小儿恶性实体肿瘤治疗进展

恶性肿瘤是严重威胁人民生命健康的常见病,我国每年新增恶性肿瘤患者约160万.随着我国经济发展和健康水平提高,传染病疾病、感染性疾病得到有效控制,在我国经济发达地区及大城市,恶性肿瘤已成为儿童疾病死亡首位原因.根据上海1990年统计资料,小儿恶性肿瘤发病率为98.8/100万人口,同期北美和欧州小儿恶性肿瘤发病率分别为122/100万人口及120/100万人口.儿童恶性肿瘤中白血病发病率最高约占总数32%,小儿恶性实体瘤以颅内肿瘤、恶性淋巴瘤、神经母细胞瘤、肾母细胞瘤、软组织肉瘤、骨肉瘤、肝母细胞瘤等较为常见.早期诊断、早期治疗、综合治疗是儿童肿瘤诊治的基本原则.综合治疗包括：手术治疗、化疗、放疗、免疫治疗、造血干细胞移植及基因治疗等.     

小儿先天性胆总管囊肿

临床资料 1974～1990年17年中我科收治先天性胆总管囊肿140例,年龄最小2月,最大14岁,男41例,女90例。手术治疗79例。诊断主要方法有①临床表现(腹痛、黄疸及腹块)。②上消化道钡餐,主要表现为十二指肠受压,推移及十二指肠圈扩大。③静脉胆道造影,梭形及较小囊肿效果较好。④经皮肝穿胆道造影(PTC)。⑤B超,具有无损伤、简单、准确等优点,为最主要诊断方法。治疗诊断一经确立原则上应行根治手术。本组采用以下手术方法。①单纯外引流术(5例)。②十二指肠或空肠囊肿侧侧吻合术(13例),因不符合生理,并发症多目前已极少采用。③空肠囊肿Roux-Y吻合术(31例),提向囊肿的空肠在距属氏韧带20cm处切断,引流胆汁空肠的长度在15cm     

Bcl-2、钙视网膜蛋白在发育异常肠壁神经节细胞中的表达

目的探讨Bcl-2和钙视网膜蛋白(calretinin,CR)在不同发育程度肠壁神经节细胞中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色观察Bcl-2、CR在40例先天性巨结肠病(hirschsprung disease,HD)、10例先天性巨结肠类缘病(hirschsprung’s allied disease,HAD)和对照组肠壁神经节细胞的表达情况。结果Bcl-2表达于发育较差的神经节细胞,在发育成熟的神经节细胞不表达。CR表达于发育成熟的神经节细胞,在发育较差的神经节细胞不表达或弱表达。结论Bcl-2和CR在肠神经节细胞的特异性表达,有助于判断神经节细胞的成熟程度。Bcl-2在发育异常肠壁神经节细胞的功能维持和恢复上可能起到了重要作用。     

实验性巨结肠大鼠模型的建立及其生物学特性

目的:建立一种适合骨髓间充质干细胞移植的实验性巨结肠大鼠模型并观察其生物学特性.方法:8～9周龄SD大鼠90只,随机分为两组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(BAC)处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替BAC.分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠,结肠测压、取处理段结肠行病理学检查,循环水浴药理学测定平滑肌收缩功能变化,RT-PCR检测AchE、nestin、Chrm3的表达.结果:BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,对乙酰胆碱敏感性增强,近端结肠扩张有大便堆积,且随着时间延长症状加重.病理学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失.结论:采用0.1?C处理降结肠浆膜成功建立了实验性巨结肠模型,此模型与先天性巨结肠动物模型相似,为进一步结肠内骨髓间充质干细胞移植移植分化为神经细胞的研究奠定了基础.     

结缔组织生长因子的克隆及其真核表达载体的构建

目的结缔组织生长因子(CTGF)在肿瘤发生,胚胎发育、骨折愈合、细胞增殖和分化、血管形成等众多领域都有着重要的作用,对结缔组织生长因子进行克隆及构建其真核表达载体,对其在功能上的进一步研究及应用有积极意义.方法以含有鼠CTGF基因序列的EST克隆为模板,通过PCR的方法克隆出目的基因CTGF,再以分子克隆学的方法将CTGF克隆入真核表达载体pAdTrack-CMV,进一步以PCR、酶切、DNA测序的方法筛选出正确的真核表达质粒.并通过Western-Blotting的方法对质粒的表达功能进行研究.结果 PCR、酶切、DNA测序的方法均证实已经成功克隆获得序列正确的目的基因CTGF,并将CTGF克隆入真核表达载体pAdTrack-CMV.Western-Blotting的结果表明构建的表达CTGF的真核表达载体高表达CTGF蛋白质.结论成功克隆目的基因CTGF并构建其真核表达质粒,证实在蛋白质水平获得了表达.     

钙视网膜蛋白在先天性无神经节细胞症中的表达特点及临床意义

目的探讨将钙视网膜蛋白(CR)用于诊断先天性无神经节细胞症(HD)的可行性。方法采用免疫组织化学法检测CR在50例HD(HD扩张段组、HD痉挛段组)和10例对照组结肠壁的表达,并与常规HE染色进行对比分析。用Image-Pro-Plus图文分析系统定量分析染色结果。结果 HD痉挛段组与对照组及HD扩张段组黏膜下层、肌层间CR表达的平均光密度值(MOD)差异均有统计学意义(P<0.01);HE染色扩张段肠壁神经丛中可见神经节细胞,痉挛段神经节细胞缺失,CR免疫组织化学染色与HE染色诊断结果一致;新生儿与年长儿HD痉挛段黏膜下层CR表达差异无统计学意义(P=0.816)。结论 CR免疫组织化学染色用于新生儿HD的诊断与传统方法比较具有明显优越性。     

MDR1基因转染小鼠骨髓干细胞在化疗中骨髓保护作用的研究

多药耐药基因 (ＭＤＲ1 )属于人类正常防御性基因 ,其编码产物Ｐ 糖蛋白 (Ｐ ｇｐ)在部分肿瘤细胞的高表达是肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药的主要原因。实验应用本课题组所构建的含有人全序列ＭＤＲ1ｃＤＮＡ逆转录病毒载体ＰＨａＭＤＲ1 /Ａ1的产病毒包装细胞ＰＡ3 1 7 ＨａＭＤＲ1 /Ａ1 ,其产生病毒颗粒的滴度约为 3 3 1× 1 0 5 ＣＦＵ/ｍｌ,上清液感染法将ＭＤＲ1基因转染Ｂａｌｂ/ｃ小鼠骨髓干细胞 ,转染率达 40 %左右 ,经ＰＣＲ、免疫组化、流式细胞术检测 ,在基因、蛋白质及细胞水平证实ＭＤＲ1基因已经转入小鼠骨髓细胞并具有药…     

肝母细胞瘤患儿及其母亲孕期特点回顾性分析

目的 探讨肝母细胞瘤发生的危险因素,包括婴儿出生以及孕产妇分娩相关的特征.方法 采用病例-对照研究设计,收集肝母细胞瘤患儿及其母亲的病历资料,用Logistic回归模型对婴儿特征指标、母亲怀孕与分娩有关指标进行多因素统计检验. 结果发生肝母细胞瘤风险中低出生体质量儿的比值比为26.0(95%可信区间为14.0～65.7).母亲≤20岁和≥30岁的比值比分别为1.5(95%可信区间为0.6～4.6)和2.6(95%可信区间为1.0～6.7).超重和肥胖母亲的比值比为3.2(95%可信区间为1.0～6.7).孕妇吸烟的比值比为2.9(95%可信区间为1.1～4.2),对>2岁及H{生体质量正常儿童影响较大. 结论肝母细胞瘤的发生与患儿出生体质量及孕妇超重、吸烟等因素有关,应重视围产期卫生保健.     

不同年龄增生性瘢痕转化生长因子β_1表达的检测及其意义

目的通过观察不同年龄增生性瘢痕与正常皮肤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,初步探讨TGF-β1的表达与增生性瘢痕形成的年龄因素的关系。方法以增生性瘢痕为研究对象,正常皮肤组织为对照,采用SABC免疫组化方法观察1～19岁、20～50岁增生性瘢痕与各年龄组正常皮肤的细胞因子TGF-β1的表达。结果增生性瘢痕组织的TGF-β1含量显著大于正常皮肤。1～19岁增生性瘢痕组TGF-β1表达较20～50岁增生性瘢痕组的增高差异有具显著性意义(P<0.01)。胎儿组皮肤TGF-β1表达低于正常皮肤(P<0.01)。结论TGF-β1表达增高是增生性瘢痕形成的原因之一。