肾母细胞瘤术前化疗疗效与耐药性

目的：探讨肾母细胞瘤术前化疗疗效规律及耐药性的生物学特性,确认其术前化疗的合适疗程。方法：选择15例按L化疗方案接受术前化疗5周以上,资料记录完整的患儿作为术前化疗疗效研究对象,测量术前化疗不同疗程肿瘤大小;对18例未术前化疗和经不同疗程术前化疗病理档案,采用JSD－单克隆抗体对肾母细胞瘤组织多药耐药蛋白（P-glycoprotein,P-gp)进行免疫组织化学检测,了解P－gp在术前化疗不同疗程的 表达特点。结果：术前化疗2周后,肿瘤体积缩小值最明显,术前化疗4周后,其体积缩小值减缓,部分病例有逐渐增大趋势;而术前化疗疗程越长,肿瘤细胞P－gp表达越强。结论：L术前化疗方案对肾母细胞瘤的疗效肯定,疗程以2－3周后最显著。其疗效降低可能与术前化疗后瘤组织对化疗药物耐药性明显增强有关。合适疗程为3－4周。     

跨胎盘RNAi技术对目的基因下调的研究

目的：利用跨胎盘RNA干扰技术下调目的基因，研究小鼠胚胎发育中BMP4基因的功能。方法实验分为Ringer’ s液空白对照组（空白组）、 pSES阴性对照组（阴性组）、 pSES?SiBMP4实验组（实验组），各组孕7．5 d母鼠尾静脉注射干预。分别对干预溶液体积、质粒浓度、注射速度进行研究。[依据小鼠克数体重体积分别采用5、10、15及20μl／g；浓度采用10、30、50及70 ng／μl；注射时间3、5、10、20及30 s。]探索获得基因下调胚胎鼠的最适参数，并观察干预48 h后胚胎基因型及表现型。结果实验组孕鼠在10μl／g，50 ng／μl，5 s给药后荧光强度下调最明显，与阴性组、空白组比较干预48 h后胚胎存在中枢神经系统、心血管系统异常，实验组胚胎 BMP4及 Smad4基因 mRNA 下调。结论优化的跨胎盘RNAi技术可用于小鼠基因功能的研究。     

新耐药基因HA117在神经母细胞瘤中的表达及临床意义1

【】 目的：研究新耐药基因HA117蛋白在神经母细胞瘤中的表达位置和分布情况及临床意义；方法：应用S-P免疫组化法,检测30例神经母细胞瘤和24例瘤旁组织中HA117蛋白的表达情况,分析其与神经母细胞瘤临床病理特征的关系,比较与经典耐药基因MDR1两者的表达情况,初步探讨其耐药机制。 结果：HA117在神经母细胞瘤中的表达阳性率为70%,在瘤旁组织中的表达阳性率为21%,其结果有显著性统计学意义(p <0.05)。不同病理分期中表达无明显差异(p>0.05)。MDR1耐药蛋白在神经母细胞瘤中的表达率为60%,其结果与HA117蛋白有显著差异性(p <0.05)。结论：HA117蛋白在神经母细胞瘤中有着广泛的分布,提示神经母细胞瘤具有多药耐药现象,其耐药机制有别与传统的MDR1外排泵机制。     

亲体肝移植治疗小儿门静脉海绵样变1例

门静脉海绵样变（PVCT）是由于门静脉主干及其肝内分支完全或部分阻塞后引起门静脉高压症,肝门区及其周围侧支循环形成并扩张迂曲呈静脉血管瘤样改变是其特征性的病理改变。它属于肝前性门静脉高压症的一种,临床少见。目前治疗该病的方法较多,但疗效均欠理想。我们对1例小儿PVCT用亲体肝移植加脾切除和门奇断流术治疗，效果良好。[第一段]     

小儿消化道出血的病因诊断

消化道出血是小儿常见的急腹症。70年代以来，由于采用纤维窥镜、放射性同位素扫描以及选择性腹腔动脉造影等检查方法，消化道出血的病因确诊率已达90%左右，但提高在常规X线检查条件下的确诊率仍有重要意义。     

雌二醇对EOMA细胞增殖、ERα、ERβ及VEGF表达的影响

目的 探讨17β-雌二醇(E2)对鼠源性血管瘤血管内皮细胞(EOMA细胞)生长,雌激素α、β受体亚型(ERα、β)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 用1、10、100 nmol/L 浓度的E2分别作用于EOMA细胞,同时设对照组(不加E2).四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同时间点其对EOMA细胞生长的影响;Western blot检测EOMA细胞的ERα、β表达强度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中VEGF的分泌水平.结果 1 nmol/L E2组在36 h时高于对照组(P<0.05);10 nmol/L E2组、100 nmol/L E2组各个时间点OD值均明显高于对照组(P<0.05),36 h时OD值最高(P<0.01).E2作用下10 nmol/L E2组ERα和ERβ水平及100.0 nmol/L E2组ERα水平较对照组均明显增高(P<0.05).24、48 h时,各浓度E2组与对照组的VEGF水平比较均差异有统计学意义(P<0.05),48 h时100 nmol/L E2组和10 nmol/L E2组VEGF水平均高于1 nmol/L E2组(P<0.05).结论 E2可促进EOMA细胞增殖,可能主要通过ERα、VEGF表达水平上调来实现.     

先天性肠系膜裂孔疝3例诊治分析

目的探讨先天性肠系膜裂孔疝的早期诊断和治疗方法。方法对山西省儿童医院2012年1—7月收治的3例肠系膜裂孔疝的患儿的病情进行分析,总结对先天性肠系膜裂孔疝的诊治体会。结果 3例患儿均为术中确诊;第1例患儿术中可见疝入肠管扩张,呈暗红色,行肠管切开减压后,经裂孔处复位,复位后肠管血运恢复,未出现肠坏死。后2例患儿术中可见疝入肠管已缺血坏死,行肠吻合术。第1例患儿术后合并中毒性脑病。结论本病术前诊断困难,关键是判断是否考虑绞窄性肠梗阻。急诊行剖腹探查后确诊。手术治疗是本病的唯一治疗方法。     

转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞的实验研究

目的构建转化生长因子β3（transforming growth factor β3，TGF-β3）的腺病毒载体，并通过腺病毒载体将TGF-β3基因转染骨髓间充质干细胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs），使其在细胞内得到表达。方法将人TGF-β3质粒定向克隆进入穿梭质粒pAdTrack—CMV中，与pAdEasy-1共同转入细菌并重组，获得TGF-β3重组腺病毒质粒，用脂质体法导入包装细胞HEK293中，48～96h后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。取1月龄新西兰大白兔5只，取其胫骨骨髓。采用密度梯度离心法分离纯化MSCs，并进行传代。取传至第3代细胞采用TGF-β3腺病毒载体转染，10h后荧光显微镜观察绿色荧光表达，转染TGF-β3重组腺病毒4d后的MSCs用免疫细胞化学方法观察TGF-β3在细胞内的表达。结果pAdEasy—TGF-β3转染HEK293细胞48～96h后，荧光显微镜可见明显的绿色荧光表达。兔骨髓分离培养10d后，培养MSCs融合达70％～80％、贴壁紧密，细胞形态均一，似成纤维细胞；14d完成原代细胞培养。TGF-β3重组腺病毒转染MSCs17h后，荧光显微镜下出现少量绿色荧光，48～72h荧光加强，荧光与MSCs轮廓一致。免疫细胞化学观察，转染TGF-β3重组腺病毒MSCs胞浆内有棕黄色阳性颗粒表达。结论TGF-β3基因重组腺病毒载体的成功构建并在MSCs内的表达，为创伤愈合的基因治疗提供了研究基础。