儿童肿瘤耐药检测的临床意义

由于经济发展、社会进步及医学科学的成就,儿童传染性感染性疾病及先天性畸形的病死率显著下降,近十多年来,儿童恶性肿瘤已逐渐成为小儿疾病的第一死亡原因。恶性肿瘤的两个难题即全身性和异质性已成为业界专家的共识:恶性肿瘤的全身性是指恶性肿瘤一旦确诊,其肿瘤细胞已不局限于某一局部;恶性     

热休克蛋白70在人胶质瘤耐药过程中的作用

目的 应用热休克人胶质瘤细胞的方法,观察热休克蛋白70(HSP 70)在人胶质瘤细胞耐药过程中的作用.方法 经43 ℃热处理2 h的人胶质瘤细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化技术检测HSP 70 mRNA及蛋白的表达情况;应用hoechst 33258荧光染色的方法观察化疗药物阿霉素(adriamycin,ADM)作用后,不同处理组人胶质瘤细胞的凋亡情况.结果 HSP 70免疫组化,HS ADM组阳性率为(61.5±18.3)%,与HS组(61.0±14.1)%比较没有统计学意义,但显著高于对照组(8.50±4.09)%(P＜0.05),RT-PCR结果与免疫组织化学一致;ADM组凋亡细胞比率为(52.7±19.1)%,显著高于对照组(6.5±3.6)%(P＜0.05),HS ADM组(25.0±10.7)%高于对照组但显著低于ADM组(P＜0.05),HS组(7.2±3.6)%与对照组没有明显差异(P＞0.05).结论 热休克的方法可以诱导人胶质瘤细胞HSP 70的表达;HSP 70可能是引起人胶质瘤细胞耐受ADM的机制之一.     

258例儿童先天性十二指肠梗阻诊治的回顾性分析

目的：收集258例先天性十二指肠梗阻的病例资料,分析并总结该病在儿童不同年龄段的临床特点和诊治要点。方法：收集我院2003年至2012年间收治的258例先天性十二指肠梗阻病例,对临床病例资料进行分组回顾性分析,总结临床特点及诊治要点。结果：（1）先天性十二指肠梗阻多在新生儿期发病（ ?字2=10.658 3,P=0.005）;（2）胆汁性呕吐（76.36%）是本病最突出的临床症状（?字2=37.482 1,P=0.000）;（3）腹部平片、腹部超声多普勒及上消化道造影对本组病例的阳性发现率分别为78.57%、73.71%和100%,有显著性差异（P=0.000）;（4）先天性肠旋转不良、十二指肠闭锁或狭窄、环状胰腺是先天性十二指肠梗阻最常见的病因;先天性十二指肠梗阻一经确诊,应尽早手术,预后好（本组治愈率96.88%）。结论：先天性十二指肠梗阻诊断成立应尽早手术,预后多较好。     

电阻抗成像技术和水通道蛋白4在3岁以下主动脉缩窄手术患儿脑水肿监测中的应用

目的：比较3岁以下主动脉缩窄手术行顺行性脑灌注（antegrade cerebral perfusion,ACP）时在不同温度下患儿脑水肿情况,评估电阻抗成像技术是否可以评估患儿脑水肿情况。方法：回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院胸心外科2012年1月至2017年1月收治的60例3岁以下行主动脉缩窄合并心内畸形的手术患儿基本资料（如性别、年龄和体质量）,根据停循环时的鼻咽温度分为深低温组（17.0 ℃～20.0 ℃）、中低温组（20.1 ℃～25.0 ℃）和浅低温组（25.1 ℃～30.0 ℃）。检测麻醉诱导后、ACP前、ACP结束时、体外循环（cardiopulmonary bypass,CPB）结束时、术后3 h、术后12 h和术后24 h ７个时间点血清水通道蛋白4（aquaporin 4,AQP4）的表达和脑电阻抗系数。收集同期20例在我院行干下型室间隔缺损修补术的患儿为对照组。结果：采用重复测量方差分析,不同组间同时间点采用简单效应分析的Sidak检验,顺行性脑灌注下深低温组患儿血清AQP4水平在ACP结束、CPB结束、术后3 h、术后12 h、术后24 h相对于中低温组、浅低温组、对照组均明显升高（F组别=160.755,P组别=0.000;F时间=283.208,P时间=0.000,F交互=19.859,P交互=0.000）;深低温组患儿脑电阻抗系数在CPB结束、术后3 h、术后12 h、术后24 h相对于中低温组、浅低温组和对照组均明显升高（F组别=55.243,P组别=0.000;F时间=90.805,P时间=0.000,F交互=10.743,P交互=0.000）。结论：3岁以下主动脉缩窄ACP时深低温组脑损伤可能高于中低温组、浅低温组和对照组,基于电阻抗成像技术的脑水肿监测仪可以判断患儿脑水肿情况。     

超声微泡促腺病毒载体转染MDR1基因效率的体外实验研究

目的 探讨超声微泡造影剂在体外促进腺病毒载体介导的MDRl基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,并初步探讨其安全性.方法 根据是否加入超声微泡造影剂和超声辐照将分选的兔骨髓单个核细胞分为常规培养组(A)、腺病毒MDRl基因转染组(B)、腺病毒MDRl基因转染+超声辐照组(C)、微泡造影剂+腺病毒MDRl基因转染组(D)、微泡造影剂+腺病毒MDRl基因转染+超声辐照组(E).收集各组细胞,应用RT-PCR法、流式细胞技术等分别从基因、功能及细胞生物学特性等方面检测外源性MDR1基因在骨髓单个核细胞内的功能性表达及安全性.结果 收获高滴度的Ad5-MDR1腺病毒载体并成功制备腺病毒微泡造影剂;RT-PCR结果 显示,除A组外其余4组在194 bp处均观察到特异性MDR1电泳条带,证实外源性MDR1基因通过腺病毒载体整合到细胞基因组中,且E组MDR1电泳条带的光密度比值明显高于B、C、D组(P<0.05);柔红霉素排出实验证实外源性MDR1基因表达产物P-gP有药物外排泵功能,且E组P-gp阳性率最高(P<0.05),而柔红霉素阳性率显著降低;一定强度的超声辐照及微泡造影剂对骨髓单个核细胞的细胞周期无明显影响.结论 低频超声波击碎微泡造影剂,能促进以腺病毒为载体介导的外源性MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,且安全可行.     

腺病毒介导的新基因HA117对Jurkat细胞多药耐药功能的影响

目的 研究新基因HA117对急性淋巴细胞白血病细胞Jurkat耐药性的影响,探讨新基因HA117多药耐药(muhidmg resistance,MDR)相关功能.方法 以携带HA117基因的重组腺病毒Ad5-HA117感染Jurkat细胞得到高表达HA117基因的细胞Jurkat/HA117,以荧光显微镜和流式细胞术检测细胞感染效率,RT-PCR检测感染前后实验细胞HA117基因表达,MTT检测比较高表达HA117基因前后Jurkat细胞药物敏感性变化.结果 新基因HA117可使Jurkat细胞对多种化疗药物耐药性增强,转染AdS-HA117重组腺病毒的Jurkat细胞对VCR、ADM、Vp-16、DNR、MMC、CTX药物的药物耐受性均比未转染的Jurkat细胞增高,增高3～7倍(P<0.05,P<0.01),转染空载体组耐药性跟未转染的Jurkat细胞相比无显著差异(P>0.05).结论 新基因HA117可使Jurkat细胞的耐药功能增加,证实新基因HA117具有多药耐药功能.     

新基因HA117最佳siRNA的筛选及重组腺病毒构建

目的 验证pSOS-HUS筛选目的 基因最佳siRNA的效果,应用pSOS-HUS筛选新基因HA117最佳siRNA,构建携带HA117基因最佳siRNA转录模板DNA的重组腺病毒.方法 构建携带HA117基因及其siRNA模板DNA链的双克隆质粒.把双克隆质粒分别转染293细胞,通过镜下观察、流式细胞仪检测比较绿色荧光表达强度,RT-PCR检测HA117基因mRNA表达,筛选鉴定基因HA117最佳siRNA.构建HA117基因RNA干扰重组腺病毒.结果 从5对模板DNA链中筛选出最有效片段HAi5,构建携带HAi5的重组腺病毒.结论 载体pSOS-HUS可快捷有效地筛选目的 基因的最佳siRNA;在5对模板DNA中,HAi5转录的siRNA对新基因HA117干扰效果最强;成功构建携带HAi5的重组腺病毒.     

博士研究生学位论文的定量评审

本文对我校近4年来160篇博士学位论文的定量评审结果进行了分析.结果表明,我校博士学位论文总体水平较高,但特别优秀的论文偏少;博士生基础理论较为坚实,具备良好的科研素质,但创新性不强,写作能力较差.针对存在问题,提出了8点思考,以改进培养工作,不断提高博士生培养质量.     

肠内营养治疗短肠综合征

肠内营养治疗短肠综合征伍烽综述金先庆审校自６０年代末期开始应用胃肠外营养（ｐａｒｅｎｔｅｒａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，ＰＮ）以来，短肠综合征（ｓｈｏｒｔｂｏｗｅｌｓｙｎ－ｄｒｏｍｅ，ＳＢＳ）患者的存活率和生存质量已得到明显的改善。在儿童，ＰＮ使残留小肠长...     

B超引导下穿刺活检术在小儿腹部实体肿瘤诊断中的应用

目的 微创性获取肿瘤患儿病理组织标本。方法 采用自动同步附压活检取样装置在B超引导下行穿刺活检术。结果 6例均穿刺顺利，无出血，感染，肿瘤破溃及穿刺道种植等并发症发生。其中5例穿刺组织病检确诊，1例假阴性，结论 B超引导下穿刺活检术安全，可靠，简便，对术前微创性确诊肿瘤有重要价值。