低氧诱导成肌纤维细胞形成在低氧性肺血管重塑中的作用

目的:探讨低氧性肺动脉高压(HPH)无肌性肺动脉肌化的细胞来源。方法:雄性Wistar大鼠40只,分为对照组和低氧3、7、14、21d组,每组8只,低氧组复制HPH大鼠模型。测定各组平均肺动脉压(mPAP),右心室肥大指数(RVHI),肺小动脉病理及其形态计量学;细胞培养实验观察人胚肺成纤维细胞表型转化,透射电镜观察微血管的超微结构改变。结果:(1)低氧7d起大鼠mPAP、管壁面积/管总面积、管腔面积/管总面积分别为(18.41±0.37)mmHg、(52.2±0.8)%、(47.8±0.8)%与对照组(14.02±0.41)mmHg、(64.5±1.3)%、(35.5±1.3)%比较差异有显著性(P<0.05),低氧14d起稳定于高水平;低氧14d RVHI为(25.0±1.8)%,与对照组(23.6±0.5)%比较差异也有显著性(P<0.05)。(2)细胞培养显示低氧72h部分人胚肺成纤维细胞表达α-平滑肌肌动力蛋白。(3)透射电镜观察21d组增厚的重塑血管壁,位于内外弹性膜之间的细胞为成肌纤维细胞表型,外层具有与它紧密联系的成纤维细胞。结论:成纤维细胞转化为成肌纤维细胞是低氧性肺血管重塑的重要原因之一。     

慢性阻塞性肺疾病合并焦虑/抑郁的相关因素

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者合并焦虑、抑郁心理障碍的相关因素。方法:选取COPD患者218例,结合焦虑自评量表和抑郁自评量表,对2017年1月至2018年2月于湖南省人民医院就诊的COPD患者进行调查。结果:调查对象合并焦虑者占比39.9%,合并抑郁者占比34.8%,同时合并焦虑和抑郁者占比17.4%。多因素二元logistic回归分析结果显示:COPD合并焦虑与患者的CAT评分、急性加重频率、医疗付费方式有关,合并抑郁与患者的CAT评分、急性加重频率、医疗付费方式和居住情况有关。结论:焦虑和抑郁是COPD患者的常见合并症,症状严重、急性加重频繁、家庭医疗费用负担重的COPD患者合并焦虑和抑郁的风险更高,独居的COPD患者更容易合并抑郁。     

转化生长因子β_1与一氧化氮合酶及成肌纤维细胞参与大鼠缺氧性肺血管重塑

目的观察转化生长因子β1(TGFβ1)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因动态表达变化及成肌纤维细胞形成在大鼠缺氧性肺血管重塑中的作用。方法40只成年雄性Wistar大鼠分成常氧组、缺氧3、7、14d和21d组,每组8只,测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、血管形态学指标、右室肥大指数(RVHI);原位杂交和免疫组化检测TGFβ1、iNOS基因表达,透射电镜观察腺泡内血管壁细胞表型。结果缺氧7d后大鼠mPAP升高〔(18.41±0.37)mmHg,P<0.05〕。缺氧性肺血管重塑、右心室肥大于缺氧14d后出现。透射电镜证实成肌纤维细胞含有特异性的微丝和丰富的粗面内质网。TGFβ1mRNA于缺氧3d、7d表达增高不明显,缺氧14d增高(0.385±0.028,P<0.01);TGFβ1蛋白在常氧组呈弱阳性,缺氧3d表达增强(0.198±0.031,P<0.01),缺氧7d组达高峰(0.267±0.035,P<0.01)。对照组大鼠肺动脉壁iNOSmRNA弱阳性,缺氧3d后表达增强(0.245±0.036,P<0.01),缺氧7d达高峰水平(0.318±0.034,P<0.01),以后维持于高峰水平;iNOS蛋白在常氧组大鼠肺动脉中膜iNOS弱阳性,缺氧3d始增高(0.225±0.030,P<0.01),缺氧7d起稳定于高水平。结论缺氧诱导TGFβ1和iNOS动态表达变化及肺血管成肌纤维细胞的形成参与大鼠缺氧性肺血管重塑。     

慢性阻塞性肺疾病中转录因子ATF3/ATF4与Nrf2的表达及相互作用

目的: 研究活化转录因子3(ATF3)、活化转录因子4(ATF4)和红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者体内的表达变化,探讨ATF3、ATF4与Nrf2蛋白之间的相互作用。方法: 肺组织标本取自40例肺肿瘤行肺叶切除者,于远离病灶处取材,诊断符合COPD者入选COPD组(20例),不符合者入选对照组(20例)。取两组患者的肺组织,原位杂交和免疫组化检测ATF3、ATF4和Nrf2 mRNA及蛋白表达水平。复制COPD大鼠模型,应用免疫共沉淀法(Co-IP)研究ATF3、ATF4与Nrf2蛋白之间的相互关系。结果: (1) COPD组患者第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV₁/FVC)和第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV₁%预计值)明显低于对照组(均P<0.01)。(2)COPD大鼠肺功能 (FEV_0.3、FEV_0.3/FVC和PEF)较对照组显著恶化(均 P<0.01)。(3)免疫组化显示COPD组ATF3、ATF4和Nrf2蛋白水平较对照组升高(均 P<0.01)。(4)原位杂交结果显示ATF3和ATF4 mRNA表达水平在COPD组显著高于对照组(均P<0.01),而Nrf2 mRNA在两组表达无明显差异(P>0.05)。(5) Co-IP结果显示在Nrf2抗体捕获的免疫沉淀中,ATF3和ATF4抗体均可杂交出明显的蛋白条带(P<0.05)。 结论: 氧化应激状况下ATF3和ATF4表达明显上调,通过与Nrf2之间的相互作用,可能转录调控Nrf2靶基因的表达,在COPD的氧化／抗氧化失衡中发挥生物学作用。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠中磷酸化蛋白激酶B与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达研究

目的通过观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）与磷酸化蛋白激酶B（p-PKB）的表达,研究p-PKB和γ-GCS在COPD中可能的参与机制。方法28只健康雄性Wistar大鼠随机分为COPD组和对照组。采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖（LPS）法制作COPD大鼠模型。检测肺组织中1-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCS mRNA的表达,免疫组化和Western印迹分析肺组织中γ-GCS与p-PKB蛋白水平。结果γ-GCS活性在COPD组大鼠中明显高于对照组,组间差异有统计学意义（P〈0．05）。原位杂交显示COPD组大鼠支气管、肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞γ-GCS mRNA广泛表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。COPD组大鼠γ-GCS与p-PKB免疫组化可见肺泡、支气管壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆有较强蛋白阳性信号;图像定量分析显示COPD组γ-GCS与p-PKB蛋白表达高于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot显示,γ—GCS与p-PKB在COPD组蛋白表达高于对照组,且差异有统计学意义（P〈0．05）。SPSS10．0直线相关分析得出p-PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关。结论COPD大鼠肺组织1．GCS蛋白和mRNA表达增高,p-PKB蛋白也有相应高表达,提示p-PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中起作用,且PKB可能参与了γ-GCS的信号转导。     

降逆汤对支气管哮喘并胃食道返流患者肺功能及气道反应性的 …

为探讨降逆汤对支气管哮喘并胃食道返流患者肺功能与气道反应性的影响，本研究 ５４例哮喘并ＧＥＲ患者随机分为降逆汤组，西药组与对照组，前两组分别给予降逆汤与雷尼替丁等西药治疗６周。提示降逆汤通过治疗ＧＥＲ而改善哮喘并ＧＥＲ患者之肺功能与气道反应性。     

正常大鼠和人肺组织一氧化氮合成酶组织化学定位研究

以还原型辅酶Ⅱ-黄递酶组织化学法对大鼠和人肺组织内一氧化氮合成酶(NOS)进行定位研究.结果显示:NOS广泛分布于各级支气管、肺泡管和部分肺泡囊上皮细胞及肺血管内皮细胞内.但肺泡及血管中、外膜NOS呈阴性反应,且NOS在大鼠和人肺组织内分布无明显区别.从而提示一氧化氮在肺组织的生理和病理学功能上可能发挥着重要作用.     

一氧化氮合成酶基因家族

哺乳动物细胞存有一氧化氮合成酶基因家族，其编码的蛋白为ＮＯＳ蛋白家族。本文综述了ＮＯＳ家族的基因结构、基因表达调控、蛋白结构与功能的研究进展。     

肺心汤对慢性肺心病患者一氧化氮、内皮素及肾上腺髓质素的影响

目的：探讨复方中药制剂肺心汤治疗肺心病急性发作期的疗效及对一氧化氮（NO）、内皮素－1（ET－1）、肾上腺髓质素（ADM）的影响。方法：将46例肺心病发作期患者随机分为肺心汤治疗组和西药治疗组，各23例，分别给予肺心汤和常规西药（抗炎、解痉、扩血管等）治疗14天，以硝酸还原酶法测血清NO含量；用放射免疫法测血浆ET－1和ADM水平，结果：肺心汤与西药治疗肺心病急性发作期临床疗效无明显差异（P＞0．05）；两组治疗后PaO2均升高，PaCO2降低（P均＜0．01），两组之间差异无显著性（P＞0．05）。但肺心汤治疗组血清NO含量较治疗前明显增加（P＜0．01），血浆ET－1、ADM则明显降低（P＜0．01），而西药治疗组治疗后NO、ET－1、ADM无明显变化，两组之间差异有非常显著性意义（P＜0．01）。结论：肺心汤治疗肺心病急性发作期具有较好的临床疗效。其可能部分通过调节患者NO、ET－1、ADM平衡而起作用。     

缺氧对肺动脉内皮细胞－氧化氮合成酶活性及基因表达的影响

缺氧对肺动脉内皮细胞－氧化氮合成酶活性及基因表达的影响戴爱国，张珍祥，牛汝楫，徐永健，段生福以细胞化学技术和斑点印迹杂交对常氧和缺氧离体培养猪肺动脉内皮细胞一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）的活性和基因表达进行研究。结果显示：常氧培养肺动脉内皮细胞具有较高的Ｎ...