)潜在致癌性的检测中。方法:建立Bhas 42细胞转化试验方法,比较细胞灶法和H2O2法对结果判定的影响。细胞灶法试验组在第21天直接固定染色。H2O2法试验组在细胞接种后第19天采用H2O2处理,染色并测定D(450)以确定细胞转化率。计算转化率以验证两种方法的相关性。并通过细胞生长试验选择适宜的GEN浓度进行细胞转化试验,H2O2法判定转化试验结果。结果:在细胞灶法中,启动试验3-甲基胆蒽(3-MCA)组、促癌试验佛波醇酯(TPA)组的转化灶个数分别与启动、促癌试验DMSO组相比明显升高(P2O2法中,启动试验3-MCA组、促癌试验TPA组的转化灶个数、D(450)分别与启动、促癌试验DMSO组相比均明显升高(PD(450)相对于阴性组有显著差异(P结论:成功建立了Bhas 42细胞转化试验的H2O2法并实现了高通量检测,该法进一步缩短了实验周期并提高了结果的客观性,适用于非遗传毒性致癌物的体外早期筛选。GEN在促癌试验中呈阳性,但在启动试验中呈阴性,提示其可能是非遗传毒性致癌物。     

人源HepaRG肝细胞毒性与遗传毒性高通量筛选方法的初步建立

目的 利用正常人源肝细胞（HepaRG）和高内涵技术检测肝毒性标志物,并结合微核试验和单细胞凝胶电泳试验建立体外细胞毒性和遗传毒性的快速筛选平台。方法 选取适当的荧光探针Hoechst33342、DCFH-DA、Fluo4-AM、MitoTracker^® Red CMX Ros联合高内涵技术研究不同大黄蒽醌类单体（AQs）对HepaRG细胞活性氧簇（ROS）、胞内Ca²⁺含量及线粒体膜完整性等肝毒性标志物的影响,并开展高内涵法胞质分裂阻断法微核试验和高通量彗星电泳试验,综合评价AQs致肝细胞毒性及染色体、DNA损伤情况。结果 与对照组比较,HepaRG细胞经25.0 μg/mL大黄素、12.5和25.0 μg/mL芦荟大黄素、50和25.0 μg/mL大黄酚处理24 h后,胞内ROS含量显著增多;12.5和25.0 μg/mL芦荟大黄素和50.0 μg/mL大黄酸可引起胞内Ca²⁺含量显著增多;大黄素25.0 μg/mL、芦荟大黄素25.0 μg/mL、大黄酚50.0和25.0 μg/mL、大黄酸50.0和25.0 μg/mL组导致线粒体明显损伤（P<0.05、0.01）。与对照组比较,25.0 μg/mL大黄素诱导微核率、尾DNA含量和彗星尾距（OTM）数值均显著升高（P<0.05、0.01）;50.0 μg/mL大黄酚给药72 h后微核率显著升高（P<0.01）。结论 AQs的研究结果与现有文献报道基本相符。本研究成功建立肝细胞毒性和遗传毒性的联合快速筛选模型,有助于药物研发早期的毒性筛选。     

嵌合抗原受体T细胞产品临床前安全性评价策略和案例

嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)是靶向性免疫细胞治疗产品研究最为热门的领域,由于其具有特异性高、选择性强和非细胞毒性等优点,在肿瘤治疗领域中具有广阔的应用前景.与传统药物及其他生物制品不同,CAR-T免疫细胞产品是一种有生命的药物,可在体内存续和扩增,给...     

纳米材料的神经毒性作用机制及评价方法

近年来,纳米材料在多种生物医学领域被广泛应用,其生物安全性也受到越来越多的关注。多种纳米材料可穿透血脑屏障进入中枢神经系统,产生神经毒性。本文讨论了纳米材料进入中枢神经系统的方式及因素;纳米材料的特异性以及非特异性的中枢神经毒性效应、外周神经毒性及其作用机制;并论述了国内外用于体内神经毒性、体外神经细胞培养模型的神经毒性以及替代的评价方法,为纳米材料的安全性评价及神经毒性探究提供参考。