四逆汤协同壮观霉素B1诱导PTEN与SUMO1解离治疗肺癌的研究

目的从蛋白质类泛素化修饰角度解析温里剂四逆汤协同壮观霉素B1抑制肺癌细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡的作用机制。方法实验分对照组、壮观霉素B1组、四逆汤组和联合药物组,于人非小细胞肺癌A549细胞株作用48 h后,采用Westernblotting法检测小泛素相关修饰蛋白-1(SUMO1)、10号染色体缺失磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷酸化Akt(p-AKT)和Caspase-9的蛋白表达水平;MTT实验绘制细胞增殖曲线;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果壮观霉素B1和四逆汤均能够降低A549细胞共价态SUMO1和p-Akt水平,增加PTEN和活化Caspase-9的蛋白水平,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,壮观霉素B1和四逆汤联合药物组对细胞的抑制作用显著强于各单独给药组。结论四逆汤能够协同壮观霉素B1诱导PTEN与SUMO1解离,进而抑制肺癌细胞增殖、转移和促进细胞凋亡。     

多指标综合加权评分法优选清感退热汤加减方的提取工艺

目的:通过多指标综合加权评分法优选出清感退热汤加减方的提取工艺,为该方的后续研究与开发提供参考。方法:以葛根素、黄芩苷和汉黄芩苷的含量为指标,以加水量、提取时间和提取次数为考察因素,采用正交试验,应用综合加权评分法对实验数据进行分析,确定最佳提取工艺。结果:该加减方的最佳提取工艺为加水量为8倍量,回流提取0.5 h,提取3次。结论:本研究所优选的工艺稳定,合理可行,可作为清感退热汤加减方的提取方法。     

黄连HPLC Maxplot指纹图谱的建立

[目的]以高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)MaxPlot色谱图为基础,建立黄连指纹图谱分析方法。[方法]采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Agilent SB-C18(4.6 mm×150 mm,3.5μm);流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液,线性梯度洗脱;210~400 nm波长下提取Maxplot色谱图。以黄连对照药材随行测定所得MaxPlot色谱图作为黄连的标准对照指纹图谱,通过相似度评价黄连药材质量。[结果]结果显示,PDA MaxPlot模式下黄连指纹图谱共获得11个共有峰,较单一波长345 nm下多1个微量成分峰。12批样品指纹图谱与对照药材随行对照标准指纹图谱相似度达0.994以上。[结论]MaxPlot指纹图谱显著提高了黄连中各类成分检测的灵敏度,有效增加了黄连药材共有峰数量,为该药材多成分的质量控制提供了借鉴。     

苦瓜茎叶醋酸乙酯部位的化学成分研究

目的研究苦瓜茎叶醋酸乙酯部位的化学成分,为进一步开发利用苦瓜茎叶提供依据。方法采用反复硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20等柱色谱进行分离纯化,并根据波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离得到3种苦瓜三萜,分别鉴定为苦瓜素I(1)、kuguacin N(2)、3,7-二羟基-23(R)-乙氧基-19-醛基-5,24-二烯醇(3)。结论化合物3为新化合物,命名为23-乙基苦瓜素I。     

煎药机不同煎煮模式对痰湿瘀阻型中风病汤剂质量的影响

目的 基于自动煎药机的2种工作模式（常压/高压）,比较2种煎药模式下痰湿瘀阻型中风病汤剂质量间的差异,筛选该类处方的适宜煎煮模式。方法 采用全自动煎药机高压密闭和常压两煎模式制备汤剂。以总固体量、主要化合物的含量以及染菌数等为考察指标。主要化合物的含量采用HPLC测定,染菌数以中国药典附录下非无菌产品微生物限度检查方法进行考察。结果 经方差分析发现,常压煎煮制备的汤剂相对密度、总固体量及新橙皮苷含量均显著高于高压煎煮。而2种煎煮模式下各供试品中细菌数均<100个,霉菌和酵母菌数亦<100个。结论 经浸泡常压煎煮更适用于半夏白术天麻加减方的制备,为痰湿瘀阻型中风病汤剂的煎煮提供一定的数据支撑。     

肛洗二号中药软膏剂皮肤刺激性考察及质量控制研究

目的:考察肛洗二号中药软膏剂单次和多次给药对动物皮肤的刺激性,同时对其进行质量控制研究,建立简便、有效、快速的质量控制方法。方法:以SD大鼠为试验动物,通过皮肤刺激性试验考察制剂单次和多次给药对正常皮肤的刺激性,对其用药安全性进行评价。以外观性状、pH值、离心试验以及含量测定为质量控制指标,对其进行耐冷耐热试验、3个月的加速试验和6个月常期试验的初步稳定性研究。结果:皮肤刺激性试验结果表明,单次和多次给药对正常皮肤均未造成红斑和水肿现象,刺激性评分均为零。耐冷耐热试验、加速试验和常期试验结果表明,制剂的外观性状稳定,pH值在6.5~7.5之间、离心试验和主要成分含量测定结果与制备初期相比无明显变化,均符合质量控制标准。结论:肛洗二号中药软膏剂对皮肤的刺激性小,符合透皮给药系统应对皮肤无刺激性的设计要求,且制剂成品稳定性好、质量可控,符合临床治疗需要,适合于临床应用和推广。     

基于细胞周期相关基因的胶质瘤患者预后模型构建与验证

目的 探讨细胞周期相关基因在胶质瘤患者中的表达及预后价值。方法 利用CGGA数据库筛选与胶质瘤患者预后相关的细胞周期基因,并基于CGGA与TCGA中胶质瘤患者的临床数据,通过LASSO回归分析,构建预测患者生存情况的预后模型。根据计算公式,区分高低风险组患者,组间进行GSEA富集分析与ssGSEA免疫微环境分析。结果 筛选到10个与患者预后密切相关的细胞周期基因,LASSO回归分析纳入4个基因[细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2C（CDKN2C）、姐妹染色单体分离的PTTG1调控因子（PTTG1）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、WEE1 G2检查点激酶（WEE1）]构建预后模型,计算公式为：风险值（risk socre）=（0.008）×CDKN2C表达量+（0.022）×PTTG1表达量+（0.031）×CDK2表达量+（0.127）×WEE1表达量。生存分析显示,高风险组患者生存率低于低风险组,ROC曲线表明,模型在CGGA与TCGA队列中,均具有较好的预测能力。GSEA富集分析显示,高风险组富集到多个细胞周期进程相关的信号通路,提示可能参与胶质瘤的恶性进程。免疫微环境分析表明,高风险组患者的免疫细胞浸润与免疫反应激活程度均高于低风险组。结论 基于细胞周期相关基因的预后模型可较好地应用于胶质瘤患者的预后预测,纳入的关键基因可能是胶质瘤治疗的可靠靶点。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2023, 50(4): 15-24]     

胶质母细胞瘤相关体液生物标志物的研究进展

液体活检(liquid biopsy)是指基于体液中肿瘤相关生物标志物如DNA、RNA、蛋白质等进行检测的微创检查技术,能够在肿瘤早期进行筛查,达到早发现、早干预的效果,提高患者的生活质量[1].对于胶质母细胞瘤(GBM)来说,早期诊断可以减少肿瘤对脑组织的破坏,而在现有GBM诊断方法中,影像学检查具有盲目性,唯一...     

两种方法对蒙药金诃子低温提取物多糖成分和含量测定结果比较

目的：评价两种方法对蒙药金诃子低温提取物多糖成分和含量的检测效果。方法采用红外光谱技术和硫酸-蒽酮比色法测定蒙药金诃子5个不同部位提取物中多糖的成分和含量,红外光谱技术检测部分由清华大学分析中心完成。评价硫酸-蒽酮比色法的精密度、稳定性、重复性和加样回收率等性能指标。结果红外光谱技术测得蒙药金诃子5个部位提取物中均有多糖成分,但各部位的含量比较差异无统计学意义。硫酸-蒽酮比色法线性范围为40～200μg/mL;精密度良好（ RSD＝0．460％）,重复性良好（ RSD＝1．616％）,平均加标回收率为（110．130±0．010）％（ RSD＝0．946％）;试剂在室温自然光下2 h内稳定性良好;标准曲线线性回归方程为Y＝0．2051X-0．0034,R＝0．9991;蒙药金诃子5个部位提取物中多糖含量为14．15％～22．15％。结论蒙药金诃子不同部位提取物的成分分析优选红外光谱技术,而硫酸-蒽酮比色法用于检测多糖含量。