高糖上调大鼠主动脉平滑肌细胞骨桥蛋白表达

目的 探讨高糖对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）骨桥蛋白（OPN）表达的影响及机制。方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素复制Ⅰ型糖尿病模型,免疫组化、RT-PCR和western blot检测大鼠主动脉OPN和PCNA的表达;大鼠主动脉VSMCs经含正常糖(5.5mmol/L)、高糖(25mmol/L)、甘露醇(25mmol/L)、高糖+GF109203X（蛋白激酶C抑制剂,10μmol/L),高糖+ NAC（N-acetyl-l-cysteine,NF-κB抑制剂,10μmol/L)的DMEM处理48 h,免疫荧光及western blot检测OPN的表达,western blot 分析PCNA、PKC和 p65的表达。结果 高糖血症大鼠主动脉VSMCs高表达OPN及PCNA。原代VSMCs经高糖刺激后OPN、PCNA、PKC及p65表达明显增加;GF109203X和NAC均可下调PCNA的高表达,但仅GF109203X抑制高糖诱导的OPN高表达。结论 高糖可能通过激活PKC信号诱导OPN表达并促进VSMCs增殖从而在糖尿病性血管并发症中起作用。     

血清反应因子与肿瘤关系的研究进展

血清反应因子(serum response factor,SRF)的异常表达与癌症密切相关,SRF的高表达增强了癌细胞的存活、增殖、迁移和侵袭能力。此外,SRF与肿瘤干细胞的生存、自我更新和肿瘤耐药有关。SRF具有致癌基因特性,一些针对SRF的特异性抑制剂备受关注。本文综述了SRF在肿瘤发生发展中的研究进展及其在癌症中的作用机制,并展望了SRF作为靶点在肿瘤防治中的意义。     

苦参碱对鼻咽癌细胞CNE1-GL增殖及转移相关能力的影响

目的 研究苦参碱对人鼻咽癌细胞系CNE1-GL增殖及转移相关能力的影响及其作用机制.方法 以MTT法检测苦参碱对人鼻咽癌CNE1-GL细胞增殖及对细胞外基质黏附能力的影响;Transwell小室法检测其对CNE1-GL细胞侵袭重组人工基膜能力的影响;免疫细胞化学方法检测药物作用前后CNE1-GL细胞EBV-LMP1蛋白的表达.结果 苦参碱对CNE1-GL细胞的增殖及对细胞外基质的黏附能力有明显的抑制作用,该抑制效应随苦参碱浓度增加和作用时间延长而增加;1.5 g/L苦参碱能明显抑制CNE1-GL细胞体外侵袭人工基膜能力,抑制率达(42.51±11.06)%,作用于CNE1-GL细胞24 h后EBV-LMP1蛋白的表达明显下调.结论 苦参碱能抑制CNE1-GL细胞的增殖能力和转移能力,其抗肿瘤转移的机制与EBV-LMP1蛋白表达的改变有关.     

苦参碱对人卵巢癌细胞株HO-8910PM增殖及侵袭运动能力的影响

目的 研究苦参碱对人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM增殖及转移相关能力的影响及其作用机制.方法 以MTT法和台盼蓝拒染法检测苦参碱对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞增殖的影响;Transwell小室法检测其对HO-8910PM细胞侵袭运动能力的影响;考马斯亮蓝染色法检测不同质量浓度苦参碱对H0-8910PM细胞细胞骨架的改变及免疫细胞化学方法检测药物作用前后HO-8910PM细胞Ezrin蛋白的表达.结果 苦参碱对HO-8910PM细胞增殖抑制呈明显剂量和时间效应;1.5 g/L苦参碱能明显抑制细胞的增殖,作用6 h后能抑制HO-8910PM细胞体外侵袭人工基底膜和运动能力,抑制率分别为(41.52±10.76)%和(39.73±10.67)%;1.0、1.5g/L苦参碱作用HO-8910PM细胞24 h后使细胞骨架明显改变,并上调Ezrin蛋白的表达.结论 苦参碱能抑制高转移性人卵巢癌细胞HO-8910PM的增殖能力和侵袭运动能力,其抗肿瘤侵袭运动的机制与细胞骨架和Ezrin蛋白表达的改变有关.     

HCV与B细胞淋巴瘤

HCV的感染与B细胞淋巴瘤特别是滤泡性淋巴瘤、淋巴浆细胞样淋巴瘤、单核细胞样淋巴瘤等低度恶性B细胞淋巴瘤的发生有关,探讨HCV与B细胞淋巴瘤的关系,将为B细胞淋巴瘤的诊断和治疗提供新的思路.     

基于网络药理学和细胞学实验探讨黄芩对糖尿病心肌纤维化的保护作用及机制

[目的]探讨黄芩有效成分在改善糖尿病心肌病(DCM)纤维化中的作用及机制。[方法]通过TCMSP数据库及小分子药物靶点预测在线平台(Swiss Target Prediction)挖掘黄芩有效成分及所对应的靶点,利用GeneCards、Disgenet、UniProt、OMIM数据库收集并筛选DCM相关的疾病基因靶点,获取交集基因后导入String 11.5数据库中,构建药物-疾病蛋白互作网络图,利用Cytoscape 3.9.1软件对关键靶点网络进行可视化。运用Metascape在线平台挖掘黄芩有效成分抗DCM的分子靶点,并通过KEGG数据库绘制通路图。H9c2和AC16心肌细胞经5.5 mmol/L D-葡萄糖刺激为正常糖对照组,以35 mmol/L D-葡萄糖刺激为高糖组,以10μmol/L黄芩苷进行干预,采用RT-qPCR检测转化生长因子β1(TGF-β1)、胶原蛋白Ⅰ(COLⅠ)和胶原蛋白Ⅲ(COLⅢ)的mRNA表达水平,Western blot检测Smad2/3、p-Smad2/3、COLⅠ和COLⅢ的蛋白表达水平,ELISA测定上清中TGF-β1水平。[结果]通过上述平台...     

过表达Notch1胞内域对c-Kit+骨髓间充质干细胞分化的影响

BACKGROUND: Activation of Notch signaling plays a critical role in stem cell differentiation, and this effect seems to be cell-type dependent. Little is reported on the role of activation of Notch1 signaling in the differentiation of c-Kit+ bone marrow mesenchymal stem cells. OBJECTIVE: To analyze the influence of activation of Notch1 signaling on the differentiation of c-Kit+ bone marrow mesenchymal stem cells. METHODS: The Notch1 intracellular domain (N1-ICD) was obtained from the cDNA library by PCR and cloned into BamHI/AgeI digested adenoviral GV314 plasmid to construct N1-ICD overexpressing shuttle plasmid, and the positive clones were verified by sequencing. N1-ICD shuttle plasmid and helper plasmids pBHGloxΔE1,3 Cre were used to co-transfect HEK293T cells to obtain N1-ICD overexpressing adenoviral particles (N1-ICD-Ad). The c-Kit+ subpopulation were isolated from bone marrow mesenchymal stem cells of the Sprague-Dawley rat femur via magnetic activated cell sorting. After transfection of the c-Kit+ BMSCs with N1-ICD-Ad adenovirus, we assessed the activation of Notch1 signaling and differentiation in c-Kit+ bone marrow mesenchymal stem cells by quantitative RT-PCR and immunofluorescent staining. RESULTS AND CONCLUSION: N1-ICD coding sequence was successfully generated from the cDNA library, and then was cloned into the linearized adenoviral vectors GV314. The resistant clones were verified by sequencing. With the assistance of packaging plasmids, recombinant N1-ICD-Ad adenovirus plasmids were successful packaged in HEK293T cells, and its title was 2×1012 PFU/L. c-Kit+ bone marrow mesenchymal stem cells with the purity of 91.6% were successfully isolated from the bone marrow mesenchymal stem cells of the Sprague-Dawley rat femur. Compared with the blank and negative controls, N1-ICD-Ad infection in the c-Kit+ bone marrow mesenchymal stem cells led to substantial accumulation of N1-ICD in the cytoplasm and nuclei, significantly unregulated expressions of Hes1 (a downstream gene of Notch) and cardiomyocyte differentiation genes Nkx2.5 and cTnT, significantly increased the expression of von Willebrand factor, an endothelial cell differentiation gene, and mildly increased the expression of smooth muscle 22α, a smooth muscle cell differentiation gene. These experimental results indicate that the activation of Notch1 signaling contributes to multi-lineages differentiation of c-Kit+ bone marrow mesenchymal stem cells, and the construction of N1-ICD overexpressing adenoviral vector makes the foundation for further research on the role of Notch1 signaling in stem cell biology.      

Furin在心血管系统发育和心血管疾病中的研究进展

心血管系统发育与心血管疾病是极其复杂的过程。Furin是一种内切蛋白酶,参与心血管系统发育及心血管疾病的发生和发展过程,具有重要的生物学功能。本文主要综述了Furin在心血管系统发育中的作用,并探讨了Furin与心血管疾病的关系,为预防和治疗各种心血管疾病提供了新的靶点。     

组蛋白甲基化转移酶SETD4对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响

目的：明确组蛋白甲基化转移酶含SET结构域蛋白4 (SET-domain-containing protein 4, SETD4)在临床鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）组织中的表达,分析SETD4对NPC细胞增殖和迁移的影响。方法：采用免疫组织化学法检测86例临床NPC标本与对照组30例鼻咽黏膜慢性炎症（nasopharyngeal chronic inflammation,NPI）组织中SETD4蛋白的表达;基于CRISPR/Cas9技术敲除CNE2细胞中SETD4基因,DNA测序结合半定量RTPCR进行鉴定;以SETD4敲除前后的CNE2细胞为研究对象,于倒置显微镜下观察细胞形态,采用CCK-8实验分析细胞增殖活性、Transwell实验观察细胞迁移能力变化、Western blot检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）、细胞周期相关蛋白、上皮-间充质转化标志物和组蛋白赖氨酸甲基化的变化,并通过生物信息学富集SETD4相关联的功能和信号通路。结果：SETD4蛋白主要定位于NPC细胞核...